| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第15-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-36页 |
| 1.1 盐胁迫对植物生长发育的影响 | 第16-17页 |
| 1.2 植物耐盐分子机制的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.3 植物耐盐基因工程的研究进展 | 第18-21页 |
| 1.3.1 通过表达渗透调节相关基因提高作物耐盐性 | 第19-20页 |
| 1.3.2 通过调节抗氧化胁迫提高作物耐盐性 | 第20页 |
| 1.3.3 通过调节离子平衡提高作物耐盐性 | 第20-21页 |
| 1.4 转录因子与植物抗逆性的研究进展 | 第21-27页 |
| 1.4.1 转录因子的结构 | 第21页 |
| 1.4.2 转录因子的活性调节 | 第21-22页 |
| 1.4.3 转录因子研究方法 | 第22-25页 |
| 1.4.4 植物抗逆相关转录因子 | 第25-27页 |
| 1.5 AP2/ERF转录因子的研究进展 | 第27-32页 |
| 1.5.1 AP2/ERF超家族简介 | 第27页 |
| 1.5.2 ERF亚家族的基因功能和调控通路 | 第27-29页 |
| 1.5.3 DREB亚家族的基因功能和调控通路 | 第29-32页 |
| 1.6 百脉根研究现状 | 第32-33页 |
| 1.6.1 百脉根简介 | 第32-33页 |
| 1.6.2 百脉根基因工程研究进展 | 第33页 |
| 1.7 本研究目的意义、研究内容与技术路线 | 第33-36页 |
| 1.7.1 本研究目的、意义 | 第33-34页 |
| 1.7.2 研究内容 | 第34-35页 |
| 1.7.3 技术路线 | 第35-36页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第36-60页 |
| 2.1 实验材料 | 第36-40页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第36页 |
| 2.1.2 菌株和质粒载体 | 第36页 |
| 2.1.3 主要数据库和生物信息软件 | 第36-37页 |
| 2.1.4 主要引物序列 | 第37-39页 |
| 2.1.5 主要仪器和设备 | 第39-40页 |
| 2.1.6 主要试剂和试剂盒 | 第40页 |
| 2.2 培养基和溶液配制 | 第40-45页 |
| 2.2.1 常用培养基和溶液配制 | 第40-41页 |
| 2.2.2 质粒提取用溶液配制 | 第41页 |
| 2.2.3 酵母单杂交用培养基和溶液配制 | 第41-43页 |
| 2.2.4 拟南芥叶肉原生质体制备用溶液配制 | 第43页 |
| 2.2.5 SDS-PAGE电泳用溶液配制 | 第43-44页 |
| 2.2.6 原核蛋白纯化用溶液配制 | 第44页 |
| 2.2.7 Western blot用溶液配制 | 第44-45页 |
| 2.2.8 百脉根遗传转化用培养基 | 第45页 |
| 2.3 实验方法 | 第45-60页 |
| 2.3.1 百脉根全基因AP2/ERF超家族成员的分离、鉴定及生物信息学分析 | 第45-46页 |
| 2.3.2 植物材料培养与处理 | 第46页 |
| 2.3.3 植物基因组DNA提取 | 第46-47页 |
| 2.3.4 植物总RNA提取 | 第47页 |
| 2.3.5 DNA和RNA质量检测 | 第47页 |
| 2.3.6 实时荧光定量PCR | 第47-48页 |
| 2.3.7 基因克隆 | 第48-51页 |
| 2.3.8 载体构建 | 第51-52页 |
| 2.3.9 亚细胞定位分析 | 第52-53页 |
| 2.3.10 酵母转录激活活性分析 | 第53-54页 |
| 2.3.11 原核蛋白表达、纯化与Western blot | 第54-56页 |
| 2.3.12 转录因子与顺式元件结合特性分析 | 第56-57页 |
| 2.3.13 拟南芥转化及阳性植株的获得 | 第57-58页 |
| 2.3.14 转基因LcAP2/ERFs拟南芥(T_3代)功能分析 | 第58-59页 |
| 2.3.15 百脉根遗传转化 | 第59页 |
| 2.3.16 转基因百脉根植株的鉴定 | 第59页 |
| 2.3.17 转基因百脉根胁迫处理 | 第59页 |
| 2.3.18 转基因百脉根抗逆生理指标检测 | 第59-60页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第60-108页 |
