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GHR、IGF-1、IGF-1R基因在鹿茸顶端的组织定位及鹿GHR基因cDNA克隆

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-10页
第一章 文献综述第10-22页
   ·鹿茸角的生长发育规律第10-11页
     ·鹿茸生长机制第10页
     ·鹿茸生长点在其顶端的证明第10-11页
     ·影响鹿茸生长的因素第11页
   ·鹿茸的化学成分、组织结构和药用价值第11-14页
     ·鹿茸的化学成分第12页
     ·鹿茸的组织结构第12-14页
     ·鹿茸的药用价值第14页
   ·鹿茸生长与激素和生长因子的关系第14-19页
     ·血浆中睾酮、雌二醇的浓度与鹿茸生长的关系第15-16页
     ·生长因子与鹿茸生长的关系第16-19页
   ·原位杂交研究进展第19-21页
   ·本研究的目的及意义第21-22页
第二章 GHR 基因的CDNA 克隆及序列分析第22-30页
   ·材料与方法第22-25页
     ·试验材料第22页
     ·总RNA 的提取(Trizol 法)第22-23页
     ·引物设计第23页
     ·反转录第23页
     ·确定提取RNA 纯度第23-24页
     ·PCR 扩增第24页
     ·扩增片段的分离和克隆第24页
     ·克隆产物的鉴定第24-25页
     ·序列分析第25页
   ·结果第25-28页
     ·鹿茸顶端组织提取RNA 的完整性第25页
     ·提取RNA 纯度的检测第25-26页
     ·Ta 对GHR 引物扩增效率的影响第26页
     ·MgCl_2 浓度对GHR 引物扩增效率的影响第26页
     ·重组质粒的PCR 初步鉴定第26-27页
     ·重组质粒的酶切鉴定第27页
     ·克隆所得序列、Genbank 登陆号及同源性比对分析第27-28页
   ·讨论第28-30页
第三章 GHR、IGF-1、IGF-1R 基因在鹿茸顶端的组织定位第30-39页
   ·材料与方法第30-35页
     ·试验材料第30页
     ·DNA 的提取第30-31页
     ·GHR、IGF-1、IGF-1R 基因探针的制备第31-33页
     ·估计探针产量第33-34页
     ·冰冻切片的制备第34页
     ·原位杂交第34-35页
   ·结果第35-37页
     ·GHR、IGF-1、IGF-1R 基因PCR 产物回收后的电泳检测图第35-36页
     ·GHR、IGF-1、IGF-1R 基因回收后的浓度测定第36页
     ·估计探针产量第36-37页
     ·原位杂交第37页
   ·讨论第37-39页
第四章 半定量RT-PCR 法检测鹿茸顶端GHR、IGF-1 基因的表达水平第39-45页
   ·材料与方法第39-40页
     ·试验材料第39页
     ·总RNA 的提取第39页
     ·反转录(参照2.1.4)第39页
     ·PCR 扩增第39-40页
     ·GHR 和IGF-1 基因的半定量检测第40页
     ·数据分析第40页
   ·结果第40-44页
     ·鹿茸各部位所提的RNA第40-41页
     ·确定反应的循环次数第41-42页
     ·各部位GHR、IGF-1 和β-actin 基因的扩增条带第42页
     ·GHR、IGF-1 基因在鹿茸顶端各层mRNA 表达丰度的检测第42-44页
   ·讨论第44-45页
结论第45-46页
参考文献第46-53页
附录第53-61页
致谢第61-62页
作者简介第62页

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