| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-36页 |
| 1 赤霉酸代谢与赤霉酸反应突变体 | 第12-25页 |
| 1．1 赤霉酸的生物合成与分解代谢 | 第12-14页 |
| 1．2 赤霉酸的生理作用 | 第14-17页 |
| 1．2．1 营养组织中细胞的生长 | 第14-15页 |
| 1．2．2 花和果实的发育 | 第15-16页 |
| 1．2．3 通过糊粉层细胞活化种子贮藏物 | 第16-17页 |
| 1．2．4 关于赤霉酸的细胞反应 | 第17页 |
| 1．3 赤霉酸代谢的调控 | 第17-20页 |
| 1．3．1 反馈调控 | 第18-19页 |
| 1．3．2 光调控 | 第19-20页 |
| 1．3．3 温度调控 | 第20页 |
| 1．4 赤霉酸反应突变体 | 第20-25页 |
| 1．4．1 矮秆或半矮秆赤霉酸反应不敏感突变体 | 第21-23页 |
| 1．4．2 组成型赤霉酸反应突变体 | 第23-25页 |
| 2 太谷核不育小麦的研究进展 | 第25-26页 |
| 2．1 太谷核不育小麦的发现及其遗传特点 | 第25页 |
| 2．2 太谷核不育小麦的生理生化特性 | 第25-26页 |
| 2．3 太谷核不育小麦的研究意义 | 第26页 |
| 3 矮败小麦的研究进展 | 第26-28页 |
| 3．1 矮秆基因Rht10的起源及其遗传特性 | 第26-27页 |
| 3．2 矮败小麦的起源及其优点 | 第27页 |
| 3．3 矮败小麦的遗传特性 | 第27-28页 |
| 4 植物体图位克隆基因的策略 | 第28-34页 |
| 4．1 图位克隆概况 | 第28-29页 |
| 4．2 分子标记技术的发展 | 第29-30页 |
| 4．3 大片段基因组文库的构建 | 第30-33页 |
| 4．3．1 λ噬菌体文库 | 第30-31页 |
| 4．3．2 Cosmid（柯斯质粒）文库 | 第31页 |
| 4．3．3 YAC（酵母人工染色体）文库 | 第31-32页 |
| 4．3．4 BAC（细菌人工染色体）文库 | 第32-33页 |
| 4．4 目标基因的获得与鉴定 | 第33-34页 |
| 5 立题意义及技术路线 | 第34-36页 |
| 5．1 立题意义 | 第34-35页 |
| 5．2 技术路线 | 第35-36页 |
| 第二章 矮败中国春小麦矮秆基因同源序列的克隆及多态性位点的检测 | 第36-58页 |
| 1 材料与方法 | 第36-46页 |
| 1．1 材料 | 第36-37页 |
| 1．2 总RNA的提取与检测 | 第37-38页 |
| 1．3 cDNA第一条链合成 | 第38页 |
| 1．4 RT-PCR | 第38-40页 |
| 1．5 PCR产物回收纯化 | 第40页 |
| 1．6 PCR产物与载体连接 | 第40页 |
| 1．7 PCR连接产物的转化 | 第40-41页 |
| 1．8 菌液PCR检测 | 第41-42页 |
| 1．9 测序用少量质粒提取 | 第42页 |
| 1．10 测序PCR反应体系及反应程序 | 第42-43页 |
| 1．11 测序PCR产物纯化 | 第43页 |
| 1．12 测序胶的制备 | 第43页 |
| 1．13 电泳 | 第43页 |
| 1．14 DNAstar分析软件的使用方法 | 第43-44页 |
| 1．15 基因组DNA的提取 | 第44-45页 |
| 1．16 高、矮秆基因多态性位点的检测 | 第45-46页 |
| 2 结果与分析 | 第46-53页 |
| 2．1 矮败中国春小麦回交群体的分析 | 第46-49页 |
| 2．2 总RNA的检测结果 | 第49页 |
| 2．3 矮败中国春小麦矮秆基因同源序列的克隆 | 第49-50页 |
| 2．4 Rh基因与GenBank数据库中已知序列的比对 | 第50-51页 |
| 2．5 Rh基因与H基因氨基酸序列的比对 | 第51-52页 |
| 2．6 Rh基因与普通小麦中其它矮秆基因氨基酸序列的比对 | 第52页 |
| 2．7 Rh基因与H基因多态性位点的检测 | 第52-53页 |
| 3 讨论 | 第53-58页 |
| 3．1 基于同源序列的候选基因法克隆功能基因的可行性 | 第53-54页 |
| 3．2 Rh基因与普通小麦中已克隆的其它矮秆基因之间的关系 | 第54页 |
| 3．3 Rh基因与普通小麦中矮秆基因Rht-Dlc（Rht10）的关系 | 第54-55页 |
| 3．4 等位特异PCR方法在检测基因多态性位点上的有效性 | 第55页 |
| 3．5 提高PCR技术克隆功能基因效率的几种方法 | 第55-58页 |