| 3.1 百脉根全基因组AP2/ERF家族进化起源分析 | 第60-65页 |
| 3.1.1 百脉根全基因组AP2/ERF超家族成员的分离、鉴定 | 第60页 |
| 3.1.2 百脉根LcEREBP家族的进化分析 | 第60-63页 |
| 3.1.3 百脉根LcEREBP家族保守基序分析 | 第63-65页 |
| 3.1.4 百脉根LcAP2/ERF基因的结构及其染色体定位分析 | 第65页 |
| 3.2 百脉根LcAP2/ERFs基因在盐胁迫下的表达谱分析 | 第65-67页 |
| 3.3 百脉根盐诱导表达基因LcAP2/ERFs的克隆与分子特征 | 第67-78页 |
| 3.3.1 百脉根盐诱导表达基因LcAP2/ERFs的克隆及其序列特征分析 | 第67-69页 |
| 3.3.2 盐诱导表达基因LcERFs表达特性分析 | 第69-72页 |
| 3.3.3 转录因子LcERFs的亚细胞定位分析 | 第72-73页 |
| 3.3.4 基因LcERFs转录激活活性分析 | 第73-75页 |
| 3.3.5 基因LcERFs启动子的顺式元件分析 | 第75-76页 |
| 3.3.6 蛋白LcERF053、LcERF056的原核表达、纯化与Western blot | 第76-78页 |
| 3.4 转录因子LcAP2/ERFs功能分析 | 第78-99页 |
| 3.4.1 植物过表达载体的构建及验证 | 第78页 |
| 3.4.2 转基因拟南芥阳性植株鉴定及T_3代纯系获得 | 第78-81页 |
| 3.4.3 转基因LcERF053拟南芥抗旱、耐盐功能分析 | 第81-84页 |
| 3.4.4 转基因LcERF054拟南芥耐盐功能分析 | 第84-90页 |
| 3.4.5 转基因LcERF056拟南芥耐盐功能分析 | 第90-92页 |
| 3.4.6 转基因LcERF080拟南芥耐盐功能分析 | 第92-96页 |
| 3.4.7 转基因LcAP2/ERF107拟南芥抗旱、耐盐功能分析 | 第96-99页 |
| 3.5 转录因子LcERF056转录调控分子机制初探 | 第99-102页 |
| 3.5.1 转录因子LcERF056与GCC顺式元件结合特性分析 | 第99-101页 |
| 3.5.2 转录因子LcERF056转录激活结构域的确定 | 第101-102页 |
| 3.6 转基因LcERF056百脉根的获得及耐盐功能分析 | 第102-108页 |
| 3.6.1 百脉根遗传转化 | 第102-103页 |
| 3.6.2 转基因LcERF056百脉根阳性植株的鉴定 | 第103-104页 |
| 3.6.3 转基因LcERF056百脉根具有显著的耐盐表型 | 第104-105页 |
| 3.6.4 NaCl对转基因LcERF056百脉根生理指标的影响 | 第105-108页 |
| 第四章 结果讨论 | 第108-115页 |
| 4.1 百脉根全基因组AP2/ERF家族进化起源分析 | 第108-110页 |
| 4.1.1 百脉根全基因组AP2/ERF超家族成员的分离、鉴定 | 第108-109页 |
| 4.1.2 百脉根LcEREBP家族的进化分析 | 第109页 |
| 4.1.3 百脉根LcEREBP家族保守基序分析 | 第109-110页 |
| 4.2 盐胁迫下百脉根LcAP2/ERF基因的表达谱分析 | 第110页 |
| 4.3 百脉根盐诱导表达基因LcERFs的分子表达特征 | 第110-111页 |
| 4.4 盐胁迫优良调控基因LcAP2/ERFs作用机制的初步探讨 | 第111-115页 |
| 4.4.1 盐胁迫优良基因LcERF053和LcERF054调控机制的初步探讨 | 第111-112页 |
| 4.4.2 盐胁迫优良基因LcERF056调控机制的初步探讨 | 第112-113页 |
| 4.4.3 盐胁迫优良基因LcERF080和LcAP2/ERF107调控机制的初步探讨 | 第113-115页 |
| 第五章 结论与展望 | 第115-117页 |
| 5.1 全文结论 | 第115页 |
| 5.2 展望 | 第115-117页 |
| 5.2.1 盐胁迫优良基因相关研究的展望 | 第115-116页 |
| 5.2.2 盐诱导表达基因相关研究的展望 | 第116页 |
| 5.2.3 盐抑制表达基因相关研究的展望 | 第116-117页 |
| 参考文献 | 第117-130页 |
| 致谢 | 第130-132页 |
| 附录 | 第132-145页 |
| 作者简历 | 第145-146页 |
