| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第1章 绪论 | 第12-18页 |
| 1.1 CD83 | 第12-15页 |
| 1.1.1 CD83的结构和生物学功能 | 第12页 |
| 1.1.1.1 CD83的结构 | 第12页 |
| 1.1.1.2 CD83的生物学特性 | 第12页 |
| 1.1.2 CD83的类型 | 第12页 |
| 1.1.3 可溶性CD83 | 第12-13页 |
| 1.1.4 CD83表达 | 第13页 |
| 1.1.5 CD83受体 | 第13-14页 |
| 1.1.6 CD83在免疫系统的调节功能 | 第14-15页 |
| 1.1.7 CD83的研究现状 | 第15页 |
| 1.2 树突细胞 | 第15-16页 |
| 1.3 实验目的 | 第16-18页 |
| 第2章 人类单核细胞的制备和DC的生成 | 第18-21页 |
| 2.1 组织样品和试剂 | 第18页 |
| 2.1.1 组织样品 | 第18页 |
| 2.1.2 试剂 | 第18页 |
| 2.1.3 试剂的配制 | 第18页 |
| 2.2 人类单核细胞的制备 | 第18-20页 |
| 2.2.1 分离白细胞层 | 第18-19页 |
| 2.2.2 提取人类单核细胞 | 第19-20页 |
| 2.3 培养人类单核细胞分化为树突状细胞 | 第20页 |
| 2.4 本章小结 | 第20-21页 |
| 第3章 人类SCD83的克隆及载体构建 | 第21-33页 |
| 3.1 实验材料和试剂 | 第21-22页 |
| 3.1.1 试剂 | 第21页 |
| 3.1.2 试剂的配制 | 第21-22页 |
| 3.2 引物的设计 | 第22-23页 |
| 3.3 RNA的提取 | 第23-24页 |
| 3.4 SCD83基因扩增 | 第24-26页 |
| 3.4.1 合成目的基因的c DNA | 第24页 |
| 3.4.2 PCR方法扩增目的基因s CD83 | 第24-25页 |
| 3.4.3 琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物 | 第25-26页 |
| 3.5 SCD83载体的构建 | 第26-28页 |
| 3.5.1 目的基因与载体的线性化 | 第26-27页 |
| 3.5.2 回收DNA片段 | 第27-28页 |
| 3.5.3 基因片段与载体的连接 | 第28页 |
| 3.6 筛选阳性表达载体 | 第28-30页 |
| 3.6.1 感受态细胞的制备 | 第28-29页 |
| 3.6.2 质粒的转化 | 第29页 |
| 3.6.3 摇菌 | 第29页 |
| 3.6.4 试剂盒方法提取质粒 | 第29-30页 |
| 3.6.5 酶切鉴定 | 第30页 |
| 3.7 实验结果 | 第30-31页 |
| 3.8 本章小结 | 第31-33页 |
| 第4章 SCD83重组蛋白的转染和表达 | 第33-42页 |
| 4.1 实验材料和试剂 | 第33-34页 |
| 4.1.1 试剂 | 第33页 |
| 4.1.2 试剂的配制 | 第33-34页 |
| 4.2 SCD83的转染和表达 | 第34-35页 |
| 4.3 表达产物纯化 | 第35-36页 |
| 4.4 WESTERN BLOT | 第36-38页 |
| 4.5 实验结果 | 第38-41页 |
| 4.5.1 重组s CD83的表达 | 第38-39页 |
| 4.5.2 重组s CD83的表达和生物学鉴定 | 第39-41页 |
| 4.6 本章小结 | 第41-42页 |
| 第5章 实验结果的检测 | 第42-54页 |
| 5.1 实验材料和试剂 | 第42页 |
| 5.2 SCD83生物活性的检测 | 第42页 |
| 5.3 细胞免疫染色和流式细胞术 | 第42页 |
| 5.4 细胞结合分析 | 第42-43页 |
| 5.5 单核细胞分化为树突状细胞的分析 | 第43页 |
| 5.6 统计学分析 | 第43-44页 |
| 5.7 实验结果分析 | 第44-53页 |
| 5.7.1 s CD83对人类单核细胞分化具有显著的抑制作用 | 第44-46页 |
| 5.7.2 s CD83对CD14，CD1a等蛋白表达的影响 | 第46-48页 |
| 5.7.3 s CD83在不同时间对CD14和CD1a的表达所产生的影响 | 第48-50页 |
| 5.7.4 s CD83对不同浓度下的CD14和CD1a表达所产生的影响 | 第50-51页 |
| 5.7.5 s CD83在体外抑制LPS诱导DC成熟 | 第51-53页 |
| 5.8 本章小结 | 第53-54页 |
| 第6章 讨论 | 第54-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-62页 |
| 附录 | 第62-63页 |
| 攻读硕士学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 作者简介 | 第65页 |
