首页--医药、卫生论文--基础医学论文--医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学)论文--病原细菌论文

肺炎链球菌LicC蛋白在致病过程中作用的研究

缩略语表第1-12页
中文摘要第12-16页
ABSTRACT第16-21页
前言第21-23页
文献回顾第23-33页
正文第33-122页
 实验一 LicC及LicC截短体基因的克隆及表达载体的构建第33-53页
  1 材料第33-36页
   ·菌株第33页
   ·质粒载体第33页
   ·主要试剂第33-34页
   ·常用缓冲液及培养基第34-35页
   ·主要仪器第35-36页
  2 方法第36-44页
   ·引物设计第36页
   ·CTAB法提取肺炎链球菌总DNA第36-37页
   ·PCR扩增licC全长及?licC序列第37-39页
   ·E.coli DH5α感受态细胞的制备第39页
   ·构建重组表达质粒pQE80-licC及pQE80-ΔlicC第39-44页
  3 结果第44-51页
   ·PCR获得目的片段licC、?licC第44-45页
   ·重组质粒的鉴定第45-51页
  4 讨论第51-53页
 实验二 肺炎链球菌LicC及?LicC的表达及活性测定第53-72页
  1 材料第53-57页
   ·表达菌株第53页
   ·表达载体第53页
   ·主要试剂第53-54页
   ·常用缓冲液及培养基第54-57页
   ·主要仪器第57页
  2 方法第57-64页
   ·重组质粒转化E.coli BL21第57-59页
   ·LicC、?LicC诱导表达和可溶性分析第59-60页
   ·目的蛋白的纯化及浓度测定第60-62页
   ·western blot 鉴定表达蛋白第62-63页
   ·LicC、?LicC的活性分析第63-64页
  3 结果第64-69页
   ·目的蛋白诱导表达与表达条件优化第64-65页
   ·表达蛋白的可溶性分析及纯化第65-66页
   ·western blot鉴定表达蛋白第66-67页
   ·CCT活性分析第67-69页
  4 讨论第69-72页
 实验三 LicC缺失突变株的构建及相关功能实验第72-111页
  1 材料第72-76页
   ·菌株第72页
   ·载体第72页
   ·细胞株第72页
   ·主要试剂第72-73页
   ·常用缓冲液及培养基第73-75页
   ·主要仪器第75-76页
  2 方法第76-91页
   ·LicC缺失突变株的构建第76-89页
   ·?R6 与R6 生长曲线测定第89页
   ·黏附实验第89-90页
   ·疏水性分析第90-91页
   ·胆碱结合蛋白的分析第91页
  3 结果第91-108页
   ·PCR扩增构建突变株的DNA片段第91-94页
   ·连接片段U794-Janus的扩增第94页
   ·重组质粒pGEM-T-U794-Janus的酶切鉴定第94-95页
   ·重组质粒pGEM-T-U794-Janus-D622 的酶切鉴定第95-97页
   ·PCR扩增获得突变子U794-Janus-D622第97页
   ·酶切鉴定构建各突变子的重组质粒第97-99页
   ·扩增突变子第99-101页
   ·?R6 的PCR鉴定第101-102页
   ·?R6 的测序鉴定第102-106页
   ·生长曲线测定第106页
   ·黏附实验第106-107页
   ·疏水性分析第107页
   ·胆碱结合蛋白分析第107-108页
  4 讨论第108-111页
 实验四 构建LicC低表达菌株第111-122页
  1 材料第111-114页
   ·菌株第111页
   ·质粒载体第111页
   ·主要试剂第111-112页
   ·常用缓冲液及培养基第112-113页
   ·主要仪器第113-114页
  2 方法第114-118页
   ·引物设计第114页
   ·CTAB法提取肺炎链球菌总DNA第114页
   ·PCR扩增构建LicC低表达株的序列第114-115页
   ·构建重组质粒pDL278-ASRNA第115-118页
   ·构建LicC低表达菌株第118页
   ·LicC低表达菌株的鉴定第118页
  3 结果第118-121页
   ·PCR扩增目的片段第118-119页
   ·重组质粒的鉴定第119-120页
   ·Western blot鉴定licC低表达菌株第120-121页
  4 讨论第121-122页
小结第122-123页
参考文献第123-132页
个人简历和研究成果第132-133页
致谢第133页

论文共133页,点击 下载论文
上一篇:Ghrelin对大鼠血压和心肌收缩功能的影响
下一篇:GLT-1基因siRNA真核表达载体的构建及其在大鼠神经胶质细胞中的抑制效应