| 中文摘要 | 第4-8页 |
| abstract | 第8-11页 |
| 引言 | 第14-20页 |
| 一、DNA双链断裂修复机制 | 第14-16页 |
| 二、DSB修复对细胞放射敏感性的影响 | 第16-17页 |
| 三、CRISPR/Cas9系统的基本结构、原理及应用 | 第17-18页 |
| 四、高分辨熔解曲线分析的原理及应用 | 第18-19页 |
| 五、课题研究思路 | 第19-20页 |
| 第一部分 建立一种新型NHEJ活性检测方法 | 第20-54页 |
| 1.材料与方法 | 第20-33页 |
| 1.1 材料与试剂 | 第20-24页 |
| 1.2 实验仪器 | 第24页 |
| 1.3 实验方法 | 第24-33页 |
| 2.实验结果 | 第33-50页 |
| 2.1 Cas9+sgHPRT质粒的设计与构建 | 第33-38页 |
| 2.2 验证Cas9+sgHPRT质粒定点诱导的NHEJ修复活性 | 第38-39页 |
| 2.3 HRM分析检测CRISPR/Cas9系统诱导的基因突变效率 | 第39-41页 |
| 2.4 HRM分析定量检测Cas9+sgHPRT诱导的NHEJ修复活性 | 第41-42页 |
| 2.5 HRM分析检测Cas9+sgHBEGF诱导的NHEJ修复活性 | 第42-49页 |
| 2.6 HRM分析检测CRISPR/Cas9系统在不同细胞的多个基因位点诱导的NHEJ修复活性 | 第49-50页 |
| 3.讨论 | 第50-54页 |
| 第二部分 药物筛选体系的构建、验证与应用 | 第54-80页 |
| 1.材料与方法 | 第54-57页 |
| 1.1 材料与仪器 | 第54-55页 |
| 1.2 实验方法 | 第55-57页 |
| 2.实验结果 | 第57-77页 |
| 2.1 确定筛选体系的CRISPR/Cas9打靶方案 | 第57-59页 |
| 2.2 筛选NHEJ抑制剂的流程 | 第59-61页 |
| 2.3 HRM分析检测DNA-PK抑制剂对NHEJ修复的抑制效果 | 第61-63页 |
| 2.4 1540种上市小分子化合物筛选结果分析 | 第63-74页 |
| 2.5 候选NHEJ抑制剂对细胞增殖能力及NHEJ修复活性的影响 | 第74-77页 |
| 3.讨论 | 第77-80页 |
| 第三部分 候选NHEJ修复抑制剂对肿瘤细胞辐射敏感性的影响 | 第80-97页 |
| 1.材料与方法 | 第80-85页 |
| 1.1 材料与仪器 | 第80-81页 |
| 1.2 实验方法 | 第81-85页 |
| 2.实验结果 | 第85-93页 |
| 2.1 候选NHEJ抑制剂联合X射线对肿瘤细胞克隆形成率的影响： | 第85-89页 |
| 2.2 候选NHEJ抑制剂对X射线照射所致Hela细胞DSB修复的影响： | 第89-92页 |
| 2.3 候选NHEJ抑制剂对X射线照射所致细胞G2/M期阻滞的影响：… | 第92-93页 |
| 3.讨论 | 第93-97页 |
| 第四部分 NHEJ抑制剂调控DNA双链断裂修复的作用机制研究 | 第97-119页 |
| 1.材料与方法 | 第97-111页 |
| 1.1 材料与仪器 | 第97-101页 |
| 1.2 实验方法 | 第101-111页 |
| 2.实验结果 | 第111-117页 |
| 2.1 候选NHEJ抑制剂对I-SceⅠ核酸酶诱导的NHEJ修复的影响 | 第111-113页 |
| 2.2 候选NHEJ抑制剂对I-SceⅠ核酸酶诱导的HR修复的影响 | 第113-114页 |
| 2.3 候选NHEJ抑制剂对DSB修复相关蛋白表达水平的影响 | 第114-115页 |
| 2.4 候选NHEJ抑制剂对DNA-PK激酶活性的调控作用 | 第115-117页 |
| 3.讨论 | 第117-119页 |
| 论文总结与创新性点 | 第119-120页 |
| 工作展望 | 第120-121页 |
| 参考文献 | 第121-127页 |
| 综述 | 第127-136页 |
| 参考文献 | 第132-136页 |
| 攻读学位期间学术成果、参与课题及获奖情况 | 第136-138页 |
| 英文缩略词表 | 第138-140页 |
| 致谢 | 第140-142页 |
