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猪OLR1基因克隆、序列分析及脂肪酸对其转录表达的影响

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-13页
第一部分 文献综述第13-29页
 第一章 OLR1 基因的研究概况第13-20页
   ·OLR1 基因结构第13-14页
   ·OLR1 蛋白结构第14-15页
   ·OLR1 表达调控第15-16页
     ·OLR1 组织表达差异及其调控因子第15-16页
     ·OLR1 配体类型第16页
   ·OLR1 在脂代谢中的作用机理第16-17页
   ·OLR1 在心血管疾病发病机理上的重要性第17-19页
     ·OLR1 与动脉粥样硬化第18页
     ·OLR1 与类风湿性关节炎和骨关节炎第18页
     ·OLR1 与局部缺血-再灌注和心肌梗塞第18-19页
   ·OLR1 对牛奶乳脂性状的影响第19-20页
 第二章 脂代谢与脂肪细胞分化相关基因的研究概况第20-26页
   ·过氧化物酶体增殖物激活受体第20-21页
     ·PPARγ的结构及组织分布第20页
     ·PPARγ的配体第20-21页
     ·PPARγ功能第21页
   ·CCAAT 增强子结合蛋白第21-22页
     ·C/EBPs 的结构及组织分布第21-22页
     ·C/EBPs 与脂肪细胞分化第22页
   ·脂肪酸合成酶第22-23页
     ·脂肪酸合成酶的基因结构第23页
     ·脂肪酸合成酶的调节基因第23页
   ·固醇调节元件结合蛋白第23-24页
     ·SREBPs 家族基因结构及其分布第23-24页
     ·SREBP-1c 在转录水平的调控第24页
   ·甘油三酯水解酶第24-26页
     ·TGH 的结构特征及组织表达第24-25页
     ·TGH 在脂肪组织中的作用第25-26页
 第三章 密码子偏好性分析研究进展第26-29页
   ·哺乳动物密码子偏好性常用衡量方法第27页
     ·相对同义密码子使用度第27页
     ·GC 含量及 GC3S第27页
     ·密码子有效数第27页
     ·对应分析第27页
   ·密码子偏性相关的生物学领域第27-28页
     ·基因异源表达第27-28页
     ·与某些物种的蛋白表达水平相关第28页
   ·揭示有关物种间或某一物种的基因家族间的基因进化规律第28页
   ·基因的翻译调控第28页
   ·其他应用第28-29页
第二部分 试验研究第29-64页
 前言第29-30页
 第四章 猪脂肪组织OLR1 基因的克隆及序列分析第30-37页
   ·材料与方法第30-32页
     ·材料第30页
     ·引物设计第30-31页
     ·RNA 提取第31页
     ·反转录第31页
     ·OLR1 的克隆第31-32页
     ·猪脂肪组织OLR1 同源性比对及蛋白结构分析第32页
   ·结果与分析第32-36页
     ·猪脂肪组织总RNA 提取第32-33页
     ·Ta 对OLR1 引物扩增效率的影响第33页
     ·Mg2+浓度对 OLR1 基因引物扩增效率的影响第33页
     ·重组质粒的PCR 初步鉴定第33-34页
     ·猪脂肪组织OLR1 基因序列分析第34-36页
   ·讨论第36-37页
 第五章 哺乳类动物C 型凝集素家族基因密码子偏好性分析第37-44页
   ·材料第37-38页
   ·方法第38页
     ·软件使用第38页
     ·分析密码子使用频率采用的指标第38页
   ·结果与分析第38-42页
     ·哺乳类动物C 型凝集素家族基因密码子使用模式第38-40页
     ·基因异质性分析第40-42页
   ·讨论第42-44页
 第六章 猪OLR1 基因的差异表达及与脂代谢基因相关性研究第44-54页
   ·材料与方法第44-46页
     ·材料第44页
     ·研究方法第44页
     ·反转录第44页
     ·引物设计第44-45页
     ·PCR 扩增第45页
     ·各基因扩增循环次数的筛选第45页
     ·OLR1 基因组织表达丰度检测第45-46页
     ·不同月龄和不同经济类型猪脂肪组织OLR1 表达量检测第46页
     ·OLR1 与脂代谢相关基因在不同经济类型猪脂肪组织表达丰度检测第46页
     ·数据统计分析第46页
   ·结果与分析第46-51页
     ·组织提取RNA 的完整性第46页
     ·OLR1 基因半定量RT-PCR 循环次数筛选第46-47页
     ·猪各组织OLR1 基因mRNA 表达丰度第47-48页
     ·OLR1 在不同月龄和不同经济类型猪脂肪组织中表达规律第48-50页
     ·OLR1 与脂代谢有关基因在猪脂肪组织中表达相关性研究第50-51页
   ·讨论第51-54页
 第七章 短链和长链脂肪酸对前体脂肪细胞分化中OLR1 基因转录表达的影响第54-59页
   ·材料与方法第54-56页
     ·实验动物与试剂第54页
     ·前体脂肪细胞的原代培养第54-55页
     ·前体脂肪细胞处理第55页
     ·脂肪细胞的计数第55页
     ·RNA 提取及cDNA 第一条链合成第55页
     ·引物设计第55页
     ·PCR 扩增第55-56页
     ·统计分析第56页
   ·结果与分析第56-57页
     ·脂肪细胞分化过程中OLR1 基因转录表达水平及作用通路的研究第56-57页
     ·短链脂肪酸对OLR1 基因在细胞分化过程中表达水平的影响第57页
     ·长链脂肪酸对OLR1 基因在细胞分化过程中表达水平的影响第57页
   ·讨论第57-59页
 第八章 脂肪酸对小鼠前体脂肪细胞增殖分化及脂代谢基因转录表达的影响第59-64页
   ·材料和方法第59页
   ·结果与分析第59-62页
     ·脂肪酸对前体脂肪细胞增殖的影响第60页
     ·脂肪酸对前体脂肪细胞分化的影响第60-61页
     ·脂肪酸对FAS、SREBP-1c、TGH 在细胞分化过程中表达水平的影响第61-62页
     ·FAS、SREBP-1c 和TGH 在细胞分化过程中的作用通路研究第62页
   ·讨论第62-64页
结论第64页
进一步研究内容第64-65页
参考文献第65-74页
致谢第74-75页
作者简介第75页

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