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PCR方法鉴别奶牛胚胎性别相关环节的优化研究

摘要第1-6页
文献综述第6-26页
 1 性别决定的机理第6-10页
   ·性别决定的过程第6页
   ·性别决定的基因第6-10页
     ·SRY基因及其表达第6-7页
     ·SOX基因家族第7-8页
     ·其他相关基因第8-10页
     ·性别决定基因调控机制第10页
 2 性别控制技术第10-26页
   ·X-精子与Y-精子的分离第10-14页
     ·梯度法第11页
     ·电泳法第11-12页
     ·流式细胞分选法(flow cytometry法)第12-13页
     ·免疫法第13-14页
   ·胚胎性别鉴定第14-26页
     ·细胞遗传学方法(核型分析)第14-15页
     ·免疫学方法第15-16页
     ·X-染色体连锁酶定量法第16页
     ·分子生物学方法第16-19页
     ·LAMP法鉴别胚胎性别第19-26页
PCR方法鉴别奶牛胚胎性别相关环节的优化研究第26-52页
 1 前言第26-27页
 2 材料与方法第27-38页
   ·材料与试验仪器第27-31页
     ·试验材料第27页
     ·主要仪器设备第27-28页
     ·药品和酶第28页
     ·主要药品及试剂的配制第28-31页
   ·试验方法第31-38页
     ·哺乳动物基因组DNA的提取(血样)第31-32页
     ·引物的筛选第32页
     ·细胞的收集和最适取样细胞数的确定第32-33页
     ·胚胎质量的评定第33页
     ·胚胎细胞取样第33-34页
     ·模板DNA的制备第34页
     ·PCR检测第34-35页
     ·聚丙烯酰胺凝胶的制备及其银染第35-36页
     ·单细胞PCR第36-38页
 3 结果与分析第38-47页
   ·血样中提取的基因组总DNA第38页
   ·引物的筛选第38-41页
   ·引物st1/st2对细胞梯度的扩增结果第41-42页
   ·胚胎切割取样第42-43页
   ·已知性别的奶牛血样的性别鉴别第43页
   ·奶牛胚胎的性别鉴别结果第43-45页
   ·对新鲜胚胎和冷冻胚胎进行性别鉴别第45-47页
   ·单细胞PCR的扩增结果第47页
 4 讨论与结论第47-52页
   ·多重PCR法鉴别奶牛胚胎性别的可行性第47页
   ·多重PCR反应的污染问题第47-48页
   ·扩增对照序列的必要性第48页
   ·引物的筛选第48页
   ·胚胎切割第48-49页
   ·样品的处理第49页
     ·细胞样品的处理第49页
     ·胎牛样品的处理第49页
   ·单细胞PCR第49-50页
   ·胚胎性别鉴别技术在医学上的应用第50页
   ·结论第50-52页
参考文献第52-56页
英文摘要第56页

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