摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
缩略语 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-21页 |
1 脱落酸 | 第11-13页 |
1.1 ABA的生物功能 | 第11-12页 |
1.2 ABA信号转导 | 第12-13页 |
2 CCaMK | 第13-14页 |
3 WRKY转录因子 | 第14-18页 |
3.1 WRKY转录因子的结构 | 第14-15页 |
3.2 WRKY转录因子的生理功能 | 第15-18页 |
4 蛋白相互鉴定方法 | 第18-19页 |
4.1 双分子荧光互补技术(BiC) | 第18页 |
4.2 免疫共沉淀(Co-IP) | 第18-19页 |
4.3 GST pull down | 第19页 |
5 本研究的目的和意义 | 第19-21页 |
第二章 ZmWRKY62与ZmCCaMK相互作用的鉴定 | 第21-37页 |
1 实验材料和试验方法 | 第22-33页 |
1.1 实验材料 | 第22-23页 |
1.2 大肠杆菌感受态的制备 | 第23-28页 |
1.3 载体构建 | 第28页 |
1.4 原核蛋白的诱导表达 | 第28-29页 |
1.5 原核蛋白的纯化 | 第29页 |
1.6 SDS-PAGE分析 | 第29-30页 |
1.7 Western Blotting | 第30页 |
1.8 GST pull down | 第30-31页 |
1.9 免疫共沉淀(Co-IP) | 第31-32页 |
1.10 双分子荧光互补(BiFC) | 第32-33页 |
2 结果分析 | 第33-36页 |
2.1 GST-pull down验证ZmCCaMK和ZmWRKY62的互作 | 第33-34页 |
2.2 BiFC实验表明ZmCCaMK和ZmWRKY62存在相互作用 | 第34-36页 |
2.3 Co-IP实验表明ZmCCaMK和ZmWRKY62存在相互作用 | 第36页 |
3 讨论 | 第36-37页 |
第三章 ZmWRKY62在ABA诱导的抗氧化防护中作用 | 第37-53页 |
1 材料与方法 | 第38-45页 |
1.1 实验材料 | 第38-39页 |
1.2 质粒的大量提取 | 第39页 |
1.3 玉米原生质体的分离及转化 | 第39-40页 |
1.4 载体构建 | 第40-41页 |
1.5 Zm WRKY62的ds RNA体外合成 | 第41-43页 |
1.6 质粒的大量提取 | 第43页 |
1.7 玉米原生质体的分离及转化 | 第43-44页 |
1.8 玉米叶片总RNA的提取 | 第44页 |
1.9 Real-time荧光定量PCR | 第44-45页 |
1.10 显性嵌合抑制沉默载体ubi-ZmWRKY62-EAR-mcherry的构建 | 第45页 |
2 实验结果 | 第45-51页 |
2.1 载体的构建和鉴定 | 第45-46页 |
2.2 外源ABA处理对ZmWRKY62和ZmCCaMK基因的表达的影响 | 第46-47页 |
2.3 ZmWRKY62在ABA诱导的抗氧化防护中的作用 | 第47-51页 |
3 讨论 | 第51-53页 |
第四章 全文总结 | 第53-55页 |
1 研究小结 | 第53页 |
1.1 ZmWRKY62和ZmCCaMK相互作用的鉴定 | 第53页 |
1.2 ZmWRKY62在ABA诱导抗氧化防护中的作用 | 第53页 |
2 创新之处 | 第53页 |
2.1 证明了ZmWRKY62和ZmCCaMK相互作用的真实性 | 第53页 |
2.2 证明了ZmWRKY62参与ABA诱导的抗氧化防护 | 第53页 |
3 存在的问题 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
致谢 | 第61页 |