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大麦醇溶蛋白RNAi植物表达载体的构建及幼胚高效再生体系的建立

摘要第1-3页
Summary第3-4页
缩略语第4-7页
第一部分 文献综述第7-16页
 引言第7页
 1 醇溶蛋白的研究进展第7-8页
 2 蛋白质含量与啤酒质量的关系第8页
 3 RNAI研究进展第8-13页
   ·RNAI的发现第8-9页
   ·RNA干扰的研究简史第9页
   ·RNA干扰在植物中的应用第9-12页
     ·植物基因功能分析第9-10页
     ·植物抗病性方面的应用第10页
     ·植物抗逆性方面的应用第10页
     ·改良植物营养价值方面的应用第10-11页
     ·雄性不育系及育性恢复中的应用第11页
     ·RNAI在作物育种中的应用第11-12页
   ·展望第12-13页
 4 大麦遗传转化的研究进展第13-14页
   ·受体材料对大麦再生的影响第13页
   ·基因型对大麦再生的影响第13页
   ·培养条件对大麦再生的影响第13-14页
 5 本研究的目的意义第14-16页
第二部分 实验报告第16-39页
 第一章 醇溶蛋白保守序列GP4的克隆第16-25页
  1 材料与方法第16-23页
   ·材料第16页
     ·大麦材料和菌种第16页
     ·分子生物学及生化试剂第16页
     ·培养基第16页
   ·方法第16-23页
     ·大麦试管苗总DNA的提取第16-17页
     ·目标基因片段的克隆第17-18页
     ·琼脂糖凝胶电泳第18-20页
     ·DNA凝胶回收第20-21页
     ·克隆片段与PGEM-T EASY VECTOR连接第21页
     ·重组质粒转化大肠杆菌第21-22页
     ·GP4质粒DNA提取第22-23页
  2 结果分析第23-25页
   ·干涉片段的设计第23页
   ·片段GP4的扩增第23-24页
   ·GP4序列测定第24-25页
 第二章 RNAI载体构建第25-32页
  1 材料与方法第25-27页
   ·材料第25-26页
     ·植株材料和菌株第25页
     ·酶及生化试剂第25页
     ·培养基第25-26页
   ·方法第26-27页
     ·干扰引物的设计第26页
     ·GP4-L和GP4-R的扩增第26页
     ·目的基因片段与亚克隆载体及表达载体的酶切连接转化第26-27页
  2 结果分析第27-30页
   ·总DNA的提取第27页
   ·醇溶蛋白基因保守区片段的克隆第27页
   ·表达载体的构建第27-29页
   ·重组质粒的鉴定第29-30页
   ·测序验证第30页
  3 讨论第30-32页
 第三章 大麦再生体系的建立第32-37页
  1 材料和方法第32-33页
   ·材料第32页
   ·培养基第32-33页
   ·大麦愈伤组织的诱导、继代培养及植株再生第33页
   ·统计方法第33页
  2 结果与分析第33-35页
   ·激素对幼胚愈伤组织诱导的影响第33-34页
   ·大麦基因型对幼胚愈伤组织分化及再生植株的影响第34-35页
  3 讨论第35-36页
  4 结论第36-37页
 第四章 讨论与结论第37-39页
  1 讨论第37-38页
   ·降低啤酒大麦醇溶蛋白含量的策略第37页
   ·关于RNAI的讨论第37-38页
  2 结论第38-39页
参考文献第39-45页
致谢第45-46页
个人简介第46-47页
导师简介第47-49页

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