| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-9页 |
| 前言 | 第9-24页 |
| 1. 抗肿瘤药多柔比星会引起心脏毒性 | 第9-16页 |
| ·抗肿瘤药普遍具有明显的药理毒性 | 第9-10页 |
| ·蒽环类抗肿瘤药多柔比星简介 | 第10-11页 |
| ·多柔比星对心脏的毒副作用 | 第11-16页 |
| 2. SIRT1在心血管系统中的发挥重要作用 | 第16-19页 |
| ·SIRT1分子简介 | 第16-17页 |
| ·SIRT1在心脏中发挥重要作用 | 第17-19页 |
| 3. 本实验室对于SIRT1在心脏中功能的研究进展 | 第19-23页 |
| ·SIRT1 H363Y转基因小鼠发生了扩张型心肌病 | 第19-20页 |
| ·转基因小鼠心肌细胞凋亡增加 | 第20-21页 |
| ·转基因小鼠心肌细胞凋亡的分子机制 | 第21-22页 |
| ·转基因小鼠导致扩张型心肌病和心力衰竭的机制总结 | 第22页 |
| ·本实验室研究结果提示SIRT1可能对多柔比星的心脏毒性有保护作用 | 第22-23页 |
| 4. 本研究的主要内容 | 第23-24页 |
| 材料与方法 | 第24-46页 |
| 一、实验材料 | 第24-26页 |
| 1. 实验用细胞系、菌株和质粒 | 第24页 |
| 2. 实验用大、小鼠及饲料 | 第24页 |
| 3. 限制性内切酶及其他修饰酶 | 第24-25页 |
| 4. 抗体 | 第25页 |
| 5. 其它主要试剂及试剂盒 | 第25页 |
| 6. 主要仪器设备 | 第25-26页 |
| 二、实验方法 | 第26-46页 |
| 1. 基本技术路线 | 第26-27页 |
| 2. HeLa、293、H9C2等细胞的培养 | 第27页 |
| 3. 非病毒方法介导的哺乳动物细胞转染 | 第27-28页 |
| 4. 腺病毒表达载体的构建、包装及靶细胞的感染 | 第28-33页 |
| 5. 新生大鼠心肌细胞分离和培养 | 第33-35页 |
| 6. PCR方法检测实验中质粒的表达效果 | 第35-37页 |
| 7. 细胞及组织总蛋白提取及浓度测定 | 第37-39页 |
| 8. Western Blot蛋白电泳实验 | 第39-42页 |
| 8. 免疫荧光观察细胞凋亡状况 | 第42-43页 |
| 9. 实验动物传代、鉴定、给药 | 第43-44页 |
| 10. 原位末端标记法(TdT-mediated dUTP Nick-End labeling,TUNEL) | 第44-45页 |
| 11. 统计学分析 | 第45-46页 |
| 实验结果 | 第46-55页 |
| 1. 多柔比星处理的心肌细胞中SIRT1表达随时间发生改变 | 第46-48页 |
| 2. 在心肌细胞中,SIRT1过表达可以保护多柔比星引起的心肌细胞凋亡 | 第48页 |
| 3. SIRT1干扰会使多柔比星引起的心肌细胞凋亡增加 | 第48-51页 |
| 4. SIRT1H363Y转基因动物中心肌细胞凋亡增加 | 第51-52页 |
| 5. SIRT1H363Y转基因动物在多柔比星处理时死亡率增加 | 第52-55页 |
| 讨论 | 第55-61页 |
| 1. 心肌细胞凋亡是造成多柔比星的心脏毒性的重要因素 | 第55-57页 |
| ·心脏毒性限制了多柔比星的临床应用 | 第55-56页 |
| ·多柔比星心脏毒性的重要原因是心肌细胞凋亡 | 第56页 |
| ·本研究为保护多柔比星引起的心脏毒性提供了新的途径 | 第56-57页 |
| 2. SIRT1可以保护多柔比星引起的心肌细胞凋亡 | 第57-59页 |
| ·SIRT1对DNA断裂和氧化应激引起的凋亡具有保护作用 | 第57-58页 |
| ·内源和外源的SIRT1都可以保护心肌细胞应对多柔比星的刺激 | 第58-59页 |
| 3. SIRT1H363Y心脏特异性转基因动物对多柔比星更加敏感 | 第59-60页 |
| ·SIRT1H363Y转基因动物心脏凋亡增加 | 第59页 |
| ·SIRT1活性抑制使小鼠在多柔比星刺激下生存率下降 | 第59-60页 |
| 4. 本研究的不足与展望 | 第60-61页 |
| 小结 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-65页 |
| 非论文综述 | 第65-86页 |
| SIRTUINS家族与心血管疾病 | 第65-86页 |
| 1. 简介 | 第65-66页 |
| 2. sirtuins和代谢调节 | 第66-68页 |
| 3. 心脏中的SIRTUINS | 第68-71页 |
| 4. 血管系统中的SIRTUINS | 第71-74页 |
| 5. SIRTUIN活性的调节 | 第74-77页 |
| 6. 总结 | 第77-78页 |
| 7. 参考文献 | 第78-86页 |
| 英文名词及缩写 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 个人简历 | 第88-91页 |
