| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 第一部分 胶质瘤中PTTG 的表达与临床病理及预后的相关性研究 | 第13-21页 |
| 材料和方法 | 第13-15页 |
| 一、材料 | 第13页 |
| 二、主要试剂 | 第13-14页 |
| 三、主要仪器 | 第14页 |
| 四、方法 | 第14-15页 |
| 五、统计学分析 | 第15页 |
| 结果 | 第15-16页 |
| 一、PTTG 表达在不同病理级别胶质瘤中的表达 | 第15-16页 |
| 二、PTTG 蛋白表达与复发时间的关系 | 第16页 |
| 三、PTTG 蛋白表达与生存时间的关系 | 第16页 |
| 讨论 | 第16-21页 |
| 第二部分 PTTG RNA 干扰真核表达质粒的构建及沉默效果评价 | 第21-38页 |
| 材料 | 第21-23页 |
| 一、主要试剂 | 第21-22页 |
| 二、主要仪器 | 第22-23页 |
| 三、细胞株 | 第23页 |
| 方法 | 第23-32页 |
| 一、PTTGshRNA 的设计与合成 | 第23-25页 |
| 二、pGenesil-1-PTTG-shRNA 表达载体的构建、鉴定 | 第25-26页 |
| 三、细胞转染 | 第26-27页 |
| 四、RT-PCR 检测U251 胶质瘤细胞PTTGm RNA 表达 | 第27-29页 |
| 五、Westernblot 检测U251 胶质瘤细胞PTTG 蛋白的表达 | 第29-32页 |
| 六、统计学分析 | 第32页 |
| 结果 | 第32-34页 |
| 一、pGenesil-1 载体的线性化处理结果 | 第32页 |
| 二、重组质粒的酶切鉴定 | 第32页 |
| 三、重组质粒的测序分析 | 第32页 |
| 四、RT-PCR 检测PTTGmRNA 基因表达水平 | 第32-33页 |
| 五、Western bolt 检测PTTG 蛋白表达水平 | 第33-34页 |
| 讨论 | 第34-38页 |
| 第三部分 PTTG RNA 干扰对胶质瘤细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的影响 | 第38-45页 |
| 材料 | 第38-39页 |
| 一、主要试剂 | 第38页 |
| 二、主要仪器 | 第38-39页 |
| 三、细胞与质粒 | 第39页 |
| 方法 | 第39-42页 |
| 一、细胞培养 | 第39页 |
| 二、质粒的大量制备 | 第39-40页 |
| 三、质粒的转染及细胞分组 | 第40页 |
| 四、MTT 检测细胞增殖活性 | 第40-41页 |
| 五、流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第41页 |
| 六、统计学方法 | 第41-42页 |
| 结果 | 第42页 |
| 一、MTT 检测细胞增殖活性结果 | 第42页 |
| 二、流式细胞仪检测细胞凋亡结果 | 第42页 |
| 讨论 | 第42-45页 |
| 结论 | 第45-46页 |
| 附图 | 第46-53页 |
| 参考文献 | 第53-62页 |
| 综述 | 第62-86页 |
| 参考文献 | 第77-86页 |
| 缩略词表 | 第86-88页 |
| 攻读学位期间公开发表的论文 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
