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长非编码RNA lnc-ALVE1-AS1表达规律、多态性分析及与鸡抗病表型关联性研究

中文摘要第2-4页
Abstract第4-6页
第一章 文献综述第10-26页
    1 内源性反转录病毒第10-11页
    2 禽内源性白血病病毒(Endogenous Avian leucosis virus, ALVE)第11-12页
    3 长非编码RNA第12-17页
        3.1 长非编码RNA的功能第14-15页
        3.2 长非编码RNA的作用机制第15页
        3.3 长非编码RNA的生成和起源第15-16页
        3.4 反义长非编码RNA第16-17页
    4 lncRNAs在病毒感染中的作用第17-26页
        4.1 功能和机制第17页
        4.2 染色质重塑第17页
        4.3 转录调控第17-18页
        4.4 转录后调节第18页
        4.5 lncRNA和病毒感染第18-22页
        4.6 病毒编码的lncRNA第22-25页
        4.7 lncRNAs与先天性免疫和获得性免疫第25-26页
第二章 禽内源性反转录病毒ALVE1在鸡基因组完整序列鉴定第26-33页
    1 材料第26-27页
        1.1 细胞第26页
        1.2 主要试剂第26-27页
    2 方法第27-29页
        2.1 序列同源性分析和系统进化树构建第27页
        2.2 cDNA末端快速扩增(Rapid amplification of cDNA ends, RACE)第27页
        2.3 反式PCR(Inverse PCR)第27-28页
        2.4 引物设计合成第28页
        2.5 基因组提取第28-29页
    3 结果第29-31页
        3.1 禽内源性反转录病毒ALVE1序列同源性和进化树分析第29页
        3.2 禽内源性反转录病毒ALVE1末端序列及其在染色体上插入位置鉴定第29-30页
        3.3 禽内源性反转录病毒ALVE1在基因组中的位置验证第30-31页
    4 讨论第31-33页
第三章 长非编码RNA lnc-ALVE1-AS1在CEF细胞和鸡个体发育早期表达规律第33-41页
    1 材料第33-34页
        1.1 鸡胚和雏鸡第33页
        1.2 仪器和试剂第33-34页
            1.2.1 主要仪器第33页
            1.2.2 主要实验试剂及试剂盒第33-34页
            1.2.3 主要试剂配制第34页
    2 方法第34-38页
        2.1 鸡胚成纤维细胞制备第34页
        2.2 样品采集第34-35页
        2.3 引物的设计与合成第35页
        2.4 细胞RNA提取第35-36页
        2.5 组织RNA提取第36页
        2.6 cDNA的合成第36-37页
        2.7 基因组DNA的提取第37页
        2.8 常规RT-PCR和RT-qPCR扩增反应第37-38页
    3 结果与分析第38-40页
        3.1 细胞中lnc-ALVE1-AS1表达量的检测第38-39页
        3.2 细胞中病毒生成量的检测第39页
        3.3 lnc-ALVE1-AS1在禽白血病病毒抗性、易感品系鸡免疫器官中的表达规律分析第39-40页
    4 讨论第40-41页
第四章 长非编码RNA lnc-ALVE1-AS1多态性分析及与鸡抗病表型关联性初步研究第41-46页
    1 材料第41-42页
        1.1 实验动物第41页
        1.2 仪器和试剂第41-42页
            1.2.1 主要仪器第41页
            1.2.2 主要实验试剂及配制第41-42页
    2 方法第42-43页
        2.1 组织基因组提取第42-43页
        2.2 常规PCR扩增第43页
        2.3 琼脂糖凝胶DNA回收第43页
        2.4 鸡胚成纤维细胞制备第43页
    3 结果与分析第43-45页
        3.1 抗性品系和易感品系lnc-ALVE1-AS1序列比对第43-44页
        3.2 如皋黄鸡、海南文昌鸡和河北麻城蛋鸡lnc-ALVE1-AS1序列比对第44页
        3.3 病毒感染实验中禽白血病病毒抗性品系鸡G1、易感品系鸡G3、如皋黄鸡、海南文昌鸡及河北麻城蛋鸡lnc-ALVE1-AS1表达量检测第44-45页
    4 讨论第45-46页
全文总结第46-47页
参考文献第47-59页
致谢第59-60页
攻读学位期间发表的学术论文目录第60-61页

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