| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第1章 绪论 | 第9-23页 |
| 1.1 引言 | 第9页 |
| 1.2 植物抗旱性研究 | 第9-11页 |
| 1.2.1 植物应对干旱胁迫的方式 | 第9-10页 |
| 1.2.2 干旱胁迫对植物的生理生化特性影响 | 第10-11页 |
| 1.3 VIGS技术及其在抗逆基因研究中的应用 | 第11-21页 |
| 1.3.1 VIGS的机制和VIGS载体的起源 | 第11-14页 |
| 1.3.2 烟草脆裂病毒 | 第14页 |
| 1.3.3 VIGS在植物抗逆基因研究中的应用 | 第14-19页 |
| 1.3.4 VIGS研究植物抗逆基因的优势 | 第19页 |
| 1.3.5 VIGS研究抗逆机制的局限性及解决方案 | 第19-20页 |
| 1.3.6 VIGS载体最近的突破 | 第20-21页 |
| 1.4 主要研究内容和技术路线 | 第21-23页 |
| 1.4.1 主要研究内容 | 第21-22页 |
| 1.4.2 技术路线 | 第22-23页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第23-35页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第23-26页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第23-24页 |
| 2.1.2 实验试剂及配置 | 第24-26页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-35页 |
| 2.2.1 实验材料处理 | 第26-27页 |
| 2.2.2 生理生化指标测定 | 第27-29页 |
| 2.2.3 甜菜总RNA提取 | 第29页 |
| 2.2.4 cDNA第一链的合成 | 第29-30页 |
| 2.2.5 目标基因克隆 | 第30页 |
| 2.2.6 PCR扩增产物回收及连接 | 第30-31页 |
| 2.2.7 大肠杆菌感受态细胞制备及转化 | 第31页 |
| 2.2.8 菌液PCR鉴定阳性克隆 | 第31-32页 |
| 2.2.9 质粒提取 | 第32页 |
| 2.2.10 载体构建 | 第32页 |
| 2.2.11 农杆菌感受态制备及转化 | 第32-33页 |
| 2.2.12 农杆菌侵染甜菜子叶 | 第33页 |
| 2.2.13 半定量RT-PCR检测 | 第33-34页 |
| 2.2.14 抗旱基因qRT-PCR实验 | 第34-35页 |
| 第3章 抗旱品种筛选 | 第35-40页 |
| 3.1 实验结果与分析 | 第35-39页 |
| 3.1.1 相对含水量（RWC）测定 | 第35-36页 |
| 3.1.2 丙二醛含量（MDA）测定 | 第36页 |
| 3.1.3 脯氨酸（Pro）含量测定 | 第36-37页 |
| 3.1.4 超氧化物歧化酶(SOD)测定 | 第37-38页 |
| 3.1.5 过氧化物酶含量（POD）测定 | 第38-39页 |
| 3.2 小结 | 第39页 |
| 3.3 讨论 | 第39-40页 |
| 第4章 甜菜VIGS体系的建立 | 第40-48页 |
| 4.1 实验结果与分析 | 第40-47页 |
| 4.1.1 甜菜总RNA的提取和鉴定 | 第40页 |
| 4.1.2 TRV病毒对甜菜的侵染效果评估 | 第40-42页 |
| 4.1.3 pTRV2-Bv PDS沉默载体构建 | 第42-45页 |
| 4.1.4 Bv PDS基因沉默效果分析 | 第45-47页 |
| 4.1.5 半定量RT-PCR检测沉默效果 | 第47页 |
| 4.2 小结 | 第47页 |
| 4.3 讨论 | 第47-48页 |
| 第5章 抗旱基因功能验证 | 第48-53页 |
| 5.1 实验结果与分析 | 第48-51页 |
| 5.1.1 干旱胁迫后基因的表达量检测 | 第48-49页 |
| 5.1.2 pTRV2 抗旱基因沉默载体的构建 | 第49-50页 |
| 5.1.3 抗旱基因沉默效率分析 | 第50页 |
| 5.1.4 抗旱基因沉默植株干旱胁迫下表型变化 | 第50-51页 |
| 5.2 小结 | 第51页 |
| 5.3 讨论 | 第51-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 附录Ⅰ生理生化指标测定结果 | 第61-64页 |
| 附录Ⅱ 甜菜PDS基因序列 | 第64-65页 |
| 附录Ⅲ pTRV2 质粒图谱 | 第65-66页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文及其它成果 | 第66-68页 |
| 致谢 | 第68页 |