| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 英文缩略词 | 第14-16页 |
| 前言 | 第16-18页 |
| 第一部分 文献研究 | 第18-34页 |
| 1. 2型糖尿病与血管内皮功能障碍现代医学研究进展 | 第18-24页 |
| 1.1 血管内皮细胞(vascular endothelial cell,VEC)的概念和作用 | 第18-20页 |
| 1.1.1 VEC的选择通透性 | 第18页 |
| 1.1.2 VEC的抗凝与促凝作用 | 第18-19页 |
| 1.1.3 VEC的溶解纤维蛋白功能 | 第19页 |
| 1.1.4 VEC参与血管运动的调节 | 第19页 |
| 1.1.5 VEC对血小板聚集的影响 | 第19页 |
| 1.1.6 VEC对白细胞的影响 | 第19-20页 |
| 1.1.7 VEC参与各种结缔组织成分的生成 | 第20页 |
| 1.2 血管内皮功能障碍与糖尿病 | 第20-22页 |
| 1.2.1 血管内皮功能障碍的病理生理机制 | 第20页 |
| 1.2.2 一氧化氮(NO)和NO合酶(eNOs)与糖尿病 | 第20-21页 |
| 1.2.3 氧化应激(oxidative stress)与糖尿病 | 第21页 |
| 1.2.4 内皮祖细胞(endothel progenitor cells,EPCs)与糖尿病 | 第21-22页 |
| 1.3 血管内皮功能障碍的药物治疗 | 第22-24页 |
| 1.3.1 血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)和血管紧张素受体拮抗剂(ARB) | 第22-23页 |
| 1.3.2 胰岛素增敏剂(Insulin Sensitizers) | 第23页 |
| 1.3.3 他汀类药物(Statins) | 第23页 |
| 1.3.4 抗氧化剂(Antioxidants) | 第23-24页 |
| 2. 中医学对糖尿病及糖尿病血管病变的认识 | 第24-28页 |
| 2.1 中医学对“糖尿病”的认识 | 第24-27页 |
| 2.1.1 “糖尿病”历史溯源 | 第24-25页 |
| 2.1.2 “糖尿病”中医病因病机 | 第25-26页 |
| 2.1.3 “糖尿病”中医辨证论治 | 第26-27页 |
| 2.2 中医学对于“糖尿病血管病变”的认识 | 第27-28页 |
| 2.2.1 “糖尿病血管病变”历史溯源 | 第27页 |
| 2.2.2 “糖尿病血管病变”病因病机初探 | 第27-28页 |
| 2.3 中医“治未病”思想对糖尿病血管病变的防治意义 | 第28页 |
| 3. 黄连素的降糖机制及安全性 | 第28-34页 |
| 3.1 黄连素的降糖机制 | 第28-31页 |
| 3.1.1 黄连素对胰岛素的作用 | 第29页 |
| 3.1.2 黄连素对肝脏糖脂代谢的影响 | 第29-30页 |
| 3.1.3 黄连素降低α-葡萄糖糖苷酶活性 | 第30页 |
| 3.1.4 黄连素对肠道微生物群的调节作用 | 第30页 |
| 3.1.5 黄连素抑制氧化应激和炎症反应 | 第30-31页 |
| 3.1.6 黄连素的降脂作用 | 第31页 |
| 3.2 黄连素的疗效和安全性 | 第31-34页 |
| 3.2.1 黄连素的疗效观察 | 第31-32页 |
| 3.2.1.1 单独使用黄连素 | 第31页 |
| 3.2.1.2 联合使用黄连素 | 第31-32页 |
| 3.2.2 黄连素的合理剂量及剂型 | 第32页 |
| 3.2.3 黄连素的毒性和副作用 | 第32-34页 |
| 第二部分 实验研究 黄连素对波动性高糖致人冠状动脉内皮细胞损伤的保护机制研究 | 第34-46页 |
| 1. 实验材料 | 第34-37页 |
| 1.1 细胞 | 第34页 |
| 1.2 主要实验试剂 | 第34-35页 |
| 1.3 主要实验仪器 | 第35-36页 |
| 1.4 主要实验溶液配置 | 第36-37页 |
