| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 第一章 植物原生质体培养及体细胞胚发生文献综述 | 第6-13页 |
| 一、 植物原生质体培养研究 | 第6-9页 |
| 1 分离原生质体的材料来源及生理状态 | 第6-7页 |
| 2 原生质体的分离 | 第7页 |
| 3 原生质体培养 | 第7-9页 |
| ·培养基 | 第7-8页 |
| ·激素 | 第8页 |
| ·培养密度 | 第8页 |
| ·原生质体培养方法 | 第8-9页 |
| 二、 植物体细胞胚发生研究 | 第9-10页 |
| 1 影响体细胞胚胎发生及其植株再生的因素 | 第9-10页 |
| ·材料 | 第9页 |
| ·培养基 | 第9页 |
| ·植物激素 | 第9-10页 |
| ·AgNO_3 | 第10页 |
| 2 体细胞胚胎发生的途径 | 第10页 |
| 三、 兰科植物的原生质体培养及体细胞胚发生研究 | 第10-13页 |
| 1 兰科植物原生质体培养 | 第10-11页 |
| 2 兰科植物的体细胞胚发生研究 | 第11-13页 |
| 第二章 铁皮石斛叶肉原生质体的分离与培养研究 | 第13-44页 |
| 材料与方法 | 第13-19页 |
| 一、 无菌苗体系的建立 | 第13页 |
| 二、 原生质体分离 | 第13-16页 |
| 1 原生质体分离过程中基本操作及相关参数的测定方法 | 第13-15页 |
| ·分离原生质体的材料 | 第13页 |
| ·酶液组成、配制及酶解 | 第13-14页 |
| ·原生质体纯化 | 第14-15页 |
| 2 原生质体分离条件比较 | 第15-16页 |
| ·酶液浓度与配比: | 第15页 |
| ·酶解时间选择 | 第15页 |
| ·渗透压调节剂浓度确定 | 第15-16页 |
| 三、 原生质体培养 | 第16-17页 |
| 1 原生质体培养基的组成与配制 | 第16页 |
| 2 培养条件选择 | 第16-17页 |
| ·培养方式 | 第16-17页 |
| ·光照强度 | 第17页 |
| ·培养密度 | 第17页 |
| ·激素配比 | 第17页 |
| ·培养温度 | 第17页 |
| 四、 分离与培养条件优化 | 第17-18页 |
| 1 渗透压调节剂比较 | 第17-18页 |
| 2 质壁分离、低温及暗处理 | 第18页 |
| 3 抗坏血酸 | 第18页 |
| 4 Ca~(2+)浓度 | 第18页 |
| 5 L-精氨酸 | 第18页 |
| 五. 暗处理前后铁皮石斛幼嫩叶片中葡萄糖含量的测定 | 第18-19页 |
| 结果与分析 | 第19-35页 |
| 一、 原生质体的分离 | 第19-23页 |
| 1 分离材料选择 | 第19-21页 |
| 2 酶液浓度与配比的影响 | 第21页 |
| 3 酶解时间的影响 | 第21-22页 |
| 4 渗透压调节剂浓度的影响 | 第22-23页 |
| 二、 原生质体培养 | 第23-29页 |
| 1 不同来源的原生质体分裂能力比较 | 第23-24页 |
| 2 培养基的影响 | 第24-26页 |
| 3 培养方式的影响 | 第26页 |
| 4 光照强度的影响 | 第26-27页 |
| 5 培养密度的影响 | 第27-28页 |
| 6 激素的影响 | 第28-29页 |
| 7 培养温度的影响 | 第29页 |
| 三、 原生质体分离与培养条件优化 | 第29-35页 |
| 1 不同渗透压调节剂的影响 | 第29-30页 |
| 2 质壁分离、暗处理和低温的影响 | 第30-32页 |
| 3 抗坏血酸的作用 | 第32-33页 |
| 4 Ca~(2+)的作用 | 第33-34页 |
| 5 精氨酸的作用 | 第34-35页 |
| 讨论 | 第35-39页 |
| 1 材料对原生质体分离的影响 | 第35页 |
| 2 酶及渗透压调节剂对原生质体分离的影响 | 第35-36页 |
| 3 预处理对原生质体分离与培养的影响 | 第36-37页 |
| 4 抗坏血酸对原生质体分离与培养的影响 | 第37-38页 |
| 5 Ca~(2+)对原生质体分离与培养的影响 | 第38页 |
| 6 精氨酸对原生质体培养的影响 | 第38-39页 |
| 附图及说明1 | 第39-44页 |
| 第三章 铁皮石斛离体根尖经体细胞胚再生植物研究 | 第44-55页 |
| 材料与方法 | 第44-46页 |
| 1 离体根尖培养 | 第44页 |
| 2 培养过程中组织切片与扫描电镜观察 | 第44-46页 |
| ·冷冻切片观察: | 第44页 |
| ·石蜡切片 | 第44-45页 |
| ·扫描电镜观察: | 第45-46页 |
| 结果与分析 | 第46-48页 |
| 1 离体根尖培养后经愈伤组织形成类原球茎 | 第46-47页 |
| ·愈伤组织诱导 | 第46-47页 |
| ·愈伤组织分化成类原球茎 | 第47页 |
| 2 离体根尖直接经体细胞胚发生形成类原球茎 | 第47-48页 |
| 3 离体根直接再生芽 | 第48页 |
| 讨论 | 第48-51页 |
| 1 外源激素对体细胞胚发生的影响 | 第49-50页 |
| 2 类原球茎是真正的体细胞胚 | 第50-51页 |
| 附图及说明2 | 第51-55页 |
| 附录: 原生质体培养基成分 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |