缩略语表 | 第1-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
ABSTRACT | 第11-13页 |
前言 | 第13-15页 |
文献回顾 | 第15-32页 |
实验一 JUXTANODIN在生后大鼠中枢神经系统的表达与分布特点 | 第32-48页 |
1 材料 | 第32-33页 |
·实验动物 | 第32页 |
·主要仪器设备 | 第32页 |
·主要试剂 | 第32-33页 |
2 方法 | 第33-37页 |
·大鼠的心脏灌注 | 第33-34页 |
·鼠脑组织的冰冻切片 | 第34页 |
·大鼠冰冻切片的免疫组化染色 | 第34-35页 |
·大鼠冰冻切片的免疫荧光染色 | 第35-36页 |
·不同发育期鼠脑组织样品的制备 | 第36页 |
·Western blot 实验步骤 | 第36-37页 |
3 结果 | 第37-43页 |
·JN 在生后大鼠大脑皮层中的分布特点 | 第37-39页 |
·JN 在大鼠脊髓中的表达与分布特点 | 第39-41页 |
·JN 与CNPase 在脊髓生后发育过程中的分布特点 | 第41-43页 |
4 讨论 | 第43-48页 |
实验二 JN启动子的转录与表达调控分析 | 第48-64页 |
1 材料 | 第48页 |
·菌株与质粒 | 第48页 |
·细胞系 | 第48页 |
·主要试剂 | 第48页 |
·主要仪器设备 | 第48页 |
·引物合成及测序 | 第48页 |
2 方法 | 第48-51页 |
·JN 及其上游启动子区的查找与分析 | 第48-49页 |
·JN 启动子荧光报告系统的构建 | 第49-50页 |
·大鼠脑组织基因组的提取 | 第49页 |
·用PCR 方法扩增目的DNA 序列 | 第49页 |
·PCR 扩增产物的克隆及测序 | 第49-50页 |
·细胞转染及荧光报告系统的活性检测 | 第50-51页 |
·制备转染质粒 | 第50页 |
·细胞培养 | 第50页 |
·瞬时转染 | 第50页 |
·荧光素酶报告基因表达检测 | 第50-51页 |
·体内电转 | 第51页 |
3 结果 | 第51-59页 |
·JN 启动子区的克隆及其核心启动子区的鉴定 | 第51-53页 |
·对JN 核心启动子区的鉴定 | 第53-54页 |
·ATRA 可在C6 细胞中上调JN 启动子的转录活性 | 第54页 |
·不同转录因子对JN 启动子区的作用 | 第54-56页 |
·JNp-1978 的细胞特异性鉴定 | 第56-58页 |
·JN 启动子转录活性的体内验证 | 第58-59页 |
4 讨论 | 第59-64页 |
实验三 HERMIN的鉴定与功能分析 | 第64-83页 |
1 材料 | 第64页 |
·人脑组织取材 | 第64页 |
·主要仪器设备 | 第64页 |
·主要试剂 | 第64页 |
2 方法(3 级标题) | 第64-69页 |
·人脑组织的冰冻切片 | 第64-65页 |
·人脑冰冻切片的免疫荧光染色 | 第65页 |
·质粒构建 | 第65-67页 |
·细胞培养 | 第67页 |
·瞬时转染 | 第67-68页 |
·细胞免疫荧光及phalloidin 染色步骤 | 第68页 |
·Western blot 实验步骤 | 第68-69页 |
3 结果 | 第69-78页 |
·hErmin 的生物信息学分析 | 第69-70页 |
·hErmin 在人脑组织中的鉴定 | 第70-71页 |
·hErmin 在人脑组织中存在的细胞类型的鉴定 | 第71-74页 |
·hErmin 通过结合F-actin 引起细胞形态的改变 | 第74-76页 |
·JN/hErmin C 末端功能分析 | 第76-78页 |
4 讨论 | 第78-83页 |
小结 | 第83-85页 |
参考文献 | 第85-91页 |
个人简历和研究成果 | 第91-92页 |
致谢 | 第92页 |