中文摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
目录 | 第7-12页 |
英文缩略词表 | 第12-13页 |
第一章 小反刍兽疫研究进展 | 第13-22页 |
1. 历史和地理分布 | 第13-16页 |
·研究历史 | 第13页 |
·地理分布 | 第13-15页 |
·谱系分布 | 第15-16页 |
2. 流行病学 | 第16-17页 |
·传播方式 | 第16页 |
·感染宿主 | 第16-17页 |
3. 病原学 | 第17-18页 |
·形态及理化特性 | 第17页 |
·基因组及蛋白 | 第17-18页 |
4. 临床症状 | 第18页 |
5. 病理变化 | 第18-19页 |
6. 诊断技术 | 第19-20页 |
·E LISA 方法 | 第19页 |
·R T-PCR 方法 | 第19-20页 |
·病毒分离 | 第20页 |
7. 疫苗 | 第20-22页 |
·异源疫苗 | 第20页 |
·同源疫苗 | 第20-22页 |
第二章 小反刍兽疫间接ELISA 检测方法的优化 | 第22-52页 |
前言 | 第22-23页 |
第一节 pET-PPR-N 重组菌的鉴定及其表达条件的标化 | 第23-31页 |
1. 材料与仪器 | 第23-24页 |
·菌种 | 第23页 |
·酶类和试剂盒 | 第23页 |
·主要仪器 | 第23-24页 |
2. 方法 | 第24-27页 |
·重组菌酶切和PCR 鉴定 | 第24-25页 |
·重组菌诱导表达和条件优化 | 第25-26页 |
·表达蛋白的纯化 | 第26-27页 |
·蛋白含量测定与保存 | 第27页 |
3. 结果 | 第27-30页 |
·重组菌酶切和PCR 鉴定 | 第27-28页 |
·重组菌诱导表达和条件标化 | 第28-30页 |
4. 讨论 | 第30-31页 |
第二节 PPRV 间接ELISA 方法的改进与优化 | 第31-44页 |
1. 材料与仪器 | 第31页 |
·抗原 | 第31页 |
·阳性血清及其阴性血清 | 第31页 |
·主要免疫学试剂 | 第31页 |
·主要仪器 | 第31页 |
2. 方法 | 第31-34页 |
·重组N 蛋白抗原最适包被浓度和抗体最佳稀释度的确定 | 第31-32页 |
·重组N 蛋白抗原包被条件的确定 | 第32页 |
·封闭液的确定 | 第32页 |
·封闭时间的确定 | 第32-33页 |
·血清稀释液的确定 | 第33页 |
·血清反应时间的确定 | 第33页 |
·二抗作用时间的确定 | 第33页 |
·底物反应时间的确定 | 第33-34页 |
·重复试验 | 第34页 |
·交叉试验 | 第34页 |
3. 结果 | 第34-42页 |
·最佳抗原包被浓度的确定 | 第34-35页 |
·抗原包被条件的确定 | 第35-36页 |
·不同封闭液的比较 | 第36页 |
·不同封闭时间的比较 | 第36-37页 |
·不同血清稀释液的比较 | 第37-38页 |
·血清不同作用时间的比较 | 第38页 |
·二抗不同作用时间的比较 | 第38-39页 |
·底物不同反应时间的比较 | 第39-40页 |
·重复试验 | 第40-41页 |
·交叉试验 | 第41-42页 |
4. 讨论 | 第42-44页 |
·反应程序与试剂的标化 | 第42页 |
·影响因素 | 第42-44页 |
第三节 与竞争ELISA 试剂盒比较确定间接ELISA 的临界值 | 第44-52页 |
1. 材料与仪器 | 第44页 |
·血清 | 第44页 |
·试剂 | 第44页 |
·主要仪器 | 第44页 |
2. 方法 | 第44-46页 |
·用竞争ELISA 检测临床血清样品 | 第44-45页 |
·用间接ELISA 检测临床血清样品 | 第45-46页 |
·用TG-ROC 软件确定阴阳性血清的临界值 | 第46页 |
3. 结果 | 第46-49页 |
·血清样品的OD 值分布 | 第46-47页 |
·间接ELISA 阴阳性血清的测定 | 第47页 |
·间接ELISA 阴阳性血清临界值的确定 | 第47-48页 |
·与c-ELISA 的比较 | 第48-49页 |
4. 讨论与结论 | 第49-52页 |
·诊断的特异性和敏感性 | 第49-50页 |
·阴阳性血清临界值的确定 | 第50-51页 |
·两种ELISA 方法的比较 | 第51-52页 |
第三章 小反刍兽疫间接ELISA 方法的应用 | 第52-63页 |
前言 | 第52-53页 |
第一节 ELISA 方法在PPR 临床诊断中的应用 | 第53-58页 |
1. 材料与方法 | 第53页 |
·血清 | 第53页 |
·主要试剂及仪器 | 第53页 |
·试验步骤 | 第53页 |
2. 结果 | 第53-56页 |
·疫区划分 | 第53-55页 |
·免疫监测 | 第55-56页 |
3. 讨论 | 第56-58页 |
第二节 群体抗体水平差异区分PPRV 自然感染与疫苗免疫 | 第58-63页 |
1. 材料与仪器 | 第58页 |
2. 方法 | 第58-59页 |
·自然感染羊抗体水平 | 第58-59页 |
·疫苗免疫羊抗体水平 | 第59页 |
3. 结果 | 第59-62页 |
·自然感染羊群抗体水平 | 第59-60页 |
·疫苗免疫羊抗体水平 | 第60-61页 |
·阳性率的比较 | 第61-62页 |
4. 讨论 | 第62-63页 |
第四章 西藏阿里地区小反刍兽疫流行调查研究 | 第63-72页 |
前言 | 第63页 |
1. 材料与方法 | 第63-64页 |
·血清与组织 | 第63-64页 |
·抗体检测 | 第64页 |
·核酸检测 | 第64页 |
2. 结果 | 第64-66页 |
·临床症状 | 第64页 |
·抗体检测结果 | 第64-65页 |
·核酸检测结果 | 第65-66页 |
3. 讨论 | 第66-71页 |
·疫点空间分布 | 第67页 |
·疫情的扩散 | 第67-69页 |
·宿主特征 | 第69-70页 |
·疫情扩散的主要方式 | 第70-71页 |
4. 小结 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第79页 |