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三角帆蚌细菌性瘟病病原学研究与LasB基因的克隆及表达

摘要第1-6页
Abstract第6-15页
第一章 文献综述第15-34页
 1 三角帆蚌的简介第15-17页
   ·三角帆蚌的分类、特征及经济价值第16页
   ·淡水育珠业的发展及现状第16-17页
 2 三角帆蚌的疾病研究第17-24页
   ·贝类疾病研究第17-21页
     ·贝类细菌性病害第18页
     ·贝类病毒性病害第18-19页
     ·贝类真菌性病害第19页
     ·贝类原核生物样病害第19-21页
     ·贝类寄生虫病害第21页
   ·淡水贝类—三角帆蚌的疾病研究第21-24页
     ·三角帆蚌瘟病的研究概况第21-22页
     ·细菌性蚌病第22-23页
     ·病毒性蚌病第23页
     ·寄生虫性蚌病第23-24页
     ·其它蚌病第24页
 3 水产动物主要致病菌介绍第24-30页
   ·水产动物细菌性病原的主要种类第24-26页
   ·嗜麦芽寡养单胞菌及其水产动物上的研究进展第26-28页
   ·维氏气单胞菌及其在水产动物上的研究进展第28-29页
   ·铜绿假单胞菌及其在水产动物上的研究进展第29-30页
 4 弹性蛋白酶基因研究进展第30-32页
 5 本研究的目的和意义第32-34页
第二章 三角帆蚌瘟病病原细菌的致病性及组织病理研究第34-51页
 1 材料和方法第34-37页
   ·材料第34-35页
     ·实验动物第34页
     ·主要试剂第34页
     ·主要仪器设备第34-35页
   ·方法第35-37页
     ·病蚌的外部症状及解剖观察第35页
     ·病原菌的分离培养第35页
     ·初步人工感染试验第35-36页
     ·组织病理学分析第36-37页
 2 结果与分析第37-48页
   ·外部症状及病理解剖学观察第37-38页
   ·流行情况第38页
   ·病原菌的分离第38-39页
   ·病原菌的人工感染结果第39-40页
   ·人工感染组织涂片结果第40-41页
   ·石蜡组织切片H-E染色结果第41-44页
     ·消化腺的组织病理学分析第41页
     ·鳃的组织病理学分析第41页
     ·性腺的组织病理学分析第41-42页
     ·肾脏的组织病理学分析第42页
     ·肠的组织病理学分析第42页
     ·斧足的组织病理学分析第42-44页
   ·病变细胞超微结构的观察与分析第44-48页
     ·细胞膜第45页
     ·细胞核第45页
     ·细胞质与细胞器第45-48页
 3 讨论第48-49页
 4 小结第49-51页
第三章 三角帆蚌瘟病病原细菌的分类鉴定第51-76页
 1 材料和方法第51-55页
   ·材料第51-53页
     ·实验动物和菌株第51页
     ·主要试剂第51-52页
     ·主要仪器设备第52-53页
   ·方法第53-55页
     ·病原菌的分类鉴定第53-55页
     ·病原菌的药物敏感试验第55页
 2 结果与分析第55-69页
   ·病原菌的形态特征第55-58页
     ·SJ-1菌株的形态特征第55-56页
     ·SJ-2菌株的形态特征第56-57页
     ·SJ-3菌株的形态特征第57-58页
   ·SJ-1、SJ-2、SJ-3菌株的生理特征第58-60页
   ·SJ-1、SJ-2、SJ-3菌株的16S rDNA的PCR扩增结果与系统发育分析第60-64页
     ·细菌基因组DNA的提取结果第60-61页
     ·PCR扩增结果第61页
     ·纯化结果第61-62页
     ·测序结果第62页
     ·16S rDNA序列分析和系统发育树的构建第62-64页
   ·SJ-1、SJ-2、SJ-3菌株的生化特征第64-66页
   ·药物敏感性试验结果第66-69页
 3 讨论第69-75页
   ·养殖三角帆蚌瘟病细菌病原的鉴定第69-73页
     ·SJ-1菌株的鉴定第69-70页
     ·SJ-2菌株的鉴定第70-72页
     ·SJ-3菌株的鉴定第72-73页
   ·养殖三角帆蚌瘟病防治药物第73-75页
 4 小结第75-76页
第四章 嗜麦芽寡养单胞菌弹性蛋白酶LasB基因的克隆与原核表达第76-101页
 1 材料和方法第76-82页
   ·材料第76-78页
     ·实验对象第76-77页
     ·药品与试剂第77页
     ·质粒和菌株第77页
     ·主要仪器设备第77-78页
   ·实验方法第78-82页
     ·实验对象处理第78页
     ·PCR引物设计及合成第78页
     ·嗜麦芽寡养单胞菌基因组DNA的提取第78页
     ·嗜麦芽寡养单胞菌弹性蛋白酶基因开放阅读框(ORF)的扩增第78-79页
     ·PCR扩增产物的回收与纯化第79页
     ·感受态细胞的制备第79页
     ·目的片段的连接和转化第79页
     ·载体质粒的小量提取第79-80页
     ·重组质粒的酶切鉴定第80页
     ·序列分析第80页
     ·系统发育树的构建第80页
     ·带粘性末端目的基因开放阅读框(ORF)及原核表达载体质粒的制备第80-81页
     ·原核表达载体的构建第81页
     ·原核表达载体的转化第81页
     ·重组质粒的诱导表达及SDS-PAGE鉴定第81-82页
 2 结果第82-98页
   ·嗜麦芽寡养单胞菌基因组DNA的提取第82页
   ·嗜麦芽寡养单胞菌弹性蛋白酶基因ORF的扩增与序列分析第82-84页
   ·弹性蛋白酶氨基酸序列分析第84-96页
     ·氨基酸理化性质分析第84-85页
     ·弹性蛋白酶信号肽预测第85页
     ·弹性蛋白酶跨膜结构预测第85-86页
     ·弹性蛋白酶二级结构预测第86-87页
     ·弹性蛋白酶三级结构预测第87-88页
     ·弹性蛋白酶同源性分析第88-95页
     ·弹性蛋白酶基因系统进化树的构建与分析第95-96页
   ·重组载体pMD18-T-ORF的构建和鉴定第96-97页
     ·重组载体pMD18-T-ORF的构建第96-97页
     ·重组载体pMD18-T-ORF的鉴定第97页
   ·原核表达载体的构建与鉴定第97-98页
   ·诱导表达与SDS-PAGE检测第98页
 3 讨论第98-100页
 4 小结第100-101页
第五章 结论、创新点及研究展望第101-102页
参考文献第102-118页
附录A第118-120页
附录B第120-124页
附录C第124-133页
致谢第133-134页
作者简介第134-135页

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