| 摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 符号说明 | 第17-18页 |
| 第1章 绪论 | 第18-40页 |
| 1.1 肺癌 | 第18-23页 |
| 1.1.1 肺癌的分类 | 第18页 |
| 1.1.2 肺癌的异质性 | 第18-22页 |
| 1.1.2.1 基因突变和基因组异质性 | 第19-20页 |
| 1.1.2.2 肿瘤微环境异质性 | 第20-22页 |
| 1.1.3 KRAS突变肺癌的研究 | 第22-23页 |
| 1.2 NK细胞 | 第23-40页 |
| 1.2.1 NK细胞的研究现状 | 第23-26页 |
| 1.2.2 NK细胞与肿瘤 | 第26-34页 |
| 1.2.2.1 NK的抗肿瘤作用 | 第26-27页 |
| 1.2.2.2 肿瘤细胞逃避NK细胞介导的免疫监视 | 第27-30页 |
| 1.2.2.3 基于NK细胞的肿瘤免疫治疗 | 第30-34页 |
| 1.2.3 NK细胞代谢 | 第34-40页 |
| 1.2.3.1 代谢与免疫应答 | 第34-36页 |
| 1.2.3.2 小鼠NK细胞代谢 | 第36-37页 |
| 1.2.3.3 人NK细胞代谢 | 第37-38页 |
| 1.2.3.4 NK细胞代谢与肿瘤 | 第38-40页 |
| 第2章 引言 | 第40-44页 |
| 第3章 材料与方法 | 第44-64页 |
| 3.1 实验动物 | 第44页 |
| 3.2 实验材料 | 第44-51页 |
| 3.2.1 小鼠实验相关试剂 | 第44页 |
| 3.2.2 小鼠细胞分离相关试剂 | 第44-45页 |
| 3.2.3 细胞系 | 第45页 |
| 3.2.4 细胞培养相关试剂 | 第45页 |
| 3.2.5 细胞分选相关试剂 | 第45页 |
| 3.2.6 流式细胞术相关试剂 | 第45-48页 |
| 3.2.7 CFSE | 第48页 |
| 3.2.8 ROS检测试剂 | 第48页 |
| 3.2.9 RNA提取和逆转录PCR相关试剂 | 第48-49页 |
| 3.2.10 核酸电泳相关试剂 | 第49页 |
| 3.2.11 Western Blotting相关试剂 | 第49页 |
| 3.2.12 免疫荧光相关试剂 | 第49-50页 |
| 3.2.13 病毒和转染试剂 | 第50页 |
| 3.2.14 分子克隆相关试剂 | 第50页 |
| 3.2.15 糖酵解检测相关试剂 | 第50页 |
| 3.2.16 细胞因子 | 第50-51页 |
| 3.2.17 FBP1抑制实验相关试剂 | 第51页 |
| 3.3 实验仪器 | 第51-52页 |
| 3.4 实验方法 | 第52-64页 |
| 3.4.1 细胞培养 | 第52页 |
| 3.4.2 Lenti-Cre病毒制备 | 第52-53页 |
| 3.4.3 Kras突变自发肺癌小鼠模型 | 第53页 |
| 3.4.4 LLC细胞肺转移小鼠模型 | 第53-54页 |
| 3.4.5 NK细胞体内清除实验 | 第54页 |
| 3.4.6 小鼠单个核细胞分离 | 第54页 |
| 3.4.7 流式细胞术 | 第54-55页 |
| 3.4.8 免疫细胞纯化 | 第55-56页 |
| 3.4.9 免疫荧光染色 | 第56页 |
| 3.4.10 Western Blotting | 第56-57页 |
| 3.4.11 HE染色 | 第57页 |
| 3.4.12 RNA提取 | 第57-58页 |
| 3.4.13 逆转录 | 第58页 |
| 3.4.14 PCR | 第58-59页 |
| 3.4.15 实时荧光定量PCR | 第59页 |
| 3.4.16 NK细胞体外杀伤 | 第59-60页 |
| 3.4.17 细胞因子活化NK细胞 | 第60页 |
| 3.4.18 TGF-β刺激NK细胞 | 第60页 |
| 3.4.19 NK细胞体外增殖 | 第60页 |
| 3.4.20 ROS 检测 | 第60-61页 |
| 3.4.21 NK细胞过继转输 | 第61页 |
| 3.4.22 表达谱芯片分析 | 第61页 |
| 3.4.23 糖酵解检测 | 第61-62页 |
| 3.4.24 统计分析 | 第62-64页 |
| 第4章 结果与讨论 | 第64-94页 |
| 4.1 实验结果 | 第64-90页 |
| 4.1.1 建立Kras突变自发肺癌小鼠模型 | 第64-65页 |
| 4.1.2 NK细胞抑制肺癌起始 | 第65-69页 |
| 4.1.3 肺癌进展期NK细胞显著减少 | 第69-71页 |
| 4.1.4 肺癌微环境中NK细胞效应功能减弱 | 第71-76页 |
| 4.1.5 肺癌微环境中NK细胞存活能力受损 | 第76-80页 |
| 4.1.6 肺癌微环境中NK细胞上调表达FBP1 | 第80-82页 |
| 4.1.7 肺癌微环境中NK细胞糖酵解代谢下降 | 第82-83页 |
| 4.1.8 抑制FBP1能恢复NK细胞功能 | 第83-90页 |
| 4.2 总结与讨论 | 第90-94页 |
| 参考文献 | 第94-108页 |
| 致谢 | 第108-110页 |
| 攻读博士学位期间的主要成果 | 第110页 |