| 致谢 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| 文献综述 | 第9-21页 |
| 1. MHC 的研究概况 | 第9-14页 |
| ·MHC 的结构 | 第9-10页 |
| ·MHC 的功能 | 第10-11页 |
| ·MHC 的免疫功能 | 第10-11页 |
| ·抵抗疾病功能 | 第11页 |
| ·组织排斥功能 | 第11页 |
| ·鸡MHC 的研究进展 | 第11-14页 |
| ·鸡主要组织相容性复合体的基因组结构 | 第12页 |
| ·鸡MHC 与疾病抗性 | 第12-14页 |
| 2. 抗原肽的预测及应用 | 第14-17页 |
| ·B 细胞抗原表位的研究方法 | 第14-15页 |
| ·T 细胞抗原表位的研究方法 | 第15-17页 |
| ·T 细胞表位预测方法 | 第15-16页 |
| ·传统化学“切割”法或酶法 | 第16页 |
| ·合成重叠肽法 | 第16页 |
| ·噬菌体随机肽库 | 第16-17页 |
| ·真核蛋白展示技术 | 第17页 |
| 3. 流感病毒 | 第17-21页 |
| ·禽流感病毒的基因组特点 | 第17-18页 |
| ·禽流感病毒的免疫原性 | 第18-19页 |
| ·禽流感NP 蛋白的免疫学研究进展 | 第19-21页 |
| 引言 | 第21-22页 |
| 试验一 白来航鸡 MHCⅠ基因的克隆与序列分析 | 第22-34页 |
| 1 材料与方法 | 第22-25页 |
| ·供试材料 | 第22页 |
| ·组织、菌种和质粒 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22页 |
| ·试验方法 | 第22-25页 |
| ·RT-PCR 引物设计与合成 | 第22页 |
| ·来航鸡总RNA 提取 | 第22-23页 |
| ·来航鸡BF2 与β2m 基因RT-PCR 扩增 | 第23页 |
| ·PCR 产物的回收纯化 | 第23-24页 |
| ·PCR 产物的连接 | 第24页 |
| ·连接产物的转化 | 第24页 |
| ·挑斑 | 第24页 |
| ·质粒提取 | 第24-25页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第25页 |
| ·来航鸡 BF_2 与 β2m 基因序列分析 | 第25页 |
| 2 结果 | 第25-32页 |
| ·来航鸡BF2 和β2m 基因的扩增 | 第25-26页 |
| ·来航鸡BF2 和β2m 基因的克隆 | 第26-27页 |
| ·来航鸡BF2 和β2m 基因序列测定及分析 | 第27-28页 |
| ·鸡BF2 基因序列同源性比较及系统进化分析 | 第28-31页 |
| ·来航鸡 β2m 基因序列同源性比较及系统进化分析 | 第31-32页 |
| 3 结论与讨论 | 第32-34页 |
| 试验二 来航鸡 MHC Ⅰ类分子重链胞外区和轻链成熟肽基因的克隆及其表达载体的构建 | 第34-47页 |
| 1 材料与方法 | 第34-38页 |
| ·供试材料 | 第34页 |
| ·菌种和质粒 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34页 |
| ·试剂盒 | 第34页 |
| ·主要仪器 | 第34页 |
| ·试验方法 | 第34-38页 |
| ·目的片段的制备 | 第34-35页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第35-36页 |
| ·重组质粒的转化和筛选 | 第36页 |
| ·重组表达质粒的鉴定 | 第36-37页 |
| ·重组表达质粒的诱导表达 | 第37页 |
| ·重组表达蛋白的SDS-PAGE 电泳 | 第37页 |
| ·pET-21-BF2 和pET-21-β2m 表达条件的优化 | 第37-38页 |
| 2 结果 | 第38-45页 |
| ·来航鸡BF2 和β2m 成熟肽基因的构建与鉴定 | 第38页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第38-39页 |
| ·来航鸡BF2 和β2m 成熟肽基因的鉴定 | 第39-40页 |
| ·pET-21-BF2 和 pET-21-β2m 在大肠杆菌中的表达及鉴定 | 第40-42页 |
| ·优化IPTG 诱导浓度 | 第42-43页 |
| ·优化最佳诱导时间 | 第43-45页 |
| 3 讨论 | 第45-47页 |
| ·原核表达载体的选择 | 第45页 |
| ·目的基因的选择及表达 | 第45页 |
| ·表达条件的优化 | 第45-47页 |
| 试验三 体外重建的来航鸡MHC Ⅰ类分子对H7N7 亚型流感病毒T 细胞表位的鉴定 | 第47-56页 |
| 1 材料与方法 | 第47-49页 |
| ·供试材料 | 第47页 |
| ·菌种和质粒 | 第47页 |
| ·主要试剂 | 第47页 |
| ·主要仪器 | 第47页 |
| ·试验方法 | 第47-49页 |
| ·多肽的设计及合成 | 第47页 |
| ·白来航鸡BF2 和β2m 蛋白的二级结构预测 | 第47页 |
| ·包涵体的提取与纯化 | 第47-48页 |
| ·体外结合实验 | 第48-49页 |
| 2 结果 | 第49-53页 |
| ·NP 基因亲水性分析 | 第49页 |
| ·白来航鸡BF2 和β2m 蛋白二级结构预测 | 第49-50页 |
| ·表位设计结果 | 第50-51页 |
| ·包涵体的纯化 | 第51-52页 |
| ·BF2/肽复合物的重折叠 | 第52-53页 |
| 3 讨论 | 第53-56页 |
| ·关于表达蛋白的纯化 | 第53-54页 |
| ·BF2 胞外区和β2m 二级结构的测定和预测 | 第54页 |
| ·关于T 细胞抗原表位设计 | 第54-55页 |
| ·MHC Ⅰ与多肽的结合 | 第55-56页 |
| 全文总结 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| ABSTRACT | 第61-62页 |
