玉米海藻糖含量测定及其合成酶基因的克隆与序列分析
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-29页 |
| ·海藻糖的理化性质 | 第9-10页 |
| ·海藻糖的合成途径 | 第10-13页 |
| ·TPS-TPP途径 | 第10-11页 |
| ·TreY-TreZ途径 | 第11-12页 |
| ·TreS途径 | 第12页 |
| ·TSase途径 | 第12-13页 |
| ·海藻糖的降解途径 | 第13-15页 |
| ·海藻糖的功能 | 第15-18页 |
| ·逆境下海藻糖对生物体的保护作用 | 第15-17页 |
| ·海藻糖可能起调节因子作用 | 第17-18页 |
| ·海藻糖的其他作用 | 第18页 |
| ·海藻糖保护生物分子的机理 | 第18-20页 |
| ·“水替代”假说 | 第19页 |
| ·“玻璃态”假说 | 第19-20页 |
| ·“化学稳态”假说 | 第20页 |
| ·海藻糖合成酶(TPS、TPP)的研究 | 第20-23页 |
| ·TPS的研究情况 | 第20-22页 |
| ·TPP的研究情况 | 第22-23页 |
| ·海藻糖的检测方法 | 第23-24页 |
| ·高效液相色谱法 | 第23-24页 |
| ·气相色谱─质谱法 | 第24页 |
| ·EST与RACE技术 | 第24-28页 |
| ·表达序列标签(EST) | 第24-26页 |
| ·cDNA末端快速扩增法(RACE) | 第26-28页 |
| ·目的与意义 | 第28-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-36页 |
| ·试验材料 | 第29页 |
| ·植物材料 | 第29页 |
| ·主要仪器设备 | 第29页 |
| ·主要药品和试剂 | 第29页 |
| ·试验方法 | 第29-36页 |
| ·干旱试验设计 | 第29-30页 |
| ·进行HPLC分析前的样品处理 | 第30页 |
| ·HPLC仪器条件 | 第30页 |
| ·网络资源及应用软件 | 第30页 |
| ·基因克隆 | 第30-35页 |
| ·蛋白质性质分析与结构预测 | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-50页 |
| ·海藻糖的检测 | 第36-39页 |
| ·玉米叶片总RNA的提取 | 第39页 |
| ·电泳结果 | 第39-40页 |
| ·测序结果及序列分析 | 第40-50页 |
| ·物种间TPS氨基酸序列的比对 | 第41-48页 |
| ·玉米与其他物种TPS序列的遗传分析 | 第48-49页 |
| ·玉米与其他物种TPS蛋白质结构的相似性比较 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-54页 |
| ·HPLC检测海藻糖 | 第50-51页 |
| ·流动相的比例 | 第50页 |
| ·样品的处理 | 第50页 |
| ·进样量的选择 | 第50页 |
| ·柱温的选择 | 第50-51页 |
| ·检测器的影响 | 第51页 |
| ·玉米ZmTPS的克隆 | 第51-52页 |
| ·序列克隆 | 第51页 |
| ·5'端RACE及引物设计 | 第51-52页 |
| ·影响海藻糖含量及TPS活性的因素 | 第52-53页 |
| 小结 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 附录 玉米ZmTPS cDNA全序列 | 第62-65页 |
