内容提要 | 第1-5页 |
符号、缩略语词表 | 第5-9页 |
第1章 绪论 | 第9-33页 |
·脱氧羟腐胺赖氨酸合酶(DHS)与真核翻译起始因子(eIF-5A)的关系 | 第9-23页 |
·eIF-5A的结构与保守性特征 | 第10-11页 |
·不同同工型的eIF-5A | 第11-12页 |
·eIF-5A的功能 | 第12-17页 |
·DHS对eIF-5A的作用机制 | 第17-19页 |
·DHS的结构特征 | 第19-21页 |
·GC7对 DHS的抑制 | 第21页 |
·抑制DHS表达对植物的影响 | 第21-23页 |
·反义技术 | 第23-31页 |
·反义技术的分类 | 第23-26页 |
·反义技术在植物中的应用 | 第26-31页 |
·研究目的和意义 | 第31-33页 |
第2章 番茄DHS基因克隆 | 第33-59页 |
·前言 | 第33-36页 |
·RT-PCR 反应原理 | 第33-35页 |
·基因克隆技术原理 | 第35-36页 |
·材料与方法 | 第36-46页 |
·实验材料 | 第36-39页 |
·实验方法 | 第39-46页 |
·结果与分析 | 第46-52页 |
·番茄总RNA提取 | 第46-47页 |
·总RNA纯度测定结果 | 第47页 |
·RT-PCR结果分析 | 第47-48页 |
·大肠杆菌蓝白斑筛选结果 | 第48-49页 |
·阳性克隆PCR鉴定结果 | 第49页 |
·RT-PCR扩增片段测序结果 | 第49-52页 |
·讨论 | 第52-57页 |
·番茄总RNA提取 | 第52-53页 |
·RT-PCR引物设计与反应条件 | 第53-54页 |
·克隆载体的选择 | 第54-55页 |
·RT-PCR产物与克隆载体的连接 | 第55页 |
·大肠杆菌感受态细胞制备 | 第55-56页 |
·重组子的蓝白斑筛选 | 第56页 |
·RT-PCR扩增片段的测序 | 第56-57页 |
·小结 | 第57-59页 |
第3章 番茄DHS基因的反义表达载体的构建 | 第59-73页 |
·前言 | 第59-60页 |
·材料与方法 | 第60-64页 |
·实验材料 | 第60-61页 |
·实验方法 | 第61-64页 |
·结果与分析 | 第64-68页 |
·pMD19-DHS重组质粒的酶切 | 第64-65页 |
·pCAMBIA1302质粒的酶切 | 第65-66页 |
·反义表达载体的鉴定 | 第66-68页 |
·讨论 | 第68-71页 |
·质粒DNA的提取 | 第68-69页 |
·限制性内切酶的酶切 | 第69-70页 |
·pCAMBIA1302载体 | 第70-71页 |
·小结 | 第71-73页 |
第4章 农杆菌介导的番茄pCAMBIA-antiDHS遗传转化 | 第73-85页 |
·前言 | 第73-75页 |
·材料与方法 | 第75-80页 |
·实验材料 | 第75-77页 |
·实验方法 | 第77-80页 |
·结果与分析 | 第80-82页 |
·阳性LBA4404的PCR鉴定 | 第80页 |
·潮霉素选择压浓度的选择 | 第80-81页 |
·分化培养基中细胞分裂素(6-BA)和生长素(IAA)浓度的 选择 | 第81页 |
·不同外植体的发芽率 | 第81-82页 |
·讨论 | 第82-83页 |
·生长素和细胞分裂素在植物器官分化中的作用 | 第82-83页 |
·小结 | 第83-85页 |
第5章 转基因番茄的实时荧光定量 PCR遗传转化鉴定及叶绿素含量测定 | 第85-97页 |
·前言 | 第85-87页 |
·材料与方法 | 第87-90页 |
·试剂与仪器 | 第87-88页 |
·实验方法 | 第88-90页 |
·结果与分析 | 第90-92页 |
·利用实时荧光定量 PCR对 DHS和eIF-5A基因表达水平的分析 | 第90-91页 |
·叶绿素含量测定 | 第91-92页 |
·抑制DHS基因表达产生的生长停滞型番茄 | 第92页 |
·讨论 | 第92-94页 |
·实时荧光定量 PCR是鉴定基因表达水平的有效方法 | 第92页 |
·实时荧光定量PCR引物的设计要求 | 第92-93页 |
·实时荧光定量PCR反应中内参的选择 | 第93页 |
·抑制DHS基因表达对番茄的影响 | 第93-94页 |
·小结 | 第94-97页 |
第6章 总结与展望 | 第97-99页 |
·总结 | 第97页 |
·展望 | 第97-99页 |
参考文献 | 第99-113页 |
博士期间发表文章及参与科研课题 | 第113-115页 |
致谢 | 第115-116页 |
中文摘要 | 第116-118页 |
Abstract | 第118-119页 |