摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
1 绪论 | 第12-19页 |
·脓毒症 | 第12-13页 |
·蛋白质的磷酸化修饰 | 第13-15页 |
·磷酸化修饰的特点 | 第13页 |
·磷酸化修饰的研究现状 | 第13-15页 |
·蛋白质组学新技术 | 第15-17页 |
·荧光差异凝胶电泳 | 第15页 |
·多维LC-MSMS技术 | 第15页 |
·稳定同位素标记 | 第15-16页 |
·生物芯片(Biochips) | 第16页 |
·表面等离子体共振—生物分子相互作用 | 第16-17页 |
·技术路线 | 第17-19页 |
2 内毒素休克小鼠肝脏细胞质的分离 | 第19-23页 |
·材料 | 第19-20页 |
·配制试剂 | 第19页 |
·主要试剂和试剂盒 | 第19页 |
·实验动物 | 第19页 |
·主要仪器 | 第19-20页 |
·方法 | 第20-21页 |
·BALB/c小鼠内毒素休克模型的制备 | 第20页 |
·肝脏组织细胞质的提取 | 第20页 |
·肝脏组织细胞质的蛋白质定量 | 第20-21页 |
·结果 | 第21页 |
·蛋白质定量结果 | 第21页 |
·本章小结 | 第21-23页 |
3 肝脏细胞质磷酸化蛋白的DIGE分离 | 第23-37页 |
·材料 | 第23-25页 |
·主要试剂 | 第23页 |
·主要仪器 | 第23-24页 |
·主要配置的试剂 | 第24-25页 |
·方法 | 第25-29页 |
·细胞质磷酸化蛋白质的富集 | 第25页 |
·细胞质磷酸化蛋白的浓缩(丙酮沉淀) | 第25-26页 |
·细胞质磷酸化蛋白的除盐 | 第26页 |
·细胞质磷酸化蛋白的WestBlot检测 | 第26页 |
·细胞质磷酸化蛋白的差异点分析-DIGE | 第26-29页 |
·结果 | 第29-34页 |
·细胞质磷酸化蛋白的WestBlot检测 | 第29-30页 |
·双向凝胶电泳分离荧光标记蛋白的结果 | 第30页 |
·荧光差异双向凝胶电泳蛋白图谱 | 第30-32页 |
·制备胶图像 | 第32页 |
·DeCyder软件分析差异性蛋白质点 | 第32-34页 |
·本章小结 | 第34-37页 |
4 内毒素休克小鼠肝脏细胞质差异蛋白的鉴定和生物信息学分析 | 第37-52页 |
·材料 | 第37-38页 |
·主要试剂和耗材 | 第37页 |
·主要仪器 | 第37页 |
·主要配制的试剂 | 第37-38页 |
·主要数据库和生物信息学网站 | 第38页 |
·方法 | 第38-40页 |
·DIGE分离蛋白样品质谱鉴定前的处理 | 第38-39页 |
·质谱鉴定 | 第39页 |
·生物信息学分析 | 第39-40页 |
·结果 | 第40-49页 |
·蛋白质的质谱鉴定 | 第40-42页 |
·蛋白质的亚细胞定位分析 | 第42-43页 |
·差异蛋白功能分析 | 第43页 |
·差异蛋白形成复合物分析 | 第43-49页 |
·讨论 | 第49-52页 |
结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-56页 |
附录 | 第56-58页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-60页 |