摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-22页 |
·鹿茸角的生长发育规律 | 第10-11页 |
·鹿茸生长机制 | 第10页 |
·鹿茸生长点在其顶端的证明 | 第10-11页 |
·影响鹿茸生长的因素 | 第11页 |
·鹿茸的化学成分、组织结构和药用价值 | 第11-14页 |
·鹿茸的化学成分 | 第12页 |
·鹿茸的组织结构 | 第12-14页 |
·鹿茸的药用价值 | 第14页 |
·鹿茸生长与激素和生长因子的关系 | 第14-19页 |
·血浆中睾酮、雌二醇的浓度与鹿茸生长的关系 | 第15-16页 |
·生长因子与鹿茸生长的关系 | 第16-19页 |
·原位杂交研究进展 | 第19-21页 |
·本研究的目的及意义 | 第21-22页 |
第二章 GHR 基因的CDNA 克隆及序列分析 | 第22-30页 |
·材料与方法 | 第22-25页 |
·试验材料 | 第22页 |
·总RNA 的提取(Trizol 法) | 第22-23页 |
·引物设计 | 第23页 |
·反转录 | 第23页 |
·确定提取RNA 纯度 | 第23-24页 |
·PCR 扩增 | 第24页 |
·扩增片段的分离和克隆 | 第24页 |
·克隆产物的鉴定 | 第24-25页 |
·序列分析 | 第25页 |
·结果 | 第25-28页 |
·鹿茸顶端组织提取RNA 的完整性 | 第25页 |
·提取RNA 纯度的检测 | 第25-26页 |
·Ta 对GHR 引物扩增效率的影响 | 第26页 |
·MgCl_2 浓度对GHR 引物扩增效率的影响 | 第26页 |
·重组质粒的PCR 初步鉴定 | 第26-27页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第27页 |
·克隆所得序列、Genbank 登陆号及同源性比对分析 | 第27-28页 |
·讨论 | 第28-30页 |
第三章 GHR、IGF-1、IGF-1R 基因在鹿茸顶端的组织定位 | 第30-39页 |
·材料与方法 | 第30-35页 |
·试验材料 | 第30页 |
·DNA 的提取 | 第30-31页 |
·GHR、IGF-1、IGF-1R 基因探针的制备 | 第31-33页 |
·估计探针产量 | 第33-34页 |
·冰冻切片的制备 | 第34页 |
·原位杂交 | 第34-35页 |
·结果 | 第35-37页 |
·GHR、IGF-1、IGF-1R 基因PCR 产物回收后的电泳检测图 | 第35-36页 |
·GHR、IGF-1、IGF-1R 基因回收后的浓度测定 | 第36页 |
·估计探针产量 | 第36-37页 |
·原位杂交 | 第37页 |
·讨论 | 第37-39页 |
第四章 半定量RT-PCR 法检测鹿茸顶端GHR、IGF-1 基因的表达水平 | 第39-45页 |
·材料与方法 | 第39-40页 |
·试验材料 | 第39页 |
·总RNA 的提取 | 第39页 |
·反转录(参照2.1.4) | 第39页 |
·PCR 扩增 | 第39-40页 |
·GHR 和IGF-1 基因的半定量检测 | 第40页 |
·数据分析 | 第40页 |
·结果 | 第40-44页 |
·鹿茸各部位所提的RNA | 第40-41页 |
·确定反应的循环次数 | 第41-42页 |
·各部位GHR、IGF-1 和β-actin 基因的扩增条带 | 第42页 |
·GHR、IGF-1 基因在鹿茸顶端各层mRNA 表达丰度的检测 | 第42-44页 |
·讨论 | 第44-45页 |
结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-53页 |
附录 | 第53-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
作者简介 | 第62页 |