| 3．5．1 采用梯度PCR（Gradient PCR）方法寻找引物的最适退火温度 | 第55-56页 |
| 3．5．2 采用热启动方法加入DNA聚合酶有效防止引物二聚体的产生 | 第56页 |
| 3．5．3 使用PCR反应增效剂提高GC负集区的扩增效率 | 第56-58页 |
| 第三章 矮败中国春小麦矮秆材料BAC混合池的构建及初步筛选 | 第58-90页 |
| 1 材料与方法 | 第58-74页 |
| 1．1 材料 | 第58-59页 |
| 1．2 载体DNA的制备 | 第59-66页 |
| 1．2．1 载体DNA的分离和纯化 | 第59-61页 |
| 1．2．2 载体DNA酶切 | 第61-62页 |
| 1．2．3 载体DNA脱磷 | 第62页 |
| 1．2．4 载体DNA自连 | 第62-63页 |
| 1．2．5 载体DNA回收 | 第63页 |
| 1．2．6 载体DNA浓度估测及分装保存 | 第63-64页 |
| 1．2．7 载体脱磷效果检测 | 第64页 |
| 1．2．8 载体连接能力检测 | 第64-66页 |
| 1．3 高分子量核DNA的制备 | 第66-67页 |
| 1．3．1 细胞核的分离 | 第66页 |
| 1．3．2 胶片的制备 | 第66-67页 |
| 1．3．3 胶片质量的检测 | 第67页 |
| 1．4 部分酶切最佳酶用量的确定 | 第67-69页 |
| 1．4．1 胶片中大片段DNA的纯化 | 第67页 |
| 1．4．2 非目的片段的去除 | 第67-68页 |
| 1．4．3 部分酶切最佳酶用量的确定 | 第68-69页 |
| 1．5 大片段DNA的大量酶切 | 第69-70页 |
| 1．6 酶切DNA片段的第一次选择 | 第70-71页 |
| 1．7 大片段DNA的第二次选择 | 第71页 |
| 1．8 大片段DNA与载体DNA的连接 | 第71页 |
| 1．9 连接产物的转化 | 第71-72页 |
| 1．10 重组克隆的分析 | 第72页 |
| 1．11 BAC混合池的构建 | 第72-73页 |
| 1．12 BAC混合池的检测 | 第73页 |
| 1．12．1 平均插入片段大小和空载率的检测 | 第73页 |
| 1．12．2 BAC克隆稳定性的检测 | 第73页 |
| 1．13 PCR方法筛选BAC混合池 | 第73-74页 |
| 1．13．1 对BAC混合池的筛选 | 第73页 |
| 1，13．2 对单克隆的筛选 | 第73-74页 |
| 1．13．3 阳性克隆的酶切鉴定 | 第74页 |
| 2 结果与分析 | 第74-85页 |
| 2．1 BAC载体DNA的制备 | 第74-78页 |
| 2．1．1 闭环载体DNA的酶切 | 第74-75页 |
| 2．1．2 脱磷后线性载体DNA的回收 | 第75-76页 |
| 2．1．3 回收后载体DNA的脱磷效果检测 | 第76-77页 |
| 2．1．4 回收后载体DNA与BamHⅠ酶切的入DNA连接效果检测 | 第77-78页 |
| 2．2 矮败中国春小麦中矮秆材料大片段DNA的制备 | 第78-81页 |
| 2．2．1 大片段DNA胶片质量的检测及浓度估测 | 第78-79页 |
| 2．2．2 部分酶切确定最佳酶用量 | 第79-80页 |
| 2．2．3 酶切后DNA片段的二次选择 | 第80-81页 |
| 2．2．4 二次选择后大片段DNA浓度的估测 | 第81页 |
| 2．3 矮秆材料BAC混合池的构建 | 第81-83页 |
| 2．3．1 大片段DNA与载体DNA的大量连接、转化及BAC混合池的构建 | 第81-82页 |
| 2．3．2 BAC克隆平均插入片段的估测 | 第82-83页 |
| 2．3．3 BAC克隆稳定性检测 | 第83页 |
| 2．4 BAC混合池的筛选及阳性克隆的鉴定 | 第83-85页 |
| 2．4．1 BAC混合池的初步筛选及阳性克隆的获得 | 第83页 |
| 2．4．2 阳性克隆的初步鉴定 | 第83-85页 |
| 3 讨论 | 第85-90页 |
| 3．1 BAC载体的选择及载体DNA的制备 | 第85-86页 |
| 3．2 影响大片段DNA的几个重要因素 | 第86-87页 |
| 3．3 在超大基因组物种中构建BAC文库的策略 | 第87-89页 |
| 3．4 关于筛选BAC混合池的方法 | 第89-90页 |
| 全文结论 | 第90-92页 |
| 参考文献 | 第92-110页 |
| 附录1 | 第110-111页 |
| 附录2 | 第111-112页 |
| 附录3 | 第112-118页 |
| 致谢 | 第118-119页 |
| 作者简历 | 第119页 |
