缩略语表 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-11页 |
ABSTRACT | 第11-14页 |
前言 | 第14-15页 |
文献回顾 | 第15-29页 |
(一) 脂滴的概述 | 第15-19页 |
(二) 脂滴的内质网合成模型 | 第19-20页 |
(三) PAT 家族蛋白 | 第20-26页 |
(四) 用蛋白组学技术研究探索新的脂滴相关蛋白 | 第26-27页 |
(五) 结语 | 第27-29页 |
正文 | 第29-52页 |
实验一 OXPAT 基因的克隆及亚细胞定位研究 | 第29-39页 |
1 材料 | 第29-32页 |
·细胞系与菌株 | 第29页 |
·质粒 | 第29-30页 |
·常规试剂 | 第30页 |
·主要仪器 | 第30-31页 |
·溶液配制 | 第31-32页 |
2 方法 | 第32-34页 |
·OXPAT 基因的克隆 | 第32-33页 |
·OXPAT 真核表达质粒的构建 | 第33页 |
·OXPAT 在293T 细胞中的表达 | 第33-34页 |
·OXPAT 转染C057 细胞 | 第34页 |
·免疫荧光染色 | 第34页 |
3 结果 | 第34-36页 |
·OXPAT 基因的克隆 | 第34-35页 |
·OXPAT 基因真核表达质粒的构建 | 第35-36页 |
·OXPAT 的亚细胞定位 | 第36页 |
4 讨论 | 第36-39页 |
实验二 携带OXPAT 腺病毒的构建 | 第39-47页 |
1 材料 | 第39-40页 |
·菌株、细胞 | 第39页 |
·质粒 | 第39-40页 |
·主要试剂 | 第40页 |
·主要设备 | 第40页 |
2 方法 | 第40-42页 |
·穿梭质粒pShuttle-HA-OXPAT 的构建 | 第40-41页 |
·BJ5183 菌中重组产生重组腺病毒质粒 | 第41页 |
·重组腺病毒Ad-OXPAT 的包装 | 第41页 |
·重组腺病毒滴度的测定 | 第41-42页 |
3 结果 | 第42-44页 |
·pShuttle-HA-OXPAT、pAd-HA-OXPAT 质粒的构建 | 第42-43页 |
·携带OXPAT 腺病毒的包装 | 第43页 |
·Ad-HA-OXPAT 滴度的测定 | 第43-44页 |
4 讨论 | 第44-47页 |
实验三 OXPAT 对肝细胞脂滴形态的影响 | 第47-52页 |
1 材料 | 第47-48页 |
·实验动物 | 第47页 |
·常规试剂 | 第47页 |
·实验材料 | 第47-48页 |
2 方法 | 第48-49页 |
·肝细胞的分离 | 第48页 |
·存活性鉴定 | 第48页 |
·形态学观察 | 第48-49页 |
3 结果 | 第49-50页 |
·肝细胞的分离与体外培养 | 第49页 |
·携带OXPAT 腺病毒对肝细胞的感染 | 第49-50页 |
·OXPAT 对肝细胞脂滴形态的影响 | 第50页 |
4 讨论 | 第50-52页 |
小结 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-58页 |
个人简历和研究成果 | 第58-59页 |
致谢 | 第59页 |