| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5页 |
| 第一章 绪论 | 第10-19页 |
| 1.1 蓝莓研究概况 | 第10-12页 |
| 1.1.1 蓝莓种质资源 | 第10-11页 |
| 1.1.2 蓝莓的生物活性物质 | 第11-12页 |
| 1.2 原花青素研究进展 | 第12-14页 |
| 1.3 VIGS技术 | 第14-16页 |
| 1.3.1 VIGS基因沉默机制 | 第14-15页 |
| 1.3.2 影响VIGS效率的因素 | 第15-16页 |
| 1.4 蓝莓遗传转化 | 第16-17页 |
| 1.5 课题提出 | 第17-19页 |
| 第二章 蓝莓LAR、ANS基因克隆及序列分析 | 第19-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第19页 |
| 2.1.2 菌株和载体 | 第19页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第19-20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-24页 |
| 2.2.1 植物总RNA提取 | 第20-21页 |
| 2.2.2 反转录 | 第21页 |
| 2.2.3 VALAR1/ANS和VCLAR1/ANS的克隆 | 第21-24页 |
| 2.3 结果与分析 | 第24-28页 |
| 2.3.1 目的基因获得 | 第24页 |
| 2.3.2 LAR、ANS基因序列分析 | 第24-26页 |
| 2.3.3 LAR、ANS系统进化树分析 | 第26-28页 |
| 2.4 讨论 | 第28-30页 |
| 第三章 VIGS介导蓝莓基因沉默研究 | 第30-45页 |
| 3.1 实验材料 | 第30-31页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第30页 |
| 3.1.2 基因 | 第30页 |
| 3.1.3 菌株与载体 | 第30页 |
| 3.1.4 主要试剂 | 第30-31页 |
| 3.2 实验方法 | 第31-39页 |
| 3.2.1 培养基配制 | 第31页 |
| 3.2.2 VIGS载体构建 | 第31-35页 |
| 3.2.3 侵染缓冲液的制备 | 第35-36页 |
| 3.2.4 VIGS沉默实验 | 第36-37页 |
| 3.2.5 病毒分子检测 | 第37页 |
| 3.2.6 沉默后基因表达量测定 | 第37-38页 |
| 3.2.7 沉默后原花青素含量测定 | 第38-39页 |
| 3.3 结果与分析 | 第39-44页 |
| 3.3.1 VIGS载体构建 | 第39-40页 |
| 3.3.2 VIGS侵染体系初探 | 第40-41页 |
| 3.3.3 LAR1VIGS结果 | 第41-44页 |
| 3.4 讨论 | 第44-45页 |
| 第四章 蓝莓遗传转化体系研究 | 第45-58页 |
| 4.1 实验材料 | 第45-46页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第45页 |
| 4.1.2 基因 | 第45页 |
| 4.1.3 菌株与载体 | 第45页 |
| 4.1.4 主要试剂 | 第45-46页 |
| 4.2 实验方法 | 第46-53页 |
| 4.2.1 培养基配制 | 第46页 |
| 4.2.2 脱分化培养基筛选 | 第46页 |
| 4.2.3 潮霉素抗性筛选 | 第46-47页 |
| 4.2.4 植物表达载体构建 | 第47-50页 |
| 4.2.5 农杆菌侵染液制备 | 第50-51页 |
| 4.2.6 侵染体系实验 | 第51-53页 |
| 4.2.7 转基因阳性苗筛选 | 第53页 |
| 4.3 结果与分析 | 第53-56页 |
| 4.3.1 再分化实验结果 | 第53页 |
| 4.3.2 潮霉素抗性确定 | 第53-54页 |
| 4.3.3 真核表达载体的构建 | 第54-55页 |
| 4.3.4 农杆菌侵染体系初探 | 第55-56页 |
| 4.3.5 原花青素相关基因农杆菌侵染 | 第56页 |
| 4.4 讨论 | 第56-58页 |
| 第五章 结论与展望 | 第58-61页 |
| 5.1 主要研究结论 | 第58-59页 |
| 5.1.1 目的基因克隆 | 第58页 |
| 5.1.2 VIGS介导蓝莓组培苗基因沉默 | 第58页 |
| 5.1.3 农杆菌介导遗传转化 | 第58-59页 |
| 5.2 本研究创新点 | 第59页 |
| 5.3 展望 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-71页 |
| 缩略词 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-74页 |
| 作者简介 | 第74页 |