中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-7页 |
第一部分 前言 | 第7-16页 |
一、 干扰素概述 | 第8-12页 |
1. 干扰素的分类及特性 | 第8-9页 |
2. 干扰素的诱导合成 | 第9页 |
3. 干扰素系统的生物进化及其功能 | 第9-10页 |
4. 干扰素作用机理 | 第10-11页 |
5. 干扰素系统在病毒感染中的重要作用 | 第11-12页 |
二、 猪α干扰素研究进展 | 第12-14页 |
1. 猪干扰素简介 | 第12页 |
2. 猪干扰素理化性质及结构特点 | 第12-13页 |
3. 猪干扰素的基因工程 | 第13-14页 |
4. 猪α干扰素的实际应用及前景展望 | 第14页 |
三、 研究目的、方法及结果 | 第14-16页 |
1. 研究目的 | 第14-15页 |
2. 研究方法 | 第15页 |
3. 研究结果 | 第15-16页 |
第二部分 实验内容 | 第16-50页 |
第一章 猪α干扰素基因的克隆及测序 | 第17-29页 |
一、 实验材料 | 第17页 |
二、 实验方法 | 第17-22页 |
1. 试剂配制 | 第17-18页 |
2. 基因组DNA提取 | 第18页 |
3. 假基因的扩增 | 第18-20页 |
4. 目的基因的扩增 | 第20-22页 |
5. SOE产物的克隆 | 第22页 |
四、 实验结果 | 第22-26页 |
1. 假基因的扩增 | 第22-24页 |
2. 目的基因扩增 | 第24-25页 |
3. SOE产物的克隆与鉴定 | 第25-26页 |
五、 讨论 | 第26-29页 |
第二章 猪α干扰素基因以非融合蛋白形式在大肠杆菌中的表达 | 第29-39页 |
一、 实验材料 | 第29-30页 |
二、 实验方法 | 第30-33页 |
1、 非融合蛋白表达载体的构建 | 第30页 |
2、 非融合蛋白的诱导表达 | 第30-31页 |
3、 非融合蛋白的提取 | 第31-32页 |
4、 BCA法测定蛋白浓度 | 第32页 |
5、 细胞病变抑制法检测干扰素抗病毒活性 | 第32-33页 |
三、 实验结果 | 第33-37页 |
1、 非融合蛋白表达载体的构建 | 第33-34页 |
2、 非融合蛋白的诱导表达 | 第34页 |
3、 等电点分析 | 第34-35页 |
4、 非融合蛋白的提取 | 第35-36页 |
5、 抗病毒活性检测 | 第36-37页 |
四、 讨论 | 第37-39页 |
第三章 猪α干扰素基因的定点突变及其融合蛋白形式在大肠杆菌中表达 | 第39-50页 |
一、 实验材料 | 第39-40页 |
二、 实验方法 | 第40-43页 |
1、 定点突变 | 第40-41页 |
2、 融合蛋白表达载体的构建 | 第41-42页 |
3、 融合蛋白的诱导表达 | 第42-43页 |
4、 融合蛋白的提取 | 第43页 |
5、 细胞病变抑制法检测干扰素抗病毒活性 | 第43页 |
三、 实验结果 | 第43-48页 |
1、 定点突变及融合蛋白表达载体的构建 | 第43-45页 |
2、 融合蛋白的诱导表达 | 第45-46页 |
3、 等电点分析 | 第46-47页 |
4、 融合蛋白的提取 | 第47-48页 |
5、 抗病毒活性检测 | 第48页 |
四、 讨论 | 第48-50页 |
结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-53页 |
致谢 | 第53页 |