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灵芝硒多糖SeGLP-2B-1诱导乳腺癌细胞MCF-7凋亡机制的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-12页
第一章 文献综述第12-37页
   ·硒化合物的抗肿瘤研究第12-18页
     ·硒化合物的种类第12页
     ·硒化合物的抗肿瘤作用第12-14页
     ·硒化合物生物活性与抗肿瘤作用的关系第14-18页
       ·硒化合物的细胞毒作用第14页
       ·硒化合物的抗氧化作用第14-15页
       ·硒化合物的解毒作用第15页
       ·硒化合物的免疫作用第15-16页
       ·硒化合物诱导肿瘤细胞凋亡第16-17页
       ·硒化合物对癌基因的影响第17页
       ·硒化合物与其他元素、维生素相互作用第17-18页
       ·硒化合物的其它抗肿瘤作用第18页
   ·多糖诱导肿瘤细胞凋亡的研究第18-26页
     ·细胞凋亡及其机制第19-22页
       ·细胞凋亡第19-20页
       ·细胞凋亡的分子机制第20-22页
     ·多糖能诱导肿瘤细胞凋亡第22-23页
     ·多糖诱导肿瘤细胞凋亡的机制第23-26页
       ·调控癌基因第24页
       ·死亡受体途径第24-25页
       ·线粒体途径第25页
       ·端粒酶第25页
       ·DNA 拓扑酶第25-26页
       ·改变钙离子浓度第26页
       ·改变膜流动性第26页
   ·硒多糖的生物学特性及诱导肿瘤细胞凋亡的研究第26-35页
     ·硒多糖的来源及其分离纯化第26-27页
     ·硒多糖的结构特性及检测手段第27-28页
     ·硒多糖能诱导肿瘤细胞凋亡第28-29页
     ·硒多糖诱导肿瘤细胞凋亡的机制第29-35页
       ·氧化应激与细胞凋亡第29-30页
       ·基因调控与细胞凋亡第30-31页
       ·细胞周期与细胞凋亡第31-32页
       ·死亡受体与细胞凋亡第32-33页
       ·线粒体与细胞凋亡第33-35页
       ·其他凋亡机制第35页
   ·本研究的目的和意义第35-37页
第二章 富硒灵芝的培养及其分离纯化第37-44页
   ·材料第37页
     ·材料和试剂第37页
     ·仪器第37页
   ·方法第37-40页
     ·富硒灵芝的培养第37-38页
     ·灵芝硒多糖的提取第38页
     ·灵芝硒多糖的分离纯化第38-40页
       ·去蛋白第38页
       ·脱色第38-39页
       ·分级沉淀第39页
       ·DEAE 纤维素柱层析第39页
       ·高效液相色谱HPLC 纯化第39-40页
       ·灵芝硒多糖SeGLP-2B-1 的HPLC 纯化第40页
     ·各级灵芝硒多糖中硒含量的测定第40页
   ·结果和分析第40-42页
     ·DEAE-Cellulose 纤维柱层析分离纯化灵芝硒多糖SeGLP-2B第40-41页
     ·TSK-G5000PW 柱的HPLC 分离纯化灵芝硒多糖SeGLP-2B第41-42页
     ·硒多糖SeGLP-2B-1 SHIM-PACK 柱的HPLC 纯化第42页
   ·讨论第42-44页
第三章 灵芝硒多糖 SeGLP-2B-1 诱导 MCF-7 细胞凋亡的研究第44-52页
   ·材料第44-45页
     ·材料和试剂第44页
     ·动物瘤株第44页
     ·仪器第44-45页
   ·方法第45-46页
     ·细胞培养第45页
     ·实验药物的选择第45页
     ·体外药物敏感性和细胞生长抑制实验-MTT 比色法第45-46页
     ·MCF-7 细胞总DNA 提取及琼脂糖凝胶电泳第46页
     ·流式细胞仪测定细胞周期第46页
   ·结果第46-50页
     ·SeGLP-2B-1 对MCF-7 细胞的生长抑制作用第46-48页
     ·SeGLP-2B-1 对MCF-7 细胞DNA 的影响第48-49页
     ·SeGLP-2B-1 对细胞周期的影响第49-50页
   ·讨论第50-52页
第四章 灵芝硒多糖 SeGLP-2B-1 诱导 MCF-7 细胞凋亡机制的研究第52-68页
   ·材料第52-54页
     ·材料与试剂第52-53页
     ·仪器第53-54页
   ·实验方法第54-57页
     ·流式细胞仪检测线粒体膜电位的变化第54页
       ·Rhodamine123 的配制第54页
       ·处理收集细胞第54页
       ·Rhodamine123 反应第54页
     ·ROS 检测试剂盒检测细胞内活性氧水平第54-55页
       ·DCFH-DA 的配制第54-55页
       ·处理收集细胞第55页
       ·加DCFH-DA 作用并检测第55页
     ·Western Blot 检测caspase 系列酶的表达第55-57页
       ·处理收集细胞第55页
       ·蛋白提取第55页
       ·测定样品蛋白质浓度第55-56页
       ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第56页
       ·转膜第56-57页
       ·封闭第57页
       ·一抗结合第57页
       ·二抗结合第57页
       ·ECL 显色第57页
   ·实验结果第57-65页
     ·SeGLP-2B-1 对细胞线粒体膜电位的影响第57-61页
     ·SeGLP-2B-1 对细胞内活性氧水平的影响第61-62页
     ·SeGLP-2B-1 对MCF-7 细胞内细胞色素C 表达水平的影响第62页
     ·SeGLP-2B-1 对MCF-7 细胞内caspase 系列酶表达水平的影响第62-64页
     ·SeGLP-2B-1 对MCF-7 细胞内PARP 表达水平的影响第64-65页
   ·讨论第65-68页
第五章 结论第68-69页
参考文献第69-78页
致谢第78-79页
作者简历及硕士在读期间科研成果和发表论文的情况第79页

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