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猪繁殖与呼吸综合征弱毒疫苗株基质膜(M)蛋白和核衣壳(N)蛋白基因的研究

致谢第1-8页
内容提要第8-9页
引言第9-11页
第一篇 文献综述第11-39页
 第一章 猪繁殖与呼吸综合征研究进展第11-39页
  一 发生历史第11-12页
  二 经济影响第12页
  三 病原第12-17页
  四 流行病学第17-18页
  五 临床症状第18-19页
  六 病理学第19-21页
  七 诊断第21-25页
  八 免疫学第25-26页
  九 防制第26-27页
  十 结语第27-28页
  参考文献第28-39页
第二篇 研究内容第39-95页
 第二章 猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗弱毒株的克隆与鉴定第39-48页
  摘要第39-40页
  一 材料与方法第40-41页
   1 毒株第40页
   2 细胞第40页
   3 PRRSV弱毒的培养第40页
   4 PRRSV弱毒的克隆第40页
   5 PRRSVMc TCID_(50)测定第40页
   6 电镜标本的制备第40页
   7 ELISA抗原的制备第40-41页
   8 参考血清第41页
   9 ELISA试验第41页
  二 结果第41-44页
   1 PRRSV培养结果第41页
   2 PRRSV的克隆与纯化第41-44页
   3 PRRSVMc电镜形态结构第44页
   4 ELISA试验鉴定第44页
  三 讨论第44-45页
  参考文献第45-47页
  英文摘要第47-48页
 第三章 猪繁殖与呼吸综合征病毒基质膜蛋白和核衣壳蛋白基因的克隆与鉴定第48-60页
  摘要第48-49页
  一 材料与方法第49-52页
   1 毒株来源第49页
   2 PCR引物的设计与合成第49页
   3 PRRSVMc的提纯和RNA的制备第49页
   4 反转录(RT)第49-50页
   5 PCR反应第50页
   6 PCR产物凝胶电泳第50页
   7 PRRSVMc MN基因的克隆第50-51页
   8 MN基因的亚克隆第51-52页
   9 部分序列测定鉴定第52页
  二 结果第52-54页
   1 PCR扩增产物及其重组质粒的初步鉴定第52-53页
   2 PRRSVMc MN基因的部分序列第53-54页
  三 讨论第54-57页
  参考文献第57-59页
  英文摘要第59-60页
 第四章 猪繁殖与呼吸综合征病毒膜蛋白和核衣壳蛋白基因序列分析第60-79页
  摘要第60-61页
  一 材料与方法第61-63页
   1 毒株来源第61页
   2 引物的设计与合成第61页
   3 病毒提纯及RNA的制备第61页
   4 PBVMN表达载体的构建第61页
   5 PBSMN重组质粒的构建第61页
   6 PBSMN MN基因序列分析第61-63页
  二 结果第63-73页
   1 MN蛋白基因的扩增与克隆第63-64页
   2 PRRSVMc MN基因序列测定结果第64-66页
   3 PRRSVMc MN基因与其它毒株MN基因序列比较第66-70页
   4 PRRSVMc MN基因推导的氨基酸序列与PRRSV美洲毒株和欧洲毒株的比较第70-71页
   5 PRRSVMc MN基因酶切位点分析第71-73页
  三 讨论第73-75页
  参考文献第75-78页
  英文摘要第78-79页
 第五章 猪繁殖与呼吸综合征病毒膜蛋白和核衣壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达第79-89页
  摘要第79页
  一 材料与方法第79-82页
   1 病毒和细胞第79页
   2 载体和宿主菌第79页
   3 酶及化学试剂第79-80页
   4 引物的设计与合成第80页
   5 病毒的培养和RNA的制备第80页
   6 PRRSV高免血清的制备第80页
   7 PBVMN表达质粒的构建第80-81页
   8 MN蛋白的表达及鉴定第81-82页
  二 结果第82-84页
   1 RT-PCR扩增产物及其重组质粒鉴定第82-84页
   2 SDS-PAGE和免疫印迹第84页
  三 讨论第84-85页
  参考文献第85-88页
  英文摘要第88-89页
 第六章 应用RT-PCR直接检测流产胎儿组织中猪繁殖与呼吸综合征病毒第89-95页
  摘要第89页
  一 材料与方法第89-91页
   1 病毒样品制备第89-90页
   2 RNA制备第90页
   3 引物设计第90页
   4 反转录(RT)第90-91页
   5 PCR反应第91页
   6 病毒分离鉴定第91页
  二 结果第91-92页
  三 讨论第92页
  参考文献第92-94页
  英文摘要第94-95页
结语第95页

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