| 中文摘要 | 第3-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 缩略词注释表 | 第13-15页 |
| 引言 | 第15-18页 |
| 第一部分 单一和联合基因沉默对DC2.4细胞中TLR2、4受体表达影响 | 第18-62页 |
| 1 实验材料与方法 | 第18-25页 |
| 1.1 细胞来源 | 第18页 |
| 1.2 实验仪器及材料 | 第18-19页 |
| 1.3 主要试剂及配制方法 | 第19-25页 |
| 2 实验方法 | 第25-42页 |
| 2.1 构建沉默小鼠DC2.4中TLR2、TLR4基因的质粒 | 第25-33页 |
| 2.2 小鼠树突状细胞DC2.4培养 | 第33-34页 |
| 2.3 小鼠树突状细胞DC2.4转染 | 第34-35页 |
| 2.4 Western blot法检测TLR2、TLR4蛋白表达,筛选最佳沉默组 | 第35-39页 |
| 2.5 Western blot法检测同时沉默TLR2、TLR4后蛋白表达 | 第39-41页 |
| 2.6 统计学分析 | 第41-42页 |
| 3 实验结果 | 第42-59页 |
| 3.1 线性化表达载体鉴定 | 第42页 |
| 3.2 菌落PCR鉴定阳性克隆 | 第42-44页 |
| 3.3 测序结果分析 | 第44-47页 |
| 3.4 质粒小提后结果 | 第47-48页 |
| 3.5 重组质粒稳定转染小鼠树突状细胞DC2.4后检测EGFP荧光基因的表达 | 第48-51页 |
| 3.6 Western blot方法检测细胞中TLR2、TLR4蛋白表达 | 第51-56页 |
| 3.7 Western blot法检测同时沉默TLR2、TLR4后蛋白表达 | 第56-59页 |
| 4 讨论 | 第59-61页 |
| 5 小结 | 第61-62页 |
| 第二部分 青藤碱对TLR2、4基因沉默后小鼠DC2.4细胞炎性因子的表达影响 | 第62-109页 |
| 1 实验材料 | 第62-69页 |
| 1.1 细胞来源 | 第62页 |
| 1.2 实验仪器及材料 | 第62-63页 |
| 1.3 主要试剂及配制方法 | 第63-69页 |
| 2 实验方法 | 第69-74页 |
| 2.1 实验药物的配制 | 第69页 |
| 2.2 实验分组 | 第69-70页 |
| 2.3 小鼠树突状细胞DC2.4的培养 | 第70-71页 |
| 2.4 ELISA法检测青藤碱对DC2.4细胞分泌IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α炎性因子的影响 | 第71-72页 |
| 2.5 Westernblot法检测青藤碱对DC2.4细胞IRAK-4、P65、P38蛋白表达的影响 | 第72-74页 |
| 2.6 统计学方法 | 第74页 |
| 3 青藤碱对小鼠树突状细胞DC2.4分泌IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α浓度的影响 | 第74-97页 |
| 3.1 单一沉默TLR2后各组DC2.4所分泌IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α浓度的对比 | 第74-80页 |
| 3.2 单一沉默TLR4后各组DC2.4所分泌IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α浓度的对比 | 第80-86页 |
| 3.3 联合沉默TLR2/4后各组DC2.4所分泌IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α浓度的对比 | 第86-91页 |
| 3.4 青藤碱对小鼠DC2.4分泌IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α的影响 | 第91-93页 |
| 3.5 青藤碱对小鼠DC2.4细胞IRAK-4、P65、P38蛋白表达的影响 | 第93-97页 |
| 4 讨论 | 第97-107页 |
| 4.1 青藤碱对类风湿关节炎的治疗作用 | 第97-101页 |
| 4.2 青藤碱对类风湿关节炎中炎性因子的表达影响 | 第101-102页 |
| 4.3 树突状细胞与TLR2、TLR4受体蛋白的研究进展 | 第102-103页 |
| 4.4 树突状细胞与TLRs信号通路 | 第103-105页 |
| 4.5 实验研究主要内容与结果分析 | 第105-107页 |
| 5 小结 | 第107-109页 |
| 结论 | 第109-110页 |
| 创新与特色 | 第110-111页 |
| 存在问题及展望 | 第111-112页 |
| 致谢 | 第112-113页 |
| 参考文献 | 第113-118页 |
| 综述 | 第118-125页 |
| 参考文献 | 第122-125页 |
| 附件1：在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果 | 第125-126页 |
