荧光定量PCR检测仔猪断奶前后水通道蛋白基因mRNA表达差异
| 致谢 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-19页 |
| ·水通道蛋白 | 第9-15页 |
| ·水通道蛋白的发现与分类 | 第9-10页 |
| ·水通道蛋白的结构与机理 | 第10-13页 |
| ·水通道蛋白的调控 | 第13-15页 |
| ·pH 值与水通道蛋白的调控 | 第13-14页 |
| ·渗透压与水通道蛋白的调控 | 第14页 |
| ·水通道蛋白的调节与激素 | 第14-15页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第15-19页 |
| ·技术原理 | 第15-16页 |
| ·荧光探针和荧光染料 | 第16-18页 |
| ·SYBR Green I | 第16-17页 |
| ·分子信标 | 第17-18页 |
| ·TaqMan 探针 | 第18页 |
| ·LUX Primers | 第18页 |
| ·实时荧光定量PCR 技术的应用 | 第18-19页 |
| 2 引言 | 第19-20页 |
| 3 材料与方法 | 第20-26页 |
| ·材料 | 第20页 |
| ·组织来源 | 第20页 |
| ·仪器与试剂 | 第20页 |
| ·方法 | 第20-26页 |
| ·引物设计与合成 | 第20-22页 |
| ·目的基因克隆引物的设计与合成 | 第20页 |
| ·内参基因引物的设计与合成 | 第20-22页 |
| ·目的基因定量引物的设计与合成 | 第22页 |
| ·AQPs 基因克隆 | 第22-24页 |
| ·总RNA 提取和逆转录反应 | 第22-23页 |
| ·RT-PCR 扩增和序列测定 | 第23页 |
| ·序列提交和分析 | 第23-24页 |
| ·SYBR 荧光实时定量PCR | 第24-25页 |
| ·总RNA 提取和逆转录反应 | 第24页 |
| ·实时定量内参选择 | 第24-25页 |
| ·SYBR 荧光实时定量PCR | 第25-26页 |
| ·荧光实时定量PCR 数据分析 | 第26页 |
| 4 结果与分析 | 第26-33页 |
| ·AQPs 基因克隆与序列分析 | 第26-29页 |
| ·RT-PCR 扩增及克隆结果 | 第26-27页 |
| ·AQPs 基因的序列分析 | 第27-29页 |
| ·SYBR 荧光实时定量PCR | 第29-33页 |
| ·总RNA 和回收DNA 的浓度和纯度 | 第29页 |
| ·看家基因荧光定量PCR 的特异性 | 第29-30页 |
| ·看家基因组织表达稳定度 | 第30-31页 |
| ·看家基因之间的相对表达量 | 第31-32页 |
| ·断奶前后水通道基因的相对表达量 | 第32-33页 |
| 5 讨论与结论 | 第33-38页 |
| ·讨论 | 第33-37页 |
| ·猪AQPs 家族基因的克隆与序列分析 | 第33-34页 |
| ·荧光定量内参基因的选择 | 第34-35页 |
| ·断乳仔猪腹泻与水通道基因的表达 | 第35-37页 |
| ·pH 值与水通道蛋白的调控 | 第35页 |
| ·渗透压与水通道蛋白的调控 | 第35-36页 |
| ·水通道蛋白的调节与激素 | 第36-37页 |
| ·结论 | 第37-38页 |
| ·猪AQPs 家族基因的克隆与序列分析 | 第37页 |
| ·荧光定量的内参基因选择 | 第37页 |
| ·断奶仔猪腹泻与水通道基因的表达 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-45页 |
| 英文摘要 | 第45-47页 |
| 附件 | 第47-63页 |
