| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 植物磷素营养研究现状 | 第12页 |
| 1.2 植物对磷缺乏的响应研究现状 | 第12-15页 |
| 1.2.1 植物根系结构变化 | 第13页 |
| 1.2.2 缺磷时植物根系分泌物的大量合成 | 第13-15页 |
| 1.3 磷转运蛋白研究进展 | 第15-19页 |
| 1.3.1 Pht1家族磷转运蛋白基因 | 第16-17页 |
| 1.3.2 其他家族磷转运蛋白基因 | 第17-18页 |
| 1.3.3 磷转运蛋白的表达调控 | 第18-19页 |
| 1.3.4 磷转运蛋白的受转录因子调控表达 | 第19页 |
| 1.4 研究意义 | 第19-22页 |
| 第二章 茶树磷转运蛋白基因CsPT4的克隆及表达分析 | 第22-46页 |
| 2.1 材料与方法 | 第22-35页 |
| 2.1.1 材料 | 第22-24页 |
| 2.1.1.1 实验材料及处理 | 第22-23页 |
| 2.1.1.2 实验试剂 | 第23页 |
| 2.1.1.3 主要实验仪器 | 第23-24页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第24-35页 |
| 2.1.2.1 茶树总RNA提取 | 第24-25页 |
| 2.1.2.2 单链cDNA的合成 | 第25-26页 |
| 2.1.2.3 获得目的基因中间片段 | 第26-29页 |
| 2.1.2.4 3'RACE | 第29-30页 |
| 2.1.2.5 5'RACE | 第30-32页 |
| 2.1.2.6 高保真获得基因ORF | 第32-33页 |
| 2.1.2.7 CsPT4生物信息学分析 | 第33页 |
| 2.1.2.8 组织荧光定量与实时荧光定量 | 第33-35页 |
| 2.2 实验结果与分析 | 第35-44页 |
| 2.2.1 茶树组织总RNA的提取 | 第35-36页 |
| 2.2.2 茶树CsPT4基因克隆 | 第36页 |
| 2.2.3 CsPT4生物信息学分析 | 第36-43页 |
| 2.2.3.1 CsPT4氨基酸组成及理化性质分析 | 第36-37页 |
| 2.2.3.2 CsPT4的进化分析: | 第37页 |
| 2.2.3.3 CsPT4蛋白其他生物信息分析结果 | 第37-43页 |
| 2.2.4 CsPT4基因的组织特异性表达分析 | 第43页 |
| 2.2.5 CsPT4基因在不同磷水平条件下的差异表达分析 | 第43-44页 |
| 2.3 讨论 | 第44-46页 |
| 第三章 茶树磷转运蛋白基因CsPT1的克隆和表达分析 | 第46-62页 |
| 3.1 材料与方法 | 第47-49页 |
| 3.1.1 材料 | 第47页 |
| 3.1.1.1 实验材料 | 第47页 |
| 3.1.1.2 实验试剂 | 第47页 |
| 3.1.1.3 主要实验仪器 | 第47页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第47-49页 |
| 3.1.2.1 茶树总RNA提取 | 第47页 |
| 3.1.2.2 单链cDNA的合成 | 第47页 |
| 3.1.2.3 获得目的基因 | 第47-48页 |
| 3.1.2.4 CsPT1生物信息学分析 | 第48-49页 |
| 3.2 实验结果与分析 | 第49-59页 |
| 3.2.1 茶树组织总RNA的提取 | 第49-50页 |
| 3.2.2 茶树CsPT1基因克隆 | 第50-57页 |
| 3.2.2.1 CsPT1基因ORF的获得 | 第50-51页 |
| 3.2.2.2 CsPT1基因的生物信息学分析 | 第51-57页 |
| 3.2.3 CsPT1基因的组织特异性表达分析 | 第57-58页 |
| 3.2.4 CsPT1基因在不同磷水平条件下的差异表达分析 | 第58-59页 |
| 3.3 讨论 | 第59-62页 |
| 第四章 CsPT4的亚细胞定位及功能验证 | 第62-78页 |
| 4.1 材料与方法 | 第62-72页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第62页 |
| 4.1.2 试剂与仪器 | 第62-63页 |
| 4.1.2.1 试剂 | 第62-63页 |
| 4.1.2.2 仪器设备 | 第63页 |
| 4.1.3 实验方法 | 第63-72页 |
| 4.1.3.1 茶树CsPT4基因表达蛋白亚细胞定位 | 第63-66页 |
| 4.1.3.2 CsPT4在酵母表达 | 第66-68页 |
| 4.1.3.3 酵母感受态细胞制备及其质粒转化 | 第68-70页 |
| 4.1.3.4 茶树磷转运蛋白基因CsPT4在酵母中的功能验证 | 第70-72页 |
| 4.2 结果与分析 | 第72-75页 |
| 4.2.1 重组质粒的双酶切验证结果 | 第72页 |
| 4.2.2 CsPT4蛋白的亚细胞定位 | 第72-73页 |
| 4.2.3 CsPT4在酵母体系中的功能验证 | 第73-75页 |
| 4.2.3.1 在低磷环境下CsPT4能互补缺失型酵母突变体 | 第73-74页 |
| 4.2.3.2 不同pH条件下各酵母菌株生长情况 | 第74页 |
| 4.2.3.3 磷吸收动力学的测定 | 第74-75页 |
| 4.3 讨论 | 第75-78页 |
| 全文总结 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第90页 |
