| 摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3-4页 |
| 引言 | 第8-9页 |
| 1 综述 | 第9-21页 |
| 1.1 N-乙酰葡萄糖胺的应用 | 第9-12页 |
| 1.1.1 N-乙酰葡萄糖胺 | 第9-10页 |
| 1.1.2 N-乙酰葡萄糖胺的应用 | 第10-12页 |
| 1.2 N-乙酰葡萄糖胺的生产原料 | 第12-13页 |
| 1.3 N-乙酰葡萄糖胺的制备方法 | 第13-17页 |
| 1.3.1 化学方法生产GlcNAc | 第13-14页 |
| 1.3.2 酶催化法生产 | 第14-15页 |
| 1.3.3 酶法生产GlcNAc的改良工艺 | 第15-16页 |
| 1.3.4 生物转化法 | 第16-17页 |
| 1.4 N-乙酰葡萄糖胺生产过程中的酶 | 第17-19页 |
| 1.4.1 GH18家族几丁质酶 | 第17-18页 |
| 1.4.2 GH19家族几丁质酶 | 第18-19页 |
| 1.4.3 GH20家族N-乙酰己糖胺酶 | 第19页 |
| 1.5 选题依据与研究内容 | 第19-21页 |
| 1.5.1 选题依据 | 第19-20页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第20-21页 |
| 2 AnChi的氨基酸序列分析 | 第21-25页 |
| 2.1 引言 | 第21页 |
| 2.2 实验材料与方法 | 第21页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第21-23页 |
| 2.3.1 氨基酸序列比对分析 | 第21页 |
| 2.3.2 同源模建分析 | 第21-23页 |
| 2.4 小结 | 第23-25页 |
| 3 AnChi的重组表达、分离纯化与性质表征 | 第25-34页 |
| 3.1 引言 | 第25页 |
| 3.2 实验材料与方法 | 第25-29页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第25页 |
| 3.2.2 pET-28a-AnChi表达载体的构建 | 第25-27页 |
| 3.2.3 AnChi在大肠杆菌中的重组表达 | 第27页 |
| 3.2.4 AnChi的分离纯化 | 第27页 |
| 3.2.5 AnChi的酶学性质表征 | 第27-28页 |
| 3.2.6 AnChi对复杂底物的水解实验 | 第28-29页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第29-33页 |
| 3.3.1 质粒pET-28a-AnChi的构建与表达 | 第29-30页 |
| 3.3.2 质粒pET-28a-AnChi’的构建与表达 | 第30页 |
| 3.3.3 AnChi的分离与纯化 | 第30-31页 |
| 3.3.4 AnChi的酶学性质表征 | 第31-32页 |
| 3.3.5 AnChi的复杂底物水解实验 | 第32-33页 |
| 3.4 小结 | 第33-34页 |
| 4 AnChi在枯草芽孢杆菌中的重组表达及应用 | 第34-43页 |
| 4.1 引言 | 第34页 |
| 4.2 实验材料与方法 | 第34-37页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第34页 |
| 4.2.2 pDG1663-AnChi表达载体的构建 | 第34-35页 |
| 4.2.3 AnChi在枯草芽孢杆菌中的重组表达 | 第35-36页 |
| 4.2.4 AnChi的粗分离与鉴定 | 第36页 |
| 4.2.5 AnChi粗酶液对菌丝体的水解实验 | 第36-37页 |
| 4.2.6 AnChi水解菌丝体的产物鉴定与纯化 | 第37页 |
| 4.2.7 AnChi粗酶液的底物富集实验 | 第37页 |
| 4.3 实验结果与讨论 | 第37-42页 |
| 4.3.1 pDG1663-AnChi表达载体的构建 | 第37-38页 |
| 4.3.2 AnChi在枯草芽孢杆菌中的重组表达与优化 | 第38-39页 |
| 4.3.3 枯草芽孢杆菌发酵液粗分离与AnChi的鉴定 | 第39-40页 |
| 4.3.4 AnChi粗酶液对菌丝体的水解实验 | 第40-41页 |
| 4.3.5 AnChi的底物富集实验 | 第41-42页 |
| 4.4 小结 | 第42-43页 |
| 结论 | 第43-44页 |
| 展望 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 附录 AnChi的DNA序列与编码氨基酸序列 | 第50-52页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-55页 |