| 2. 实验方法 | 第37-45页 |
| 2.1 人冠状动脉内皮细胞(HCAECs)的培养 | 第37-38页 |
| 2.1.1 HCAECs复苏 | 第37页 |
| 2.1.2 HCAECs换液 | 第37页 |
| 2.1.3 HCAECs传代 | 第37-38页 |
| 2.1.4 HCAECs冻存 | 第38页 |
| 2.2 HCAECs分组 | 第38页 |
| 2.3 细胞形态学观察 | 第38页 |
| 2.4 噻唑蓝(MTT)法检测HCAECs活力 | 第38-39页 |
| 2.5 原位末端标记检测法(TUNEL法)检测HCAECs凋亡 | 第39页 |
| 2.6 流式细胞术检测HCAECs凋亡 | 第39-40页 |
| 2.7 细胞中活性氧(ROS)浓度检测 | 第40-41页 |
| 2.8 丙二醛(MDA)测定 | 第41页 |
| 2.9 超氧化物歧化酶(SOD)测定 | 第41页 |
| 2.10 ELISA法检测IL-10、IL-1β、TNT-α、MCP-1等炎症因子的蛋白水平 | 第41-42页 |
| 2.11 Western blotting法检测Caspase-3、Nox4、NF-κB p65、AGEs、RAGE等蛋白的表达 | 第42-43页 |
| 2.12 实时荧光定量PCR (qRT-PCR)法检测IL-10、IL-1β、TNF-α MCP-1、Caspase-3、Nox4、NF-κB p65、AGEs、RAGE等mRNA的表达水平 | 第43-45页 |
| 2.12.1 RNA提取及反转录 | 第43-44页 |
| 2.12.2 实时荧光定量RT-PCR检测各目的基因mRNA水平 | 第44-45页 |
| 3. 统计学分析 | 第45-46页 |
| 结果 | 第46-61页 |
| 1. HCAECs的形态学观察 | 第46-47页 |
| 2. 不同葡萄糖培养条件及黄连素干预对HCAECs细胞活力的影响 | 第47-48页 |
| 3. 不同葡萄糖培养条件及黄连素干预对HCAECs凋亡的影响 | 第48-51页 |
| 3.1 TU-NEL法检测各组HCAECs的凋亡情况 | 第48-49页 |
| 3.2 流式细胞术检测各组HCAECs的凋亡情况 | 第49-50页 |
| 3.3 HCAECs在不同培养环境中Caspase-3的表达差异 | 第50-51页 |
| 4. 不同葡萄糖培养条件及黄连素干预对HCAECs炎症因子的影响 | 第51-55页 |
| 4.1 HCAECs在不同葡萄糖培养环境中及黄连素干预后IL-10的表达差异 | 第51-52页 |
| 4.2 HCAECs在不同葡萄糖培养环境中及黄连素干预后IL-1β的表达差异 | 第52-53页 |
| 4.3 HCAECs在不同葡萄糖培养环境中及黄连素干预后TNF-α的表达差异 | 第53-54页 |
| 4.4 HCAECs在不同葡萄糖培养环境中及黄连素千预后MCP-1的表达差异 | 第54-55页 |
| 5. 不同葡萄糖培养条件及黄连素干预对HCAECs氧化应激的影响 | 第55-58页 |
| 5.1 HCAECs在不同葡萄糖培养环境中及黄连素干预后ROS的表达情况 | 第55-56页 |
| 5.2 HCAECs在不同葡萄糖培养环境中及黄连素干预后SOD和MDA的表达情况 | 第56-57页 |
| 5.3 HCAECs在不同葡萄糖培养环境中及黄连素干预后Nox4的表达情况 | 第57-58页 |
| 6. 不同葡萄糖培养条件及黄连素干预对HCAECs NF-κB p65的影响 | 第58-59页 |
| 7. 不同葡萄糖培养条件及黄连素干预对HCAECs AGEs和RAGE表达的影响 | 第59-61页 |
| 讨论 | 第61-64页 |
| 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-78页 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 作者简介 | 第80页 |
