| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 縮略语表 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-14页 |
| 2 材料和方法 | 第14-28页 |
| 2.1 主要仪器 | 第14页 |
| 2.2 主要材料 | 第14-15页 |
| 2.3 主要试剂 | 第15-16页 |
| 2.4 主要试剂的配制方法 | 第16页 |
| 2.4.1 MTT工作液的配制 | 第16页 |
| 2.4.2 虾青素溶液的配制 | 第16页 |
| 2.4.3 磷酸盐缓冲液(PBS)的配制 | 第16页 |
| 2.4.4 PCR引物溶液的配制 | 第16页 |
| 2.5 实验方法 | 第16-18页 |
| 2.5.1 香烟烟雾提取物的制备 | 第16-17页 |
| 2.5.2 细胞培养技术和方法 | 第17-18页 |
| 2.6 MTT法检测香烟提取物及虾青素对于细胞增殖的影响 | 第18-19页 |
| 2.6.1 MTT法检测香烟烟雾提取物对于细胞增殖的影响 | 第18-19页 |
| 2.6.2 MTT法检测虾青素对于细胞增殖的影响 | 第19页 |
| 2.7. 细胞处理及分组 | 第19-20页 |
| 2.7.1 不同浓度的香烟烟雾提取物刺激A549细胞 | 第19页 |
| 2.7.2 不同浓度的虾青素干预分组 | 第19-20页 |
| 2.8 蛋白定量 | 第20页 |
| 2.9 ELISA法检测细胞上清液中MUC5AC的含量 | 第20-21页 |
| 2.10 RT-qPCR检测细胞中MUC5ACmRNA含量变化 | 第21-23页 |
| 2.10.1 trizol法提取细胞中总RNA | 第21-22页 |
| 2.10.2 逆转录合成cDNA | 第22页 |
| 2.10.3 PCR仪扩增 | 第22-23页 |
| 2.11. ROS试剂盒检测ROS | 第23页 |
| 2.11.1 实验分为5组 | 第23页 |
| 2.11.2 细胞内ROS的检测 | 第23页 |
| 2.12. western blot检测细胞中EGFR、p-EGFR蛋白表达情况 | 第23-25页 |
| 2.12.1 实验分组同上,处理完成后提取蛋白 | 第23-24页 |
| 2.12.2 蛋白定量：同前 | 第24页 |
| 2.12.3 电泳 | 第24页 |
| 2.12.4 转膜 | 第24-25页 |
| 2.12.5 封闭 | 第25页 |
| 2.12.6 一抗孵育 | 第25页 |
| 2.12.7 二抗孵育 | 第25页 |
| 2.12.8 显影 | 第25页 |
| 2.13 试验流程图 | 第25-27页 |
| 2.14 统计学分析 | 第27-28页 |
| 3 结果 | 第28-35页 |
| 3.1 不同浓度香烟烟雾提取物,在不同时间对于细胞增殖的影响 | 第28页 |
| 3.2 不同浓度虾青素刺激细胞24小时对于细胞增殖的影响 | 第28-29页 |
| 3.3 不同浓度香烟烟雾提取物溶液对于MUC5ACmRNA及蛋白分泌的影响 | 第29-31页 |
| 3.4 不同浓度虾青素对香烟烟雾提取物诱导黏蛋白MUC5AC高分泌的影响 | 第31-32页 |
| 3.5 虾青素及DMTU抑制CSE诱导气道粘蛋白MUC5AC基因转录及蛋白表达 | 第32页 |
| 3.6 虾青素对香烟烟雾提取物刺激A549细胞24h后ROS含量变化的影响 | 第32-33页 |
| 3.7 虾青素对香烟烟雾提取物刺激细胞24后EGFR、p-EGFR蛋白变化的影响 | 第33-35页 |
| 4 讨论 | 第35-37页 |
| 4.1 气道黏液高分泌模型的建立 | 第35页 |
| 4.2 虾青素对于香烟烟雾提取物诱导气道黏蛋白MUC5AC高分泌具有抑制作用 | 第35-36页 |
| 4.3 虾青素通过ROS/EGFR通路抑制CSE诱导的A549细胞MUC5AC高分泌 | 第36-37页 |
| 5 结论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-42页 |
| 综述 | 第42-53页 |
| 参考文献 | 第47-53页 |
| 致谢 | 第53页 |
