| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 英文缩略词表 | 第10-11页 |
| 第一章 综述 | 第11-13页 |
| 第二章 非整合Cx26缺陷聋iPSC细胞系的建立及鉴定 | 第13-34页 |
| 2.1 引言 | 第13页 |
| 2.2 材料与仪器 | 第13-17页 |
| 2.3 实验方法 | 第17-25页 |
| 技术路线 | 第17页 |
| 2.3.1 患者耳后皮肤的原代成纤维细胞培养 | 第17-18页 |
| 2.3.2 皮肤成纤维细胞的传代扩增 | 第18页 |
| 2.3.3 成纤维细胞的载体质粒电转染 | 第18-19页 |
| 2.3.4 成纤维细胞诱导为iPSC | 第19页 |
| 2.3.5 人iPSC单克隆集落的挑取培养和传代 | 第19-20页 |
| 2.3.6 人iPSC的碱性磷酸酶染色 | 第20-21页 |
| 2.3.7 人iPSC多能性marker免疫荧光染色 | 第21页 |
| 2.3.8 人iPSC RNA抽提及cDNA合成 | 第21-25页 |
| 2.4 实验结果 | 第25-32页 |
| 2.4.1 人皮肤原代成纤维细胞的获得 | 第25-26页 |
| 2.4.2 非整合Episomal质粒重编程人成纤维细胞 | 第26页 |
| 2.4.3 人iPSC碱性磷酸酶染色结果 | 第26页 |
| 2.4.4 Cx26缺陷iPSC系的建立 | 第26-31页 |
| 2.4.5 Cx26缺陷iPSC系的分化能力 | 第31-32页 |
| 2.5 结果讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 Cx26缺陷神经细胞模型的建立和基因表达差异 | 第34-43页 |
| 3.1 材料与仪器 | 第34-35页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第34页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第34-35页 |
| 3.1.3 主要试剂与溶液配方 | 第35页 |
| 3.2 实验方法 | 第35-38页 |
| 3.2.1 神经分化 | 第36-37页 |
| 3.2.2 基因组PCR,实时PCR和实时定量PCR(Q-PCR) | 第37页 |
| 3.2.3 免疫荧光 | 第37-38页 |
| 3.3 实验结果 | 第38-41页 |
| 3.4 结果讨论 | 第41-43页 |
| 小结 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-48页 |
