| 缩略词表 | 第1-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 前言 | 第12-17页 |
| 第一章 可诱导EGFR 和Luciferase 真核表达载体的构建 | 第17-31页 |
| 1、材料与方法 | 第17-25页 |
| ·药品与试剂 | 第17页 |
| ·仪器 | 第17页 |
| ·载体pSP-rtTA 的构建 | 第17-19页 |
| ·载体pTRE-EL-1 的构建 | 第19-24页 |
| ·载体pTRE-EL-2 和载体pTRE-EL-3 的构建 | 第24-25页 |
| 2、结果 | 第25-30页 |
| ·克隆肺组织特异性表达启动子SP-A 启动子 | 第25页 |
| ·载体pSP-rtTA 的构建 | 第25-26页 |
| ·通过RT-PCR 法获得人EGFR 基因cDNA | 第26页 |
| ·载体pTRE-EL 的构建 | 第26页 |
| ·载体pTRE-EL-1 的构建 | 第26页 |
| ·载体pTRE-EL-2 和pTRE-EL-3 的构建 | 第26-30页 |
| 3、小结 | 第30-31页 |
| 第二章 Tet-On 系统诱导EGFR 和Luciferase 在NCI-H446 细胞中表达 | 第31-44页 |
| 1、材料与方法 | 第31-37页 |
| ·试剂 | 第31页 |
| ·仪器 | 第31页 |
| ·控制细胞系U2-OS-Luc 的Dox 诱导剂量效应曲线 | 第31-32页 |
| ·SP-rtTA 稳定转染细胞株的建立 | 第32-34页 |
| ·H446-rtTA-EL-1 稳定双转染细胞株的建立 | 第34-37页 |
| 2、结果 | 第37-41页 |
| ·控制细胞系U2-OS-Luc 的Dox 诱导剂量效应曲线 | 第37页 |
| ·G418 筛选浓度的确定 | 第37页 |
| ·H446-SP-rtTA 细胞株的G418 筛选和诱导表达鉴定 | 第37-38页 |
| ·RT-PCR 法鉴定H446-SP-rtTA 细胞株rtTA 的表达 | 第38页 |
| ·潮霉素B 筛选浓度的确定 | 第38页 |
| ·H446- rtTA-EL-1 细胞株的潮霉素B 筛选和诱导表达鉴定 | 第38页 |
| ·PCR 法鉴定H446- rtTA-EL-1 细胞株基因型 | 第38页 |
| ·Dox 诱导稳定双转染H446- rtTA-EL-1 细胞表达EGFR 和Luciferase | 第38-41页 |
| 3、小结 | 第41-44页 |
| 第三章 转基因小鼠的构建 | 第44-51页 |
| 1、材料与方法 | 第44-47页 |
| ·试剂与材料 | 第44页 |
| ·仪器 | 第44页 |
| ·注射用DNA 片段的制备 | 第44-45页 |
| ·转基因小鼠的获得 | 第45-47页 |
| 2、结果 | 第47-50页 |
| ·SP-rtTA 注射片段的制备 | 第47页 |
| ·TRE-EL-1 注射片段的制备 | 第47页 |
| ·SP-rtTA 转基因小鼠的构建 | 第47页 |
| ·TRE-EL-1 转基因小鼠的构建 | 第47页 |
| ·SP-rtTA 小鼠rtTA 基因表达的组织特异性 | 第47-48页 |
| ·转基因小鼠的传代和杂交 | 第48-50页 |
| 3、小结 | 第50-51页 |
| 讨论 | 第51-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 文献综述 | 第58-63页 |
| EGFR TK 域基因突变与非小细胞肺癌的靶向治疗 | 第58-63页 |
| 发表论文 | 第63-64页 |
| 个人简历 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
