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HCV E1和HCMV IE86蛋白的性质和功能研究

中文摘要第1-12页
英文摘要第12-15页
缩略词第15-17页
第一部分 人丙型肝炎病毒E1基因的表达及E1蛋白质免疫学性质研究第17-134页
 Ⅰ 文献综述第18-61页
   ·人丙型肝炎病毒颗粒的特征第18-19页
     ·病毒颗粒的形态第18页
     ·病毒颗粒的密度第18-19页
     ·体外感染细胞内病毒颗粒第19页
   ·人丙型肝炎病毒的分子生物学第19-34页
     ·HCV基因组结构及序列的多样性第19-22页
     ·HCV蛋白质的加工及病毒蛋白的性质和功能第22-34页
   ·HCV的变异和分型第34-37页
     ·HCV的变异第34-35页
     ·HCV基因型第35-36页
     ·HCV基因型分布第36页
     ·其它第36-37页
   ·人丙型肝炎病毒的致病性第37-40页
     ·急性感染第37页
     ·慢性感染第37-38页
     ·HCV与肝细胞癌第38-40页
   ·HCV的流行病学和临床诊断第40-43页
     ·HCV的流行病学第40页
     ·HCV的临床诊断第40-43页
   ·人丙型肝炎病毒的疫苗第43-49页
     ·HCV感染后的免疫应答第44-46页
     ·HCV疫苗第46-49页
   ·HCV包膜蛋白的研究进展第49-61页
     ·包膜蛋白区的基因结构第49页
     ·包膜蛋白区高变区第49-51页
     ·包膜蛋白的表达第51-52页
     ·包膜蛋白的结构和功能第52-55页
     ·包膜蛋白的免疫与疫苗研究进展第55-61页
 Ⅱ 研究目的第61-63页
 Ⅲ HCV E1基因的克隆和序列分析第63-79页
   ·材料与方法第63-67页
     ·材料第63-64页
     ·方法第64-67页
   ·结果与分析第67-74页
     ·HCV E1基因的PCR扩增第67-68页
     ·HCV E1基因的克隆和鉴定第68-70页
     ·含HCV E1基因表达质粒的构建和鉴定第70页
     ·HCV E1基因序列测定和分析第70-72页
     ·武汉株(WH strain)和日本株(HCV-J型)E1基因DNA和编码氨基酸序列比较第72-74页
   ·讨论第74-77页
     ·HCV E1基因在HCV分型中的作用第74-77页
     ·HCV E1蛋白半胱氨酸残基与E1E2复合体第77页
     ·HCV E1蛋白糖基化位点第77页
     ·HCV E1蛋白抗原表位结构位点分析第77页
   ·小结第77-79页
 Ⅳ HCV E1基因在大肠杆菌中的表达及E1蛋白质免疫学性质的研究第79-93页
   ·材料与方法第79-83页
     ·材料第79-80页
     ·方法第80-83页
   ·结果与分析第83-90页
     ·HCV E1基因在大肠杆菌中的表达第83-85页
     ·HCV E1蛋白的纯化第85页
     ·HCV E1包涵体的电镜观察第85页
     ·HCV E1蛋白的抗原性分析第85-86页
     ·小鼠抗HCV E1 IgG的检测第86页
     ·家兔抗HCV E1 IgG的检测第86-87页
     ·小鼠抗HCV E1 IgA的检测第87页
     ·小鼠抗HCV E1 SIgG的检测第87-88页
     ·小鼠抗HCV E1 sIgA的检测第88页
     ·CTL效应的检测第88页
     ·小鼠CD_4~-、CD_8~-细胞数量的变化第88-89页
     ·迟发型超敏反应(DTH)结果第89页
     ·安全性第89-90页
   ·讨论第90-92页
     ·HCV E1蛋白抗原性第90页
     ·HCV E1蛋白诱生特异性体液免疫应答第90页
     ·HCV E1蛋白诱导小鼠粘膜产生免疫应答第90-91页
     ·HCV E1蛋白诱生特异性细胞免疫应答第91页
     ·HCV E1基因在大肠杆菌中的表达和包涵体蛋白的形成第91-92页
     ·HCV E1蛋白糖基化及其免疫学性质的关系第92页
   ·小结第92-93页
 Ⅴ HCV E1在昆虫细胞中的表达及E1蛋白质免疫学性质的研究第93-114页
   ·材料与方法第93-99页
     ·材料第93-94页
     ·方法第94-99页
   ·结果与分析第99-108页
     ·重组转移质粒的构建第99页
     ·重组病毒的筛选与鉴定第99-100页
     ·HCV E1基因在昆虫细胞中的表达第100-103页
     ·HCV E1蛋白的纯化第103页
     ·HCV E1蛋白的抗原性分析第103页
     ·昆虫细胞和大肠杆菌表达的HCV E1蛋白抗原性比较第103-104页
     ·小鼠抗HCV E1 IgG的检测第104页
     ·家兔抗HCV E1 IgG的检测第104-105页
     ·小鼠抗HCV E1 IgA的检测第105页
     ·小鼠抗HCV E1 sIgG的检测第105-106页
     ·小鼠抗HCV E1 sIgA的检测第106页
     ·CTL效应的检测第106页
     ·小鼠CD_4~-、CD_8~-细胞数量的变化第106-107页
     ·迟发型超敏反应(DTH)结果第107页
     ·安全性第107-108页
   ·讨论第108-113页
     ·HCV E1基因在昆虫细胞中的表达第108页
