中文摘要 | 第3-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
第一部分:晚期糖基化终产物对体外培养的软骨细胞的损伤作用及可能机制研究 | 第13-46页 |
1.1 前言 | 第13-18页 |
1.1.1 骨关节炎 | 第13-15页 |
1.1.2 晚期糖基化终产物 | 第15-16页 |
1.1.3 晚期糖基化终产物与骨关节炎 | 第16-18页 |
1.2 材料 | 第18-21页 |
1.2.1 细胞 | 第18页 |
1.2.2 试剂 | 第18-19页 |
1.2.3 耗材 | 第19-20页 |
1.2.4 设备 | 第20-21页 |
1.3 方法 | 第21-28页 |
1.3.1 软骨细胞的分离、培养和鉴定 | 第21-23页 |
1.3.2 MTT法检测软骨细胞活性 | 第23-24页 |
1.3.3 定量RT-PCR检测软骨细胞TNF-α和NF-κB的表达 | 第24-26页 |
1.3.4 荧光探针法检测软骨细胞ROS的产生 | 第26-27页 |
1.3.5 AnnexinV-FITC/PI检测软骨细胞的凋亡 | 第27页 |
1.3.6 统计学方法 | 第27-28页 |
1.4 结果 | 第28-41页 |
1.4.1 软骨细胞的分离、培养和鉴定 | 第28-31页 |
1.4.2 MTT法测定AGEs对软骨细胞活性的影响 | 第31-35页 |
1.4.3 AGEs对软骨细胞TNF-α和NF-κB表达的影响 | 第35-38页 |
1.4.4 AGEs对软骨细胞内ROS产生的影响 | 第38-39页 |
1.4.5 AGEs对软骨细胞凋亡的影响 | 第39-41页 |
1.5 讨论 | 第41-45页 |
1.5.1 软骨细胞的分离和培养 | 第41-42页 |
1.5.2 AGEs所致的软骨细胞凋亡和损伤 | 第42-43页 |
1.5.3 AGEs所致的软骨细胞凋亡和损伤的作用机制 | 第43-45页 |
1.6 本章小结 | 第45-46页 |
第二部分:自噬在晚期糖基化终产物诱导的软骨细胞凋亡中的作用研究 | 第46-69页 |
2.1 前言 | 第46-49页 |
2.2 材料 | 第49-50页 |
2.2.1 试剂 | 第49-50页 |
2.2.2 耗材 | 第50页 |
2.2.3 设备 | 第50页 |
2.3 方法 | 第50-56页 |
2.3.1 MTT法检测软骨细胞的活性 | 第50-51页 |
2.3.2 Westernblot检测LC3的表达 | 第51-53页 |
2.3.3 qRT-PCR检测软骨细胞TNF-α和NF-κB的表达 | 第53-54页 |
2.3.4 荧光探针法检测软骨细胞ROS的产生 | 第54-55页 |
2.3.5 流式细胞术检测软骨细胞的凋亡 | 第55页 |
2.3.6 统计学方法 | 第55-56页 |
2.4 结果 | 第56-65页 |
2.4.1 MTT法测定自噬对软骨细胞活性的影响 | 第56-57页 |
2.4.2 Westernblot测定自噬对LC3蛋白表达的影响 | 第57-58页 |
2.4.3 自噬对软骨细胞TNF-α和NF-κB表达的影响 | 第58-61页 |
2.4.4 自噬对软骨细胞ROS产生的影响 | 第61-63页 |
2.4.5 自噬对软骨细胞凋亡的影响 | 第63-65页 |
2.5 讨论 | 第65-68页 |
2.5.1 雷帕霉素诱导的软骨细胞自噬 | 第65页 |
2.5.2 自噬对AGEs所致的软骨细胞凋亡和损伤的影响 | 第65-66页 |
2.5.3 自噬抑制AGEs所致的软骨细胞凋亡和损伤的作用机制 | 第66-68页 |
2.6 本章小结 | 第68-69页 |
结论 | 第69-70页 |
研究展望 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-81页 |
综述 | 第81-95页 |
参考文献 | 第88-95页 |
在学期间的研究成果 | 第95-96页 |
英文缩略词表 | 第96-98页 |
致谢 | 第98页 |