| 摘要 | 第6-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-10页 |
| 1. 土壤重金属污染现状及危害 | 第8页 |
| 1.1 土壤镉污染现状 | 第8页 |
| 1.2 镉对植物的毒害效应 | 第8页 |
| 2. 植物修复技术与镉超积累植物 | 第8-9页 |
| 3. 问题的提出及其意义 | 第9页 |
| 4. 技术路线图 | 第9-10页 |
| 第二章 文献综述 | 第10-13页 |
| 1. 重金属转运蛋白的研究进展 | 第10-11页 |
| 1.1 重金属吸收蛋白 | 第10页 |
| 1.2 重金属排出蛋白 | 第10页 |
| 1.3 P_(1B)-ATPase家族转运蛋白 | 第10-11页 |
| 2. 马蔺研究进展 | 第11页 |
| 2.1 马蔺耐重金属性研究 | 第11页 |
| 3. RNAi沉默现象及RNAi干扰载体的构建方法 | 第11-13页 |
| 3.1 RNAi干扰的发现 | 第11页 |
| 3.2 RNAi干扰的机理 | 第11-12页 |
| 3.3 RNAi在植物中的应用 | 第12页 |
| 3.4 传统酶切-连接方法 | 第12-13页 |
| 第三章 马蔺HMA2基因克隆、表达水平及Cd~(2+)积累模式分析 | 第13-32页 |
| 1. 材料 | 第13页 |
| 1.1 植物材料 | 第13页 |
| 1.2 实验所用试剂 | 第13页 |
| 2. 试验方法 | 第13-21页 |
| 2.1 材料培养 | 第13-14页 |
| 2.2 HMA2基因的核心片段克隆 | 第14-15页 |
| 2.2.1 马蔺总RNA提取 | 第14页 |
| 2.2.2 琼脂糖凝胶电泳检测RNA | 第14页 |
| 2.2.3 第一条链cDNA合成 | 第14页 |
| 2.2.4 HMA2基因的核心片段扩增 | 第14-15页 |
| 2.2.5 核心片段PCR产物的胶回收 | 第15页 |
| 2.2.6 核心目的片段的克隆 | 第15页 |
| 2.3 HMA2基因3'端扩增 | 第15-17页 |
| 2.4 HMA2基因5'端的扩增 | 第17-19页 |
| 2.5 序列分析以及ORF框获得 | 第19-20页 |
| 2.6 HMA2基因的表达模式分析 | 第20-21页 |
| 3. 结果与分析 | 第21-30页 |
| 3.1 马蔺总RNA的纯度检测 | 第21页 |
| 3.2 HMA2基因的核心片段扩增结果 | 第21-22页 |
| 3.3 HMA2基因的3'RACE扩增结果 | 第22页 |
| 3.4 HMA2基因的5'RACE扩增结果 | 第22-23页 |
| 3.5 HMA2基因其测序结果分析和拼接以及ORF框的扩增结果 | 第23-25页 |
| 3.6 马蔺IlHMA2蛋白质氨基酸序列及二级结构分析 | 第25-27页 |
| 3.7 马蔺IlHMA2基因系统进化树分析 | 第27-29页 |
| 3.8 马蔺IlHMA2表达水平及Cd~(2+)积累模式分析 | 第29页 |
| 3.9 马蔺IlHMA2基因时空表达模式分析 | 第29-30页 |
| 4. 结论与讨论 | 第30-32页 |
| 第四章 植物表达载体的构建及遗传转化 | 第32-43页 |
| 1. 试验材料 | 第32-33页 |
| 1.1 植物材料 | 第32页 |
| 1.2 实验所用试剂 | 第32-33页 |
| 2. 试验方法 | 第33-38页 |
| 2.1 马蔺IlHMA2基因的RNAi靶位片段的获得 | 第33-34页 |
| 2.2 RNAi表达载体构建 | 第34-37页 |
| 2.3 农杆菌转化 | 第37页 |
| 2.4 马蔺的转化及筛选 | 第37页 |
| 2.4.1 马蔺的转化 | 第37页 |
| 2.4.2 阳性植株检测 | 第37页 |
| 2.5 阳性植株的分子检测 | 第37-38页 |
| 3. 结果与分析 | 第38-42页 |
| 3.1 获得IlHMA2基因RNAi靶位片段 | 第38页 |
| 3.2 以IlHMA2基因为靶标的RNAi载体构建 | 第38-39页 |
| 3.3 农杆菌转化 | 第39-40页 |
| 3.4 马蔺转化过程 | 第40页 |
| 3.5 阳性植株检测 | 第40-42页 |
| 4. 结论与讨论 | 第42-43页 |
| 第五章 结论 | 第43-45页 |
| 参考文献 | 第45-48页 |
| Abstract | 第48-49页 |
| 致谢 | 第50页 |
