摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
1 前言 | 第10-21页 |
1.1 Bt研究进展 | 第11-15页 |
1.1.1 Bt简介 | 第11-12页 |
1.1.2 Bt的作用机制及假说模型 | 第12-15页 |
1.2 Bt抗性现状 | 第15-17页 |
1.2.1 昆虫对Bt室内抗性 | 第15-16页 |
1.2.2 昆虫对Bt田间抗性 | 第16页 |
1.2.3 棉铃虫对Bt的抗性 | 第16-17页 |
1.3 昆虫对Bt抗性机制、受体和抗性治理策略 | 第17-18页 |
1.3.1 昆虫对Bt抗性的机制简介 | 第17页 |
1.3.2 昆虫中肠受体蛋白种类 | 第17页 |
1.3.3 Bt作物害虫抗性治理策略 | 第17-18页 |
1.4 q-PCR和内参基因的选择 | 第18-20页 |
1.4.1 荧光定量PCR技术 | 第18页 |
1.4.2 内参基因 | 第18-19页 |
1.4.3 内参基因的数据分析 | 第19-20页 |
1.5 研究的目的和意义 | 第20页 |
1.6 研究目标 | 第20-21页 |
2 棉铃虫内参基因筛选 | 第21-44页 |
2.1 材料与方法 | 第22-27页 |
2.1.1 供试材料 | 第22页 |
2.1.2 主要试剂 | 第22页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第22-23页 |
2.1.4 技术路线 | 第23页 |
2.1.5 待测基因克隆 | 第23-27页 |
2.2 结果与分析 | 第27-42页 |
2.2.1 探针可靠性验证 | 第27-34页 |
2.2.2 内参数据分析软件GeNorm、NormFinder和BestKeeper对棉铃虫备选内参基因的时空分析 | 第34-42页 |
2.3 讨论 | 第42-44页 |
3 抗、感棉铃虫钙粘蛋白、氨肽酶-N和碱性磷酸酶时、空相对表达量比较 | 第44-74页 |
3.1 材料与方法 | 第44-48页 |
3.1.1 供试材料 | 第44-45页 |
3.1.2 主要试剂 | 第45页 |
3.1.3 主要仪器设备 | 第45页 |
3.1.4 技术路线 | 第45-46页 |
3.1.5 主要方法 | 第46页 |
3.1.6 引物的设计与合成 | 第46-47页 |
3.1.7 qPCR反应体系和程序 | 第47页 |
3.1.8 探针可靠性验证 | 第47-48页 |
3.1.9 数据分析及处理 | 第48页 |
3.2 结果与分析 | 第48-71页 |
3.2.1 结果与分析 | 第48页 |
3.2.2 探针的可靠性验证 | 第48-54页 |
3.2.3 CAD在抗性与毒转正棉铃虫世代历期中相对表达量分析 | 第54页 |
3.2.4 APN在抗性与毒转正棉铃虫世代历期中相对表达量分析 | 第54-55页 |
3.2.5 ALP在抗性与毒转正棉铃虫世代历期中相对表达量分析 | 第55-56页 |
3.2.6 CAD、APN和ALP在毒转正品系幼虫不同组织中相对表达量分析 | 第56-57页 |
3.2.7 CAD、APN和ALP不同抗性水平及毒转正在同一龄期部位(4龄中肠)相对表达量分析 | 第57-59页 |
3.2.8 CAD、APN和ALP不同抗性水平的卵中相对表达量分析 | 第59-61页 |
3.2.9 CAD、APN和ALP不同抗性水平的蛹期中相对表达量分析 | 第61-63页 |
3.2.10 CAD在抗、感成虫雌、雄不同组织中相对表达量分析 | 第63-66页 |
3.2.11 APN抗、感成虫雌、雄不同组织中相对表达量分析 | 第66-68页 |
3.2.12 ALP抗、感成虫雌、雄不同组织中相对表达量分析 | 第68-71页 |
3.3 讨论 | 第71-74页 |
4 RNA干扰棉铃虫钙粘蛋白、氨肽酶-N和碱性磷酸酶及其功能验证 | 第74-91页 |
4.1 材料和方法 | 第74-77页 |
4.1.1 供试材料 | 第74-75页 |
4.1.2 主要试剂 | 第75页 |
4.1.3 主要仪器设备 | 第75页 |
4.1.4 技术路线 | 第75-76页 |
4.1.5 主要方法 | 第76-77页 |
4.2 结果与分析 | 第77-88页 |
4.2.1 不同siRNA片段和不同时间点沉默效果 | 第77-78页 |
4.2.2 有效siRNA注射后分别对抗、感棉铃虫24小时后的沉默效果 | 第78-79页 |
4.2.3 RNA干扰毒转正品系后的幼虫体重抑制(Bt胁迫) | 第79-81页 |
4.2.4 RNA干扰LF240后的幼虫死亡率(Bt胁迫) | 第81-82页 |
4.2.5 RNA干扰LF240后的幼虫化蛹率(Bt胁迫) | 第82-83页 |
4.2.6 RNA干扰LF240后的羽化率(Bt胁迫) | 第83-84页 |
4.2.7 RNA干扰ALP后的死亡率、化蛹率及羽化率(LF品系,非Bt胁迫) | 第84-86页 |
4.2.8 RNAi后的抗、感棉铃虫APN和ALP的酶活力测定(Bt胁迫) | 第86-88页 |
4.3 讨论 | 第88-91页 |
5 全文结论与讨论 | 第91-96页 |
5.1 全文结论 | 第91-95页 |
5.2 全文讨论 | 第95-96页 |
5.2.1 问题 | 第95页 |
5.2.2 展望 | 第95-96页 |
参考文献 | 第96-105页 |
致谢 | 第105-106页 |
文章情况 | 第106-107页 |
个人简介 | 第107页 |