| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 引言 | 第14-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-50页 |
| ·杆状病毒及其表达系统研究进展 | 第16-20页 |
| ·杆状病毒的生物学特性 | 第16-17页 |
| ·杆状病毒表达系统建立及用于蛋白质表达的优点 | 第17-18页 |
| ·昆虫杆状病毒表达系统的应用 | 第18-20页 |
| ·家蚕杆状病毒及其表达系统研究进展 | 第20-28页 |
| ·传统家蚕重组杆状病毒表达系统的构建 | 第21-22页 |
| ·家蚕Bac-to-Bac 杆状病毒表达系统的构建 | 第22-25页 |
| ·家蚕杆状病毒表达系统的优点 | 第25-26页 |
| ·家蚕杆状病毒表达系统存在的缺陷 | 第26-27页 |
| ·家蚕杆状病毒表达系统的表达水平及其影响因素 | 第27-28页 |
| ·幽门螺杆菌疫苗研究进展 | 第28-32页 |
| ·幽门螺杆菌疫苗的主要制备技术途径 | 第28-31页 |
| ·幽门螺杆菌疫苗的国内外临床研究进展 | 第31-32页 |
| ·幽门螺杆菌的黏膜免疫与免疫保护机制 | 第32-36页 |
| ·黏膜的结构特点与黏膜免疫的关系 | 第32-34页 |
| ·幽门螺杆菌的免疫保护机制 | 第34-36页 |
| 参考文献 | 第36-50页 |
| 第二章 实验方案设计 | 第50-53页 |
| ·实验目的与意义 | 第50-51页 |
| ·研究内容 | 第51-52页 |
| ·egfp、hspA 和ureB 基因在蚕蛹中的表达及表达产物鉴定 | 第51页 |
| ·蚕蛹表达的HspA 和UreB 的免疫原性及抗幽门螺杆菌感染的免疫保护和免疫治疗效果评估 | 第51-52页 |
| ·研究的技术路线及总体实验方案 | 第52-53页 |
| 第三章 家蚕Bac-to-Bac 系统表达幽门螺杆菌HspA 和UreB | 第53-105页 |
| ·引言 | 第53-55页 |
| ·实验材料和试剂 | 第55-59页 |
| ·方法 | 第59-79页 |
| ·目的基因的克隆 | 第59-63页 |
| ·供体质粒pFastDual-(EGFP)（HspA）的构建 | 第63-65页 |
| ·供体质粒pFastDual-UreB 的构建 | 第65-67页 |
| ·重组Bacmid-（EGFP）（HspA）和Bacmid-UreB 的产生 | 第67-70页 |
| ·重组BmNPV-（EGFP）（HspA）和BmNPV-UreB 的产生 | 第70-71页 |
| ·病毒滴度测定 | 第71页 |
| ·EGFP 和HspA 及UreB 在BmN 细胞和蚕蛹中的表达 | 第71-72页 |
| ·重组HspA 的纯化、定量及不同时间表达HspA 含量的测定 | 第72-76页 |
| ·重组蛋白HspA 和UreB 的SDS-PAGE、Western blot 分析 | 第76-79页 |
| ·结果与分析 | 第79-94页 |
| ·egfp、人幽门螺杆菌Hsp A 和UreB 基因的克隆与鉴定 | 第79-85页 |
| ·供体质粒pFastDual-(EGFP)(HspA)和pFastDual-UreB 的构建和鉴定 | 第85-87页 |
| ·重组Bacmid-（EGFP）（HspA）和Bacmid-UreB 的产生及鉴定 | 第87-88页 |
| ·重组BmNPV-(EGFP)(HspA)和BmNPV-UreB 的产生 | 第88-89页 |
| ·病毒滴度的测定 | 第89-90页 |
| ·重组蛋白在蚕蛹中表达的症状 | 第90-91页 |
| ·蚕蛹表达HspA 的纯化 | 第91页 |
| ·用EGFP 预测HspA 在蚕蛹中的表达过程 | 第91-93页 |
