| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 英文缩略词表 | 第14-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-28页 |
| 1.1 IDH1 和 IDH2 基因概况 | 第16-17页 |
| 1.2 IDH 基因与脑胶质瘤 | 第17-23页 |
| 1.2.1 胶质瘤中 IDH 的突变 | 第17-18页 |
| 1.2.2 IDH 突变在胶质瘤发生中的作用 | 第18-20页 |
| 1.2.3 IDH 突变与胶质瘤治疗和预后分析 | 第20-22页 |
| 1.2.4 IDH1 突变和胶质瘤相关分子事件的关系 | 第22-23页 |
| 1.2.5 其他肿瘤中的 IDH 突变 | 第23页 |
| 1.3 IDH 基因突变的检测方法 | 第23-25页 |
| 1.4 HRM 检测方法研究进展 | 第25-26页 |
| 1.4.1 HRM 技术的原理 | 第25页 |
| 1.4.2 HRM 方法应用进展 | 第25-26页 |
| 1.5 本课题研究意义及主要内容 | 第26-28页 |
| 1.5.1 本课题的研究意义 | 第26-27页 |
| 1.5.2 本课题主要研究内容 | 第27-28页 |
| 第二章 脑胶质瘤 IDH1 基因突变 HRM 检测方法的初步建立 | 第28-41页 |
| 2.1 前言 | 第28-29页 |
| 2.2 实验材料 | 第29-30页 |
| 2.2.1 实验对象 | 第29页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第29页 |
| 2.2.3 主要仪器 | 第29-30页 |
| 2.3 技术路线 | 第30页 |
| 2.4 实验方法 | 第30-34页 |
| 2.4.1 基因组 DNA 提取 | 第30-31页 |
| 2.4.2 引物的设计与合成 | 第31-32页 |
| 2.4.3 人脑胶质瘤组织标本 IDH1 基因测序 | 第32页 |
| 2.4.4 IDH1 基因 PCR 反应条件的优化 | 第32页 |
| 2.4.5 IDH1 基因 qPCR 反应体系的优化 | 第32-33页 |
| 2.4.6 IDH1 基因 qPCR-HRM 检出限 | 第33-34页 |
| 2.4.7 IDH1 基因 qPCR-HRM 检测最低 DNA 模板浓度分析 | 第34页 |
| 2.4.8 IDH1 基因 qPCR-HRM 检测方法的重复性 | 第34页 |
| 2.5 结果与讨论 | 第34-40页 |
| 2.5.1 人脑胶质瘤组织标本 IDH1 基因测序结果 | 第34-35页 |
| 2.5.2 IDH1 基因 PCR 扩增退火温度的优化 | 第35页 |
| 2.5.3 正交实验优化的 IDH1 基因 qPCR 反应体系 | 第35-36页 |
| 2.5.4 IDH1 基因突变检出限 | 第36-37页 |
| 2.5.5 HRM 检测 IDH1 基因突变最低 DNA 模板浓度 | 第37-38页 |
| 2.5.6 HRM 方法检测 IDH1 基因突变的重复性 | 第38-39页 |
| 2.5.7 讨论 | 第39-40页 |
| 2.6 本章小结 | 第40-41页 |
| 第三章 脑胶质瘤 IDH2 基因突变 HRM 检测方法的初步建立 | 第41-55页 |
| 3.1 前言 | 第41-42页 |
| 3.2 实验材料 | 第42-43页 |
| 3.2.1 实验对象 | 第42页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第42页 |
| 3.2.3 主要仪器 | 第42-43页 |
| 3.3 技术路线 | 第43页 |
| 3.4 实验方法 | 第43-47页 |
| 3.4.1 基因组 DNA 提取 | 第43-44页 |
| 3.4.2 引物的设计与合成 | 第44-45页 |
| 3.4.3 人脑胶质瘤组织标本 IDH2 基因测序 | 第45页 |
| 3.4.4 IDH2 基因 qPCR 反应条件的优化 | 第45-47页 |
| 3.4.5 IDH2 基因 qPCR-HRM 检出限 | 第47页 |
| 3.4.6 IDH2 基因 qPCR-HRM 检测最低 DNA 模板浓度分析 | 第47页 |
| 3.4.7 IDH2 基因 qPCR-HRM 方法的重复性 | 第47页 |
| 3.5 结果与讨论 | 第47-54页 |
| 3.5.1 人脑胶质瘤组织标本 IDH2 基因测序结果 | 第47-48页 |
| 3.5.2 响应面实验优化的 IDH2 基因 qPCR 反应条件 | 第48-50页 |
| 3.5.3 IDH2 基因突变检出限 | 第50-51页 |
| 3.5.4 HRM 检测 IDH2 基因突变最低 DNA 模板浓度 | 第51-52页 |
| 3.5.5 HRM 方法检测 IDH2 基因突变的重复性 | 第52-53页 |
| 3.5.6 讨论 | 第53-54页 |
| 3.6 本章小结 | 第54-55页 |
| 第四章 应用 HRM 法检测临床胶质瘤 IDH 基因突变及方法学比较 | 第55-71页 |
| 4.1 前言 | 第55页 |
| 4.2 实验材料 | 第55-57页 |
| 4.2.1 实验对象 | 第55页 |
| 4.2.2 主要试剂 | 第55-56页 |
| 4.2.3 主要仪器 | 第56-57页 |
| 4.3 技术路线 | 第57页 |
| 4.4 实验方法 | 第57-61页 |
| 4.4.1 基因组 DNA 提取 | 第57-58页 |
| 4.4.2 标本参数研究 | 第58-59页 |
| 4.4.3 直接测序法检测突变 | 第59-60页 |
| 4.4.4 HRM 法检测突变 | 第60页 |
| 4.4.5 免疫组化法检测 IDH1 基因突变 | 第60-61页 |
| 4.4.6 统计学分析 | 第61页 |
| 4.5 结果与讨论 | 第61-69页 |
| 4.5.1 直接测序法检测结果 | 第61-62页 |
| 4.5.2 HRM 方法检测结果 | 第62-64页 |
| 4.5.3 IDH1 免疫组化方法检测结果 | 第64-66页 |
| 4.5.4 标本参数和 HRM 方法相关性分析 | 第66-69页 |
| 4.5.5 讨论 | 第69页 |
| 4.6 本章小结 | 第69-71页 |
| 结论与展望 | 第71-73页 |
| 结论 | 第71页 |
| 本论文的创新之处 | 第71-72页 |
| 展望 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-82页 |
| 附表 | 第82-85页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第85-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 附件 | 第87页 |