     ·HCV E1蛋白的纯化第108-109页
     ·HCV E1蛋白的抗原性第109-110页
     ·HCV E1蛋白诱生特异性体液免疫应答第110-111页
     ·HCV E1蛋白诱导小鼠粘膜产生免疫应答第111-112页
     ·HCV E1蛋白诱生特异性细胞免疫应答第112-113页
   ·小结第113-114页
 Ⅵ HCV E1基因在真核细胞中的表达和DNA免疫第114-133页
   ·材料与方法第114-118页
     ·材料第114页
     ·方法第114-118页
   ·结果与分析第118-127页
     ·含HCV E1基因真核表达质粒的构建和鉴定第118-119页
     ·HCV E1基因在真核细胞中的表达第119-121页
     ·HCV E1基因在小鼠肌肉组织中的原位表达第121-123页
     ·小鼠抗HCV E1 IgG的检测第123-124页
     ·兔抗HCV E1 IgG的检测第124-125页
     ·体外CTL检测第125-126页
     ·CD_4~-、CD_8~-细胞数量的变化第126页
     ·安全性第126-127页
   ·讨论第127-131页
     ·HCV DNA免疫第127-128页
     ·HCV E1基因在HepG2细胞中的表达第128页
     ·HCV E1基因在肌肉组织中的原位表达第128-129页
     ·pcE1诱生的特异性体液免疫应答第129-130页
     ·pcE1诱生的特异性细胞免疫应答第130页
     ·提高HCV DNA免疫效果的途径第130-131页
     ·HCV DNA疫苗的安全性第131页
   ·小结第131-133页
 Ⅶ 总结第133-134页
第二部分 人巨细胞病毒最早期蛋白与转录调控蛋白相互作用研究第134-176页
 Ⅰ 文献综述第135-146页
   ·人巨细胞病毒的致病性第135-136页
   ·人巨细胞病毒颗粒的特征第136页
   ·人巨细胞病毒基因组结构第136-137页
   ·人巨细胞病毒基因表达产物第137-139页
     ·HCMV的结构蛋白第137-139页
     ·HCMV的非结构蛋白第139页
   ·人巨细胞病毒立即早期基因第139-141页
     ·HCMV基因的时序性表达第139-140页
     ·HCMV IE基因的增强子第140-141页
   ·人巨细胞病毒立即早期蛋白功能第141-146页
     ·IE72蛋白的功能第141-142页
     ·IE86蛋白的功能第142-144页
     ·IE55蛋白的功能第144-146页
 Ⅱ 研究目的第146-149页
 Ⅲ 含HCMV IE86 cDNA重组质粒的构建第149-157页
   ·材料与方法第149-152页
     ·材料第149-150页
     ·方法第150-152页
   ·结果与分析第152-154页
     ·重组质粒pBIE86的构建和鉴定第152-153页
     ·重组质粒pGIE86的构建和鉴定第153-154页
   ·讨论第154-156页
     ·HCMV IE86基因第154-155页
     ·重组质粒pBIE86第155页
     ·重组质粒pGIE86第155-156页
   ·小结第156-157页
 Ⅳ HCMV IE86基因在大肠杆菌中的表达及GST-IE86融合蛋白的纯化第157-163页
   ·材料与方法第157-159页
     ·材料第157-158页
     ·方法第158-159页
   ·结果与分析第159-161页
     ·HCMV IE86基因在大肠杆菌中的表达第159-160页
     ·GST-IE86融合蛋白的纯化第160-161页
   ·讨论第161-162页
     ·可溶性GST-IE86融合蛋白第161页
     ·GST-IE86融合蛋白的纯化第161-162页
     ·HCMV IE86在昆虫细胞中的表达第162页
   ·小结第162-163页
 Ⅴ HCMV IE86蛋白与通用转录因子和转录调控因子相互作用的研究第163-175页
   ·材料与方法第163-164页
     ·材料第163页
     ·方法第163-164页
   ·结果与分析第164-168页
     ·IE86蛋白与通用转录因子TFⅡB的相互作用第164页
     ·IE86蛋白与转录调控因子SP1的相互作用第164-165页
     ·IE86蛋白与转录调控因子AP1的相互作用第165-166页
     ·IE86蛋白与转录调控因子AP2的相互作用第166-167页
     ·IE86蛋白与转录调控因子NF-κB的相互作用第167-168页
   ·讨论第168-174页
     ·HCMV IE86蛋白的功能第168-169页
     ·转录因子第169-171页
     ·HCMV IE86蛋白与TFⅡB的相互作用第171页
     ·HCMV IE86蛋白与SP1的相互作用第171-172页
     ·HCMV IE86蛋白与AP1的相互作用第172页
     ·HCMV IE86蛋白与AP2的相互作用第172页
     ·HCMV IE86蛋白与NF-κB的相互作用第172-173页
     ·HCMV IE86蛋白激活基因转录机制第173-174页
   ·小结第174-175页
 Ⅵ 总结第175-176页
附图第176-179页
参考文献第179-207页
在学期间发表的论文第207-210页
致谢第210页

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