摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
引言 | 第13-17页 |
第一部分 材料和方法 | 第17-31页 |
1.1 细胞和质粒 | 第17页 |
1.1.1 细胞 | 第17页 |
1.1.2 质粒 | 第17页 |
1.2 主要仪器和耗材 | 第17-18页 |
1.3 主要试剂 | 第18-19页 |
1.4 主要溶液和试剂配制 | 第19-23页 |
1.4.1 10%十二烷基硫酸钠(SDS)的配制 | 第19页 |
1.4.2 10%过硫酸胺的配制 | 第19-20页 |
1.4.3 1×电泳缓冲液的配制 | 第20页 |
1.4.4 1×转移缓冲液的配制 | 第20页 |
1.4.5 1.0mol/LTris·HCL的配制 | 第20页 |
1.4.6 1×TBS缓冲液的配制 | 第20页 |
1.4.7 20% Tween-20 的配制 | 第20-21页 |
1.4.8 TBST缓冲液的配制 | 第21页 |
1.4.9 封闭液的配制 | 第21页 |
1.4.10 10%浓度的SDS-PAGE分离胶的配制 | 第21页 |
1.4.11 5%浓度的SDS-PAGE浓缩胶的配制 | 第21页 |
1.4.12 一抗溶液(1:1000)的配制 | 第21-22页 |
1.4.13 LB培养基的配制 | 第22页 |
1.4.14 卡那霉素储存液的配制 | 第22页 |
1.4.15 DMEM培养基的配制 | 第22页 |
1.4.16 2%琼脂糖凝胶的配制 | 第22页 |
1.4.17 常用抗生素的工作浓度配制 | 第22-23页 |
1.5 实验方法 | 第23-31页 |
1.5.1 细胞培养相关 | 第23-25页 |
1.5.2 细胞基因测定 | 第25-27页 |
1.5.3 蛋白质免疫印迹实验 | 第27-29页 |
1.5.4 琼脂糖凝胶电泳 | 第29页 |
1.5.5 Transwell(迁移、侵袭)实验 | 第29-30页 |
1.5.6 双荧光素酶报告基因实验 | 第30页 |
1.5.7 RNA稳定性实验 | 第30-31页 |
第二部分 实验结果 | 第31-41页 |
2.1 PIAS1在非小细胞肺癌中的表达明显增高 | 第31页 |
2.2 PIAS1显著促进非小细胞肺癌的侵袭能力 | 第31-33页 |
2.3 降低PIAS1的表达可以抑制细胞的侵袭能力,是通过降低RhoGDIβ的表达来实现的 | 第33-35页 |
2.4 PIAS1在RhoGDIβ mRNA稳定性水平调控RhoGDIβ的表达 | 第35-36页 |
2.5 PIAS1通过降解AUF1从而促进RhoGDIβ mRNA水平的稳定性 | 第36-39页 |
2.6 PIAS1在蛋白降解水平调控AUF1的表达 | 第39-41页 |
第三部分 分析与讨论 | 第41-44页 |
第四部分 结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-48页 |
附录A 英文缩写索引 | 第48-50页 |
附录B PIAS1与肿瘤 | 第50-59页 |
参考文献 | 第55-59页 |
在学研究成果 | 第59-60页 |
致谢 | 第60页 |