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PIAS1通过促进RhoGDIβ mRNA的稳定性促进非小细胞肺癌细胞侵袭及其相关分子机制研究

摘要第4-7页
Abstract第7-10页
引言第13-17页
第一部分 材料和方法第17-31页
    1.1 细胞和质粒第17页
        1.1.1 细胞第17页
        1.1.2 质粒第17页
    1.2 主要仪器和耗材第17-18页
    1.3 主要试剂第18-19页
    1.4 主要溶液和试剂配制第19-23页
        1.4.1 10%十二烷基硫酸钠(SDS)的配制第19页
        1.4.2 10%过硫酸胺的配制第19-20页
        1.4.3 1×电泳缓冲液的配制第20页
        1.4.4 1×转移缓冲液的配制第20页
        1.4.5 1.0mol/LTris·HCL的配制第20页
        1.4.6 1×TBS缓冲液的配制第20页
        1.4.7 20% Tween-20 的配制第20-21页
        1.4.8 TBST缓冲液的配制第21页
        1.4.9 封闭液的配制第21页
        1.4.10 10%浓度的SDS-PAGE分离胶的配制第21页
        1.4.11 5%浓度的SDS-PAGE浓缩胶的配制第21页
        1.4.12 一抗溶液(1:1000)的配制第21-22页
        1.4.13 LB培养基的配制第22页
        1.4.14 卡那霉素储存液的配制第22页
        1.4.15 DMEM培养基的配制第22页
        1.4.16 2%琼脂糖凝胶的配制第22页
        1.4.17 常用抗生素的工作浓度配制第22-23页
    1.5 实验方法第23-31页
        1.5.1 细胞培养相关第23-25页
        1.5.2 细胞基因测定第25-27页
        1.5.3 蛋白质免疫印迹实验第27-29页
        1.5.4 琼脂糖凝胶电泳第29页
        1.5.5 Transwell(迁移、侵袭)实验第29-30页
        1.5.6 双荧光素酶报告基因实验第30页
        1.5.7 RNA稳定性实验第30-31页
第二部分 实验结果第31-41页
    2.1 PIAS1在非小细胞肺癌中的表达明显增高第31页
    2.2 PIAS1显著促进非小细胞肺癌的侵袭能力第31-33页
    2.3 降低PIAS1的表达可以抑制细胞的侵袭能力,是通过降低RhoGDIβ的表达来实现的第33-35页
    2.4 PIAS1在RhoGDIβ mRNA稳定性水平调控RhoGDIβ的表达第35-36页
    2.5 PIAS1通过降解AUF1从而促进RhoGDIβ mRNA水平的稳定性第36-39页
    2.6 PIAS1在蛋白降解水平调控AUF1的表达第39-41页
第三部分 分析与讨论第41-44页
第四部分 结论第44-45页
参考文献第45-48页
附录A 英文缩写索引第48-50页
附录B PIAS1与肿瘤第50-59页
    参考文献第55-59页
在学研究成果第59-60页
致谢第60页

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