| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第12-28页 |
| 1.1 Apelin多肽的简介 | 第12-14页 |
| 1.1.1 Apelin多肽 | 第12-13页 |
| 1.1.2 Apelin的受体APJ | 第13页 |
| 1.1.3 Apelin的作用机理 | 第13-14页 |
| 1.2 胰脏的基本结构和功能 | 第14页 |
| 1.3 肾脏的基本结构和功能 | 第14-15页 |
| 1.3.1 肾脏结构 | 第14-15页 |
| 1.3.2 肾脏的功能 | 第15页 |
| 1.4 糖尿病 | 第15-18页 |
| 1.4.1 内质网应激(ER stress)在1型糖尿病中的重要作用 | 第16-18页 |
| 1.5 糖尿病肾病 | 第18-22页 |
| 1.5.1 糖尿病肾病的病理特征 | 第19-20页 |
| 1.5.2 糖尿病肾病的研究与治疗现状 | 第20-22页 |
| 1.6 肾脏缺血再灌注损伤 | 第22-24页 |
| 1.6.1 肾脏缺血再灌注损伤的概述 | 第22-23页 |
| 1.6.2 肾脏缺血再灌注损伤的病发机制 | 第23-24页 |
| 1.6.3 肾脏缺血再灌注损伤的研究现状 | 第24页 |
| 1.7 表观遗传学 | 第24-28页 |
| 1.7.1 表观遗传学概述 | 第24-25页 |
| 1.7.2 组蛋白修饰在糖尿病肾病中的作用 | 第25-26页 |
| 1.7.3 组蛋白修饰在肾脏I/R损伤中的作用 | 第26-28页 |
| 2 实验方法 | 第28-51页 |
| 2.1 实验动物 | 第28页 |
| 2.2 实验器械与设备 | 第28-29页 |
| 2.3 试剂及耗材 | 第29-34页 |
| 2.3.1 核酸操作相关试剂 | 第29页 |
| 2.3.2 蛋白质操作相关试剂 | 第29页 |
| 2.3.3 抗体 | 第29-31页 |
| 2.3.4 试剂盒 | 第31-32页 |
| 2.3.5 细胞培养相关试剂和耗材 | 第32页 |
| 2.3.6 免疫染色相关试剂 | 第32-33页 |
| 2.3.7 动物实验用相关试剂 | 第33页 |
| 2.3.8 相关试剂配方 | 第33页 |
| 2.3.9 其他试剂与耗材 | 第33-34页 |
| 2.4 动物实验模型的建立和取材 | 第34-36页 |
| 2.4.1 糖尿病动物模型的建立(Akita~(+/-)小鼠) | 第34-35页 |
| 2.4.2 大鼠肾脏I/R损伤模型的建立 | 第35-36页 |
| 2.5 细胞实验模型的建立和取材 | 第36-40页 |
| 2.5.1 HBZY-1和NRK-52E细胞中apelin瞬时过表 | 第36页 |
| 2.5.2 细胞的高糖模型的建立 | 第36-37页 |
| 2.5.3 细胞的缺血再灌注模型的建立 | 第37-39页 |
| 2.5.4 样品采集方法 | 第39-40页 |
| 2.6 实验方法 | 第40-47页 |
| 2.6.1 蛋白质印迹 | 第40-41页 |
| 2.6.2 总RNA提取及逆转录反应 | 第41-43页 |
| 2.6.3 半定量PCR和real time PCR | 第43-44页 |
| 2.6.4 染色质免疫共沉淀(ChIP assay) | 第44-47页 |
| 2.7 组织切片 | 第47-51页 |
| 2.7.1 肾脏的石蜡包埋切片 | 第47页 |
| 2.7.2 细胞免疫荧光染色 | 第47页 |
| 2.7.3 免疫组织化学染色 | 第47-48页 |
| 2.7.4 苏木精-伊红染色(HE staining) | 第48页 |
| 2.7.5 希夫试剂-苏木精染色(PASH) | 第48-49页 |
| 2.7.6 TUNEL(末端脱氧核苷酸转移酶标记)法检测细胞凋亡 | 第49页 |
| 2.7.7 统计方法 | 第49-51页 |
| 3 实验结果 | 第51-96页 |
| 3.1 Apelin-13多肽对1型糖尿病胰脏病变的治疗作用 | 第51-58页 |
| 3.1.1 实验设计 | 第51页 |
| 3.1.2 Apelin-13对若干1型糖尿病生理指标的调控作用 | 第51-52页 |
| 3.1.3 Apelin-13上调1型糖尿病中胰岛素水平的作用 | 第52-53页 |
| 3.1.4 Apelin-13能抑制糖尿病所引起的IRE1α通路的激活 | 第53-54页 |
| 3.1.5 Apelin-13能抑制糖尿病所引起的PERK通路的激活 | 第54-55页 |
| 3.1.6 Apelin-13能抑制糖尿病引起的分子伴侣的表达水平上调 | 第55-56页 |
| 3.1.7 Apelin-13能激活糖尿病所抑制的ERK、AKT和AMPKα通路 | 第56-57页 |
| 3.1.8 Apelin-13对糖尿病小鼠胰腺中APJ蛋白表达水平无影响 | 第57-58页 |
| 3.1.9 小结1 | 第58页 |
| 3.2 Apelin-13多肽对1型糖尿病肾病的治疗作用 | 第58-77页 |
