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抗氧化剂原花色素对蘑菇酪氨酸酶活性的影响及机理研究

摘要第14-16页
Abstract第16-18页
第一章 前言第19-32页
    1.1 原花色素的研究第19-26页
        1.1.1 原花色素的概念和分类第19-22页
        1.1.2 植物样品的储存及原花色素的提取、分离与纯化第22页
        1.1.3 原花色素的定量分析第22-24页
        1.1.4 原花色素的结构分析第24-25页
            1.1.4.1 核磁共振碳谱分析植物原花色素结构第24页
            1.1.4.2 基于色谱分离技术的结构分析第24-25页
            1.1.4.3 质谱技术分析植物原花色素结构第25页
        1.1.5 原花色素的抗氧化活性第25-26页
    1.2 酪氨酸酶的研究第26-31页
        1.2.1 酪氨酸酶的结构第26-29页
        1.2.2 酪氨酸酶抑制剂的研究第29-30页
        1.2.3 酪氨酸酶抑制剂的应用第30-31页
    1.3 本课题的研究内容与研究意义第31-32页
第二章 响应曲面法优化多酚提取条件第32-46页
    2.1 实验部分第32-35页
        2.1.1 仪器第32页
        2.1.2 材料与试剂第32页
        2.1.3 实验方法第32-35页
            2.1.3.1 总酚含量的测定第32页
            2.1.3.2 总黄酮含量的测定第32-33页
            2.1.3.3 FRAP法测定抗氧化能力第33页
            2.1.3.4 DPPH法测定自由基清除能力第33页
            2.1.3.5 单因素条件实验设计第33-34页
            2.1.3.6 响应曲面法第34页
            2.1.3.7 统计学分析第34-35页
    2.2 结果与讨论第35-45页
        2.2.1 单因素条件优化第35-39页
            2.2.1.1 乙醇浓度的优化第35页
            2.2.1.2 提取时间的优化第35-36页
            2.2.1.3 提取温度的优化第36-38页
            2.2.1.4 固液比的优化第38页
            2.2.1.5 提取次数的优化第38-39页
            2.2.1.6 抗氧化值指标与多酚含量的相关性第39页
        2.2.2 响应曲面法优化第39-45页
    2.3 小结第45-46页
第三章 原花色素结构解析第46-54页
    3.1 实验部分第46-47页
        3.1.1 仪器第46页
        3.1.2 材料与试剂第46页
        3.1.3 原花色素的提取与纯化第46-47页
            3.1.3.1 原花色素的提取与纯化第46页
            3.1.3.2 原花色素的卞硫醇降解第46-47页
            3.1.3.3 HPLC-DAD-MS分析原花色素降解产物及副产物第47页
            3.1.3.4 原花色素的液体~(13)C NMR分析第47页
            3.1.3.5 MALDI-TOF-MS分析第47页
    3.2 结果与讨论第47-53页
        3.2.1 原花色素的液体~(13)C NMR分析第47-48页
        3.2.2 降解产物HPLC-ESI-MS分析第48-50页
        3.2.3 原花色素的MALDI-TOF-MS分析第50-53页
    3.3 小结第53-54页
第四章 原花色素的抗氧化活性分析第54-63页
    4.1 实验部分第54-55页
        4.1.1 仪器第54页
        4.1.2 材料与试剂第54页
        4.1.3 实验方法第54-55页
            4.1.3.1 原花色素的提取与纯化第54页
            4.1.3.2 总酚含量的测定第54页
            4.1.3.3 总黄酮含量的测定第54页
            4.1.3.4 FRAP法测定抗氧化能力第54-55页
            4.1.3.5 DPPH法测定自由基清除率第55页
            4.1.3.6 ABTS法测定自由基清除率第55页
            4.1.3.7 统计学分析第55页
    4.2 结果与讨论第55-62页
        4.2.1 植物样品的总酚含量第55-56页
        4.2.2 原花色素总酚含量的比较第56页
        4.2.3 原花色素总黄酮含量的比较第56-57页
        4.2.4 FRAP抗氧化能力的比较第57-58页
        4.2.5 DPPH自由基清除率的比较第58-59页
        4.2.6 ABTS自由基清除率的比较第59-62页
        4.2.7 原花色素结构与抗氧化活性的关系第62页
    4.3 小结第62-63页
第五章 原花色素对酪氨酸酶活性的影响第63-82页
    5.1 实验部分第63-66页
        5.1.1 仪器第63页
        5.1.2 材料与试剂第63页
        5.1.3 实验方法第63-66页
            5.1.3.1 原花色素对酪氨酸酶活性的影响及酶抑制动力学分析第63-64页
                5.1.3.1.1 原花色素对蘑菇酪氨酸酶单酚酶活力的影响第63页
                5.1.3.1.2 原花色素对蘑菇酪氨酸酶双酚酶活力的影响第63-64页
                5.1.3.1.3 原花色素对蘑菇酪氨酸酶二酚酶抑制类型的测定第64页
                5.1.3.1.4 原花色素对酶抑制作用动力学常数测定第64页
            5.1.3.2 荧光淬灭法研究原花色素对酪氨酸酶的作用机理第64页
            5.1.3.3 采用紫外可见光谱分析原花色素对酪氨酸酶作用的光谱学研究第64-65页
                5.1.3.3.1 效应物对蘑菇酪氨酸酶催化L-多巴氧化反应光谱的影响第64-65页
                5.1.3.3.2 效应物对高碘酸钠氧化L-多巴反应光谱的影响第65页
                5.1.3.3.3 原花色素与铜离子的相互作用第65页
            5.1.3.4 配体小分子与酪氨酸酶模型的分子对接研究第65-66页
                5.1.3.4.1 配体小分子与酪氨酸酶三维结构模型的构建第65-66页
                5.1.3.4.2 分子对接第66页
    5.2 结果与讨论第66-81页
        5.2.1 原花色素对蘑菇酪氨酸酶活性的影响及酶抑制机理第66-71页
            5.2.1.1 原花色素对蘑菇酪氨酸酶单酚酶活力的影响第66-68页
            5.2.1.2 原花色素对蘑菇酪氨酸酶双酚酶活力的影响第68-70页
            5.2.1.3 原花色素对蘑菇酪氨酸酶的抑制机理第70-71页
            5.2.1.4 原花色素对蘑菇酪氨酸酶的抑制类型第71页
        5.2.2 荧光淬灭法研究原花色素对蘑菇酪氨酸酶的作用机理第71-73页
        5.2.3 紫外可见光谱分析原花色素对酪氨酸酶的作用机理第73-78页
            5.2.3.1 原花色素对蘑菇酪氨酸酶催化L-酪氨酸氧化反应光谱的影响第73-76页
            5.2.3.2 原花色素对蘑菇酪氨酸酶二酚酶催化L-多巴氧化反应光谱的影响第76-77页
            5.2.3.3 原花色素对高碘酸钠氧化L-多巴反应光谱的影响第77-78页
            5.2.3.4 原花色素与铜离子的相互作用第78页
        5.2.4 配体与酪氨酸酶模型的对接研究第78-81页
    5.3 小结第81-82页
第六章 结论与展望第82-84页
    6.1 结论第82-83页
    6.2 展望第83-84页
参考文献第84-89页
硕士期间发表论文及所获荣誉第89-91页
致谢第91页

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