| 中文摘要 | 第4-8页 |
| abstract | 第8-12页 |
| 英文缩略词表 | 第16-18页 |
| 前言 | 第18-20页 |
| 第一篇 文献综述 | 第20-31页 |
| 一 人组织激肽释放酶(kallikrein,KLK)基因家族 | 第20-22页 |
| 二 激肽释放酶基因家族KLKs在体内各组织中的表达及激素调节 | 第22-23页 |
| 三 激肽释放酶KLKs与恶性肿瘤的关系及相关机制 | 第23-27页 |
| 四 KLK4的特点及与肿瘤的关系 | 第27-29页 |
| 五 KLKs与口腔鳞状细胞癌(OSCC)的关系 | 第29-31页 |
| 第二篇 实验研究 | 第31-129页 |
| 第一章 口腔鳞癌细胞培养、KLK4基因干扰质粒构建以及干扰效率验证 | 第31-42页 |
| 一 口腔鳞癌细胞培养及KLK4基因干扰质粒构建 | 第31-36页 |
| 二 Real-timePCR方法验证KLK4基因沉默效率 | 第36-41页 |
| 三 小结 | 第41-42页 |
| 第二章 KLK4基因干扰对口腔鳞癌细胞增殖的影响 | 第42-57页 |
| 一 MTT实验检测口腔鳞癌细胞增殖 | 第42-45页 |
| 二 流式细胞术检测细胞周期 | 第45-48页 |
| 三 克隆形成实验检测体外成瘤能力 | 第48-51页 |
| 四 免疫荧光法检测PCNA的表达 | 第51-54页 |
| 五 讨论 | 第54-56页 |
| 六 小结 | 第56-57页 |
| 第三章 KLK4基因干扰对口腔鳞癌细胞凋亡的影响 | 第57-75页 |
| 一 流式细胞术AnnexinV/PI双染检测细胞凋亡 | 第57-61页 |
| 二 Hoechst染色检测凋亡细胞核变化 | 第61-63页 |
| 三 Western blot检测凋亡相关蛋白表达水平 | 第63-73页 |
| 四 讨论 | 第73-74页 |
| 五 小结 | 第74-75页 |
| 第四章 KLK4基因干扰对口腔鳞癌细胞迁移、侵袭的影响 | 第75-90页 |
| 一 划痕实验检测细胞迁移能力 | 第75-78页 |
| 二 Transwell(Matrigel基质胶)实验检测细胞侵袭能力 | 第78-83页 |
| 三 明胶酶谱法和Western blot检测MMP-2、MMP-9的表达 | 第83-88页 |
| 四 讨论 | 第88-89页 |
| 五 小结 | 第89-90页 |
| 第五章 KLK4基因干扰对口腔鳞癌细胞上皮间质转化(EMT)的影响 | 第90-98页 |
| 一 Western blot检测E-cadherin,Vimentin,N-cadherin的表达 | 第90-93页 |
| 二 Western blot检测EMT相关蛋白酶uPA,TIMP-1,TIMP-2的表达 | 第93-96页 |
| 三 讨论 | 第96-97页 |
| 四 小结 | 第97-98页 |
| 第六章 KLK4基因干扰对口腔鳞癌细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响 | 第98-113页 |
| 一 Western blot检测Wnt和β-catenin的表达 | 第98-100页 |
| 二 免疫荧光法检测β-catenin的表达 | 第100-102页 |
| 三 Western blot检测Wnt/β-catenin信号通路相关产物GSK-3β、p-GSK-3β、cyclinD1和c-myc的表达 | 第102-105页 |
| 四 MTT实验检测加入Wnt/β-catenin信号通路激活剂SB216763后各组细胞的增殖能力 | 第105-106页 |
| 五 流式细胞术AnnexinV/PI双染检测加入Wnt/β-catenin信号通路激活剂SB216763后各组细胞凋亡 | 第106-107页 |
| 六 Western blot检测加入Wnt/β-catenin信号通路激活剂SB216763后凋亡相关蛋白表达水平 | 第107-111页 |
| 七 讨论 | 第111-112页 |
| 八 小结 | 第112-113页 |
| 第七章 KLK4基因干扰对口腔鳞癌细胞PI3K/AKT信号通路的影响 | 第113-129页 |
| 一 Western blot检测P-PI3K、PI3K、P-AKT、AKT的表达情况 | 第113-117页 |
| 二 划痕实验检测加入PI3K/AKT信号通路激活剂740Y-P后各组细胞的迁移能力 | 第117-119页 |
| 三 Transwell实验检测加入PI3K/AKT信号通路激活剂740Y-P后各组细胞侵袭能力改变 | 第119-121页 |
| 四 明胶酶谱法检测加入PI3K/AKT信号通路激活剂740Y-P后MMP-2和MMP-9的表达水平 | 第121-123页 |
| 五 Western blot检测加入PI3K/AKT信号通路激活剂740Y-P后相关蛋白MMP-2、MMP-9和E-cadherin表达水平 | 第123-126页 |
| 六 讨论 | 第126-127页 |
| 七 小结 | 第127-129页 |
| 第三篇 结论 | 第129-131页 |
| 参考文献 | 第131-149页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第149-151页 |
| 致谢 | 第151页 |
