| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-22页 |
| 1.1 研究问题的由来 | 第11页 |
| 1.2 角质层的相关研究综述 | 第11-17页 |
| 1.2.1 角质层的分布及功能 | 第11-12页 |
| 1.2.2 角质层的结构及化学组成 | 第12-14页 |
| 1.2.3 角质合成相关基因的研究进展 | 第14-17页 |
| 1.3 花药发育的相关研究综述 | 第17-20页 |
| 1.3.1 花药发育的基本过程 | 第17-18页 |
| 1.3.2 花药壁角质发育的研究概况 | 第18-20页 |
| 1.4 HOTHEAD蛋白家族研究进展 | 第20-21页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-29页 |
| 2.1 水稻材料、转化菌株和相关载体 | 第22页 |
| 2.2 生物信息学分析 | 第22-23页 |
| 2.3 DNA提取、PCR阳性检测及基因型鉴定 | 第23页 |
| 2.4 RNA抽提、反转录和实时荧光定量PCR检测 | 第23-24页 |
| 2.5 载体构建和农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第24-25页 |
| 2.6 原位杂交分析 | 第25页 |
| 2.7 HTH1-RNAi株系农艺性状考察 | 第25-26页 |
| 2.8 水稻成熟花粉的I_2-KI与FDA染色 | 第26页 |
| 2.9 水稻花粉发育细胞学石蜡切片 | 第26-27页 |
| 2.10 扫描及透射电子显微镜分析 | 第27页 |
| 2.11 水稻花药蜡质与角质成分分析 | 第27-28页 |
| 2.12 引物信息 | 第28-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-47页 |
| 3.1 水稻转基因材料的创建 | 第29-30页 |
| 3.2 水稻OsHTH1基因的基本信息及表达模式 | 第30-35页 |
| 3.2.1 OsHTH1基因的基本信息及蛋白序列分析 | 第31-33页 |
| 3.2.2 OsHTH1基因的表达模式分析 | 第33-35页 |
| 3.3 水稻OsHTH1基因的功能研究 | 第35-46页 |
| 3.3.1 HTH1-RNAiT_3代阳性检测及表达量检测 | 第35-36页 |
| 3.3.2 OsHTH1表达下调导致花粉育性及活力降低 | 第36-38页 |
| 3.3.3 CRISPR/Cas9创建的hth1突变体与干涉植株花药和花粉表型一致 | 第38-39页 |
| 3.3.4 OsHTH1表达下调导致花药发育缺陷 | 第39-41页 |
| 3.3.5 OsHTH1表达下调导致花药壁塌陷并影响花药表皮细胞形态 | 第41-43页 |
| 3.3.6 HTH1-RNAi花药表面角质单体含量降低 | 第43-46页 |
| 3.4 其它水稻花药发育相关基因CRISPR载体的构建 | 第46-47页 |
| 4 讨论 | 第47-52页 |
| 4.1 OsHTH1保证了水稻花药正常发育 | 第47-48页 |
| 4.2 OsHTH1参与花药发育过程中花药壁表皮角质的生物合成 | 第48-49页 |
| 4.3 OsHTH1编码蛋白的功能可能比在拟南芥中更广泛 | 第49-50页 |
| 4.4 OsHTH1在水稻花药发育中的地位 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
