| 摘要 | 第4-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 第1章 绪论 | 第15-21页 |
| 1.1 缺氧与脑损伤的关系 | 第15页 |
| 1.2 缺氧缺血性脑损伤发病机制的研究进展 | 第15-17页 |
| 1.3 PCSK9是调节细胞凋亡的基因 | 第17-18页 |
| 1.4 缺氧条件下HIF-1α与凋亡的关系 | 第18页 |
| 1.5 本课题的科学假说和研究思路 | 第18-21页 |
| 第2章 实验材料 | 第21-25页 |
| 2.1 细胞和主要试剂 | 第21-22页 |
| 2.2 主要仪器设备 | 第22-25页 |
| 第3章 实验方法 | 第25-31页 |
| 3.1 常用试剂的配制 | 第25-26页 |
| 3.2 细胞培养 | 第26页 |
| 3.2.1 细胞复苏 | 第26页 |
| 3.2.2 细胞传代 | 第26页 |
| 3.2.3 细胞冻存 | 第26页 |
| 3.3 细胞转染 | 第26-27页 |
| 3.4 台盼蓝染色 | 第27页 |
| 3.5 蛋白质印迹法-Westernblot | 第27-29页 |
| 3.5.1 贴壁细胞蛋白质提取 | 第27-28页 |
| 3.5.2 SDS-PAGE凝胶配制 | 第28页 |
| 3.5.3 电泳 | 第28-29页 |
| 3.5.4 转膜(湿转法) | 第29页 |
| 3.5.5 封闭、抗体孵育与ECL化学发光检测 | 第29页 |
| 3.6 Hoechst33258染色 | 第29-30页 |
| 3.7 AnnexinV-FITC/PI双染 | 第30页 |
| 3.8 统计分析 | 第30-31页 |
| 第4章 实验结果 | 第31-45页 |
| 4.1 CoCl_2降低PC12细胞活力增加细胞缺氧损伤 | 第31页 |
| 4.2 CoCl_2增加PC12细胞中HIF-1α和PCSK9表达 | 第31-33页 |
| 4.2.1 CoCl_2呈浓度依赖性促进PC12细胞中HIF-1α和PCSK9表达 | 第31-32页 |
| 4.2.2 250μmol/LCoCl_2处理PC12细胞呈时间依赖性促进HIF-1α和PCSK9表达 | 第32-33页 |
| 4.3 CoCl_2促进PC12细胞的凋亡 | 第33-35页 |
| 4.3.1 CoCl_2呈浓度依赖性促进PC12细胞的凋亡 | 第33-34页 |
| 4.3.2 CoCl_2呈浓度依赖性增加PC12细胞的凋亡率 | 第34-35页 |
| 4.4 HIF-1α表达的改变对PC12细胞PCSK9表达的影响 | 第35页 |
| 4.5 HIF-1α激动剂DMOG促进CoCl_2诱导的PC12细胞PCSK9表达以及降低PC12细胞的凋亡 | 第35-38页 |
| 4.6 HIF-1α抑制剂(YC-1)降低PC12细胞PCSK9及HIF-1α表达以及增加PC12细胞的凋亡 | 第38-41页 |
| 4.7 PCSK9蛋白表达的改变对PC12细胞HIF-1α表达以及凋亡影响 | 第41-45页 |
| 第5章 讨论 | 第45-51页 |
| 第6章 结论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 综述 | 第59-77页 |
| References | 第69-77页 |
| 攻读学位期间的科研成果 | 第77-79页 |
| 课题资助 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
