| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 前言 | 第12-25页 |
| 一、粘帚霉的种类 | 第12-13页 |
| 二、粘帚酶对植物病害的防治及其机制 | 第13-16页 |
| (一) 粘帚酶对植物病害的防治 | 第13-14页 |
| (二) 粘帚酶的防病机制 | 第14-16页 |
| 1. 抗生作用 | 第14页 |
| 2. 竞争作用 | 第14页 |
| 3. 重寄生作用 | 第14-15页 |
| 4. 溶菌作用 | 第15-16页 |
| 三、β-1,3-葡聚糖酶 | 第16-23页 |
| (一) 葡聚糖酶的种类 | 第16页 |
| (二) β-1,3-葡聚糖酶的来源 | 第16-17页 |
| 1. 微生物β-1,3-葡聚糖酶 | 第16-17页 |
| 2. 植物产生的β-1,3-葡聚糖酶 | 第17页 |
| 3. 动物产生的β-1,3-葡聚糖酶 | 第17页 |
| (三) β-1,3-葡聚糖酶的可诱导性 | 第17页 |
| (四) β-1,3-葡聚糖酶的活性测定 | 第17-18页 |
| (五) β-1,3-葡聚糖酶的分离纯化 | 第18-19页 |
| (六) β-1,3-葡聚糖酶的酶学性质 | 第19-20页 |
| (七) 提高酶稳定性的研究 | 第20页 |
| (八) β-1,3-葡聚糖酶的应用 | 第20-23页 |
| 1. 在真菌病害防治中的应用 | 第20-22页 |
| 2. 在医学中的应用 | 第22-23页 |
| 3. 在饲料工业中的应用 | 第23页 |
| 四、本研究的目的与意义 | 第23-25页 |
| 材料与方法 | 第25-33页 |
| 一、供试菌株 | 第25页 |
| 二、培养基 | 第25页 |
| 三、溶液和缓冲液配制 | 第25页 |
| 四、主要试剂和仪器 | 第25-27页 |
| (一) 主要试剂 | 第25-26页 |
| (二) 主要仪器 | 第26-27页 |
| 五、GR菌株种类鉴定方法 | 第27-28页 |
| (一) 形态学鉴定 | 第27页 |
| 1. 菌落特征的观察 | 第27页 |
| 2. 产孢结构以及分生孢子形态的观察 | 第27页 |
| (二) 分子生物学方法鉴定 | 第27-28页 |
| 1. CTAB法提取真菌总基因组DNA | 第27-28页 |
| 2. ITS扩增及测序 | 第28页 |
| 六、β-1,3-葡聚糖酶活性测定方法 | 第28-29页 |
| (一) 透明圈法测定 | 第28页 |
| (二) 二硝基水杨酸法测定 | 第28-29页 |
| 1. 菌株培养和粗酶液提取 | 第28页 |
| 2. 标准曲线制定 | 第28-29页 |
| 3. 酶活性测定 | 第29页 |
| 七、β-1,3-葡聚糖酶对病菌的抑制作用的测定 | 第29-30页 |
| (一) β-1,3-葡聚糖酶对病菌生长的抑制作用 | 第29-30页 |
| (二) β-1,3-葡聚糖酶对病菌菌丝的破坏作用 | 第30页 |
| 八、高产β-1,3-葡聚糖酶的菌株诱变 | 第30页 |
| (一) 紫外线诱变剂量的确定 | 第30页 |
| (二) 突变株筛选方法 | 第30页 |
| 九、β-1,3-葡聚糖酶的分离纯化 | 第30-31页 |
| (一) 丙酮沉淀酶蛋白 | 第30页 |
| (二) 柱层析纯化酶蛋白 | 第30-31页 |
| 1. DE52离子交换层析 | 第30-31页 |
| 2. SephadexG-75凝胶过滤层析 | 第31页 |
| 十、酶学性质检测 | 第31-32页 |
| (一) 酶分子量测定 | 第31页 |
| (二) 热稳定性与酶反应最适温度 | 第31页 |
| (三) 酸碱稳定性与酶反应最适pH | 第31-32页 |
| (四) 金属离子对酶活性的影响 | 第32页 |
| 十一、GR-6产β-1,3-葡聚糖酶培养条件的优化 | 第32-33页 |
| 结果与分析 | 第33-48页 |
| 一、GR菌株的种类鉴定 | 第33-36页 |
| (一) 菌落特征 | 第33页 |
| (二) 菌株形态 | 第33-34页 |
| (三) ITS序列 | 第34-36页 |
| 二、GR菌株β-1,3-葡聚糖酶活性及其对病菌的抑制 | 第36-38页 |
| (一) 酶活性 | 第36页 |
| (二) 对病菌的抑制作用 | 第36-38页 |
| 1. 对病菌细胞形态的破坏作用 | 第36-37页 |
| 2. 对病菌菌丝生长的抑制作用 | 第37-38页 |
| 三、高产β-1,3-葡聚糖酶菌株的诱变筛选 | 第38-41页 |
| (一) 紫外线诱变剂量 | 第38页 |
| (二) GR-6菌株的酶活性及其产酶能力的稳定性 | 第38-39页 |
| 1. 突变菌株筛选 | 第38页 |
| 2. GR-6菌株酶活性及其产酶能力的稳定性 | 第38-39页 |
| (三) GR与GR-6的生物学特性比较 | 第39-41页 |
| 1. 对不同温度的适应性 | 第39-40页 |
| 2. 对不同pH的适应性 | 第40页 |
| 3. 对不同光照的适应性 | 第40-41页 |
| 四、β-1,3-葡聚糖酶的分离纯化 | 第41-43页 |
| (一) 酶蛋白粗提 | 第41页 |
| (二) DE52离子交换层析 | 第41-42页 |
| (三) SephadexG-75凝胶过滤层析 | 第42-43页 |
| 五、β-1,3-葡聚糖酶的酶学性质 | 第43-46页 |
| (一) 酶分子量 | 第43-44页 |
| (二) 最适反应温度 | 第44页 |
| (三) 热稳定性 | 第44-45页 |
| (四) 最适反应pH | 第45页 |
| (五) 酸碱稳定性 | 第45-46页 |
| (六) 对金属离子的敏感性 | 第46页 |
| 六、GR-6产β-1,3-葡聚糖酶培养条件优化 | 第46-48页 |
| 讨论 | 第48-51页 |
| 一、GR菌株对病菌的抑制作用 | 第48页 |
| 二、生防真菌β-1,3-葡聚糖酶活性及其防病效果 | 第48-49页 |
| 三、β-1,3-葡聚糖酶的分离纯化与酶学特性 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 附表 | 第61-64页 |