| ·重组HspA 蛋白在蚕蛹中表达产物的SDS-PAGE 和Western blot 分析 | 第93页 |
| ·重组UreB 在BmN 细胞和蚕蛹中表达产物的SDS-PAGE 和Western blot 分析 | 第93-94页 |
| ·讨论 | 第94-97页 |
| ·利用蚕蛹可以进行幽门螺杆菌亚单位口服疫苗的生产 | 第94-96页 |
| ·EGFP 和靶蛋白非融合共表达可预测靶蛋白表达 | 第96-97页 |
| ·蚕蛹表达的重组HspA 抗原蛋白的纯化策略 | 第97页 |
| 参考文献 | 第97-105页 |
| 第四章 口服蚕蛹表达的幽门螺杆菌HspA 和UreB 对幽门螺杆菌感染免疫保护和免疫治疗效能的评价 | 第105-131页 |
| ·引言 | 第105-108页 |
| ·材料与试剂 | 第108-111页 |
| ·实验动物 | 第108页 |
| ·菌株、培养基、试剂 | 第108-110页 |
| ·免疫原材料准备 | 第110-111页 |
| ·方法 | 第111-116页 |
| ·表达产物免疫原性鉴定的动物分组及动物的免疫 | 第111页 |
| ·血样本的采集 | 第111页 |
| ·ELISA 分析血清中抗体滴度 | 第111-112页 |
| ·表达产物的免疫保护和免疫治疗评估的动物分组 | 第112页 |
| ·幽门螺杆菌培养和细菌悬液制备 | 第112页 |
| ·实验动物的幽门螺杆菌攻毒接种 | 第112页 |
| ·实验动物的处理 | 第112页 |
| ·实验动物标本的处理 | 第112-113页 |
| ·小鼠感染幽门螺杆菌胃黏膜尿素酶试纸快速检测 | 第113页 |
| ·小鼠感染幽门螺杆菌活体胃PCR 检测 | 第113-114页 |
| ·小鼠感染幽门螺杆菌用培养方法检测 | 第114页 |
| ·小鼠胃组织的固定和包埋 | 第114-115页 |
| ·小鼠胃组织切片的 Giemsa 染色 | 第115页 |
| ·小鼠胃组织切片的HE 染色 | 第115页 |
| ·幽门螺杆菌的定植和胃黏膜炎症的评分 | 第115-116页 |
| ·结果与分析 | 第116-122页 |
| ·含重组UreB 的蚕蛹粉和CTB 混合物口服免疫的小鼠血清中特异性抗体的变化 | 第116页 |
| ·含重组HspA 的蚕蛹粉和CTB 混合物口服免疫的小鼠血清中特异性抗体的变化 | 第116-117页 |
| ·对幽门螺杆菌感染建模的小鼠活体胃黏膜用尿素酶活性的快速测试 | 第117-118页 |
| ·免疫保护和未免疫保护小鼠胃幽门螺杆菌定植情况的PCR 检测 | 第118页 |
| ·革兰氏染色检测小鼠感染幽门螺杆菌情况 | 第118-119页 |
| ·病理切片检测幽门螺杆菌感染小鼠的状况 | 第119页 |
| ·幽门螺杆菌感染的小鼠胃壁随着时间的延长病变程度变化状况 | 第119-120页 |
| ·口服重组UreB 和HspA+CTB 对幽门螺杆菌感染小鼠的免疫治疗效果 | 第120-121页 |
| ·组织切片Giemsa 染色法对免疫治疗效果胃幽门螺杆菌定植情况进行比较 | 第121页 |
| ·免疫治疗和未免疫治疗小鼠胃病理变化比较 | 第121-122页 |
| ·小鼠胃幽门螺杆菌定植和胃病理变化的评分情况 | 第122页 |
| ·讨论 | 第122-126页 |
| ·抗原的选择及其在幽门螺杆菌疫苗应用 | 第122-123页 |
| ·免疫佐剂CTB 及其在幽门螺杆菌疫苗中的应用 | 第123页 |
| ·幽门螺杆菌感染动物模型及其在疫苗免疫保护效果评价中的应用 | 第123-124页 |
| ·幽门螺杆菌感染的检测方法及其在疫苗研究中的应用 | 第124页 |
| ·幽门螺杆菌疫苗的免疫途径及幽门螺杆菌生物学特征 | 第124-126页 |
| 参考文献 | 第126-131页 |
| 研究的创新点及展望 | 第131-132页 |
| 攻读学位期间本人出版或公开发表的论著、论文 | 第132-133页 |
| 致谢 | 第133-134页 |