| 3.2.1 Apelin-13能增加糖尿病小鼠肾脏中apelin蛋白表达水平 | 第58-59页 |
| 3.2.2 Apelin-13能够治疗糖尿病引起的肾小球病变 | 第59-61页 |
| 3.2.3 Apelin-13能抑制糖尿病肾病所引起的内质网应激 | 第61-62页 |
| 3.2.4 Apelin-13能抑制糖尿病肾病中的组蛋白的高乙酰化水平 | 第62-64页 |
| 3.2.5 Apelin-13能抑制糖尿病肾病中的炎症反应 | 第64-66页 |
| 3.2.6 Apelin-13能抑制糖尿病肾病中NF-κB和p38的炎症通路 | 第66页 |
| 3.2.7 Apelin-13能抑制高糖引起HBZY-1细胞中组蛋白的高乙酰化水平 | 第66-67页 |
| 3.2.8 Apelin-13恢复了高糖诱导HBZY-1细胞中的低HDAC1蛋白水平 | 第67-69页 |
| 3.2.9 Apelin-13能抑制高糖所引起HBZY-1细胞中的炎症 | 第69-70页 |
| 3.2.10 Apelin-13能抑制高糖导致的MES13细胞组蛋白的高乙酰化水平 | 第70-71页 |
| 3.2.11 Apelin-13能抑制高糖引起MES13细胞中的炎症反应 | 第71-73页 |
| 3.2.12 Apelin-13阻碍去乙酰化酶抑制剂--丁酸钠对HDAC1的抑制作用 | 第73-75页 |
| 3.2.13 Apelin-13抑制丁酸钠引起的HBZY-1细胞高乙酰化水平及炎症 | 第75-76页 |
| 3.2.14 HBZY-1细胞中过表达apelin能抑制高糖诱导的高乙酰化水平 | 第76-77页 |
| 3.2.15 小结2 | 第77页 |
| 3.3 Apelin-13对肾脏缺血再灌注损伤的保护作用 | 第77-96页 |
| 3.3.1 Apelin-13能调节肾脏I/R损伤对大鼠肾功能的影响 | 第77-78页 |
| 3.3.2 Apelin-13能抑制肾脏缺血再灌注损伤引起的肾小管坏死 | 第78-79页 |
| 3.3.3 Apelin-13能抑制了肾脏I/R损伤诱导的炎症反应 | 第79-80页 |
| 3.3.4 Apelin-13能抑制肾脏I/R损伤诱导的凋亡通路 | 第80-82页 |
| 3.3.5 Apelin-13可能对肾脏I/R损伤所引起的内质网应激有抑制作用 | 第82-83页 |
| 3.3.6 Apelin-13抑制肾脏I/R损伤所引起的组蛋白的高乙酰化 | 第83-84页 |
| 3.3.7 Apelin-13抑制肾脏I/R损伤所引起的组蛋白的高甲基化水平 | 第84-86页 |
| 3.3.8 Apelin-13抑制肾脏I/R损伤所激活的Tgf-β通路 | 第86-87页 |
| 3.3.9 Apelin-13抑制了I/R损伤所引起的HBZY-1细胞的炎症和凋亡 | 第87-88页 |
| 3.3.10 Apelin-13抑制I/R引起的HBZY-1细胞中组蛋白的高甲基化水平 | 第88-90页 |
| 3.3.11 Apelin-13抑制I/R引起的HBZY-1细胞中Tgf-β通路的激活 | 第90页 |
| 3.3.12 过表apelin抑制了I/R引起的HBZY-1细胞的炎症和凋亡反应 | 第90-92页 |
| 3.3.13 过表apelin抑制了I/R引起的HBZY-1细胞中组蛋白高甲基化水平 | 第92页 |
| 3.3.14 Apelin-13抑制了I/R引起的NRK-52E细胞的凋亡及组蛋白修饰 | 第92-93页 |
| 3.3.15 Apelin-13抑制了I/R引起的NRK-52E细胞中组蛋白高甲基化水平 | 第93-94页 |
| 3.3.16 Apelin-13抑制了I/R引起的NRK-52E细胞中Tgf-β通路的激活 | 第94-95页 |
| 3.3.17 小结3 | 第95-96页 |
| 4 讨论与展望 | 第96-102页 |
| 4.1 Apelin-13对1型糖尿病中胰岛功能的影响 | 第96页 |
| 4.2 Apelin-13对1型糖尿病相关的内质网通路的影响 | 第96-97页 |
| 4.3 Apelin-13对AKT、ERK和AMPK通路的影响 | 第97页 |
| 4.4 Apelin-13对1型糖尿病肾病的影响 | 第97-98页 |
| 4.5 Apelin-13对组蛋白乙酰化的调控作用 | 第98页 |
| 4.6 Apelin-13对组蛋白的乙酰化酶和去乙酰化酶的调控作用 | 第98-99页 |
| 4.7 Apelin-13能抑制NF-κB和p38通路所引起的炎症 | 第99页 |
| 4.8 Apelin-13对肾脏I/R损伤的治疗作用 | 第99-100页 |
| 4.9 Apelin-13对肾脏I/R所致的组蛋白高甲基化的调控作用 | 第100页 |
| 4.10 Apelin-13抑制组蛋白修饰所引起的炎症反应 | 第100-102页 |
| 参考文献 | 第102-111页 |
| 主要缩略词 | 第111-113页 |
| 综述 | 第113-126页 |
| 参考文献 | 第122-126页 |
| 攻读学位期间发表学位论文目录 | 第126-127页 |
| 致谢 | 第127页 |
