| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 文献综述 | 第12-23页 |
| 第一章 NLRP3 炎症小体的研究进展 | 第12-23页 |
| 1.1 NOD 样受体（NLRs） | 第12-13页 |
| 1.2 NLRP3 炎症小体 | 第13-21页 |
| 1.2.1 炎症小体 | 第13-14页 |
| 1.2.2 NLRP3 炎症小体 | 第14页 |
| 1.2.3 NLRP3 的激活机制 | 第14-16页 |
| 1.2.4 NLRP3 炎症小体的激活 | 第16页 |
| 1.2.5 NLRP3 炎症小体的调节机制 | 第16-20页 |
| 1.2.6 NLRP3 炎症小体的抗病毒效应 | 第20-21页 |
| 1.3 本课题研究内容 | 第21-23页 |
| 试验研究 | 第23-71页 |
| 第二章 猪源 NLRP3 炎症小体研究体系的建立 | 第23-43页 |
| 2.1 材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 试验动物 | 第23页 |
| 2.1.2 病毒株、菌株、载体和细胞 | 第23页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第24页 |
| 2.1.5 主要溶液及配方 | 第24-25页 |
| 2.2 方法 | 第25-32页 |
| 2.2.1 猪肺泡巨噬细胞的分离 | 第25-26页 |
| 2.2.2 试验用毒株的筛选 | 第26-27页 |
| 2.2.3 获取 PAM cDNA | 第27页 |
| 2.2.4 NLRP3、ASC 和 caspase-1 各基因及其截短基因的扩增与克隆 | 第27-28页 |
| 2.2.5 蛋白表达、纯化与鉴定 | 第28-30页 |
| 2.2.6 NLRP3、ASC 和 caspase-1 多克隆抗体的制备 | 第30页 |
| 2.2.7 多克隆抗体的特异性鉴定 | 第30-32页 |
| 2.2.8 ASC 单克隆抗体的制备 | 第32页 |
| 2.2.9 ASC 单克隆抗体的特异性鉴定 | 第32页 |
| 2.2.10 多克隆抗体和单克隆抗体在 PRRSV 感染 PAM 中的应用 | 第32页 |
| 2.3 结果 | 第32-41页 |
| 2.3.1 试验用毒株的筛选 | 第32-33页 |
| 2.3.2 NLRP3、ASC 和 caspase-1 各基因及其截短基因的扩增与克隆 | 第33-35页 |
| 2.3.3 NLRP3、ASC 和 caspase-1 蛋白的表达与纯化及抗体制备、鉴定与应用 | 第35-41页 |
| 2.4 讨论 | 第41-42页 |
| 2.5 小结 | 第42-43页 |
| 第三章 PRRSV HuN4 激活 NLRP3 炎症小体的研究 | 第43-54页 |
| 3.1 材料 | 第43-44页 |
| 3.1.1 试验动物、病毒和细胞 | 第43页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第43-44页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第44页 |
| 3.2 方法 | 第44-46页 |
| 3.2.1 PRRSV HuN4 感染 PAM 激活炎症小体研究 | 第44页 |
| 3.2.2 PRRSV HuN4 激活炎症小体的剂量研究 | 第44页 |
| 3.2.3 PRRSV HuN4 激活炎症小体的类型鉴定 | 第44-45页 |
| 3.2.4 PRRSV HuN4 RNA 激活炎症小体的研究 | 第45页 |
| 3.2.5 NLRP3 炎症小体抑制剂的使用研究 | 第45-46页 |
| 3.2.6 数据统计与分析 | 第46页 |
| 3.3 结果 | 第46-52页 |
| 3.3.1 PRRSV HuN4 感染 PAM 能够激活炎症小体 | 第46-47页 |
| 3.3.2 PRRSV HuN4 激活炎症小体具有剂量依赖性 | 第47-48页 |
| 3.3.3 PRRSV HuN4 能够激活 NLRP3 炎症小体 | 第48-50页 |
| 3.3.4 PRRSV HuN4 RNA 能够激活炎症小体 | 第50-51页 |
| 3.3.5 胞内溶酶体系统酸化和 ATP 依赖的 K 离子通道参与了 PRRSV HuN4 激活炎症小体 | 第51-52页 |
| 3.4 讨论 | 第52-53页 |
| 3.5 小结 | 第53-54页 |
| 第四章 新分子 DDX19A 的发现及初步研究 | 第54-71页 |
| 4.1 材料 | 第54-56页 |
| 4.1.1 试验动物、病毒和细胞 | 第54页 |
| 4.1.2 质粒 | 第54页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第54-56页 |
| 4.1.4 主要仪器 | 第56页 |
| 4.1.5 主要溶液及配方 | 第56页 |
| 4.2 方法 | 第56-60页 |
| 4.2.1 IP-MS | 第56页 |
| 4.2.2 DDX19A 与 NLRP3 炎症小体各蛋白相互作用的验证 | 第56-57页 |
| 4.2.3 DDX19A 与 NLRP3 相互作用的鉴定 | 第57-58页 |
| 4.2.4 外源 DDX19A 与 HuN4 RNA 的相互作用研究 | 第58-59页 |
| 4.2.5 DDX19A 的 pulldown 和 RT-PCR 试验 | 第59-60页 |
| 4.2.6 DDX19A 与 HuN4 RNA 的激光共聚焦试验 | 第60页 |
| 4.2.7 体外表达 DDX19A 与 HuN4 RNA 5’UTR 的 RNA pulldonw 试验 | 第60页 |
| 4.3 结果 | 第60-69页 |
| 4.3.1 IP-MS 结果 | 第60-62页 |
| 4.3.2 DDX19A 与 NLRP3 相互作用的鉴定 | 第62-65页 |
| 4.3.3 DDX19A 能够结合 PRRSV RNA | 第65-67页 |
| 4.3.4 体内条件下 DDX19A 能够结合 PRRSV RNA | 第67-68页 |
| 4.3.5 体外条件下 DDX19A 能够结合 PRRSV RNA | 第68-69页 |
| 4.4 讨论 | 第69-70页 |
| 4.5 小结 | 第70-71页 |
| 全文总结 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-78页 |
| 缩略词 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 作者简介 | 第80页 